Что такое findslide.org?

FindSlide.org - это сайт презентаций, докладов, шаблонов в формате PowerPoint.


Для правообладателей

Обратная связь

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Яндекс.Метрика

Презентация на тему Клеточная инженерия. Животные

Содержание

Основные методы клеточной инженериикультивированиегибридизацияреконструкция
ОСНОВЫ БИОТЕХНОЛОГИИ КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕНЕРИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9 Основные методы клеточной инженериикультивированиегибридизацияреконструкция ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9 Культуры животных. Среды для культивирования Культуры животных. Методы культивирования Культуры животных. Классификация по адаптации к жизни in vitro. ОБЛАСТИ ПРИМЕНЕНИЯКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9 Фундаментальные аспекты Прикладные аспекты ТЕСТ-СИСТЕМЫКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9 ПРЕИМУЩЕСТВА по сравнению с тест-системами in vivo:простота культивированиявозможности контроля и большая воспроизводимостьсокращение Культуры клеток как тест-система в доклинических исследованияхВ системе доклинического исследования лекарственных препаратов СОМАТИЧЕСКИЕ ГИБРИДЫКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9 Получение гибридных клонов «человек-мышь»http://vivovoco.astronet.ru/VV/JOURNAL/NATURE/06_07/INST-3.HTMКлетки мыши и лейкоциты человека обрабатывают полиэтиленгликолем, образуются гетерокарионы, НА ГЕТЕРОКАРИОНАХ И СОМАТИЧЕСКИХ ГИБРИДАХ ИЗУЧАЮТ:реактивацию геномовактивацию и подавление экспрессии генов, роль РЕКОНСТРУКЦИЯ. СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9 История открытия. Появление термина. 1908 г. – появление термина «стволовые клетки» гистолог История открытия. Исследования.1960-х гг. канадские ученые Эрнест Мак-Кулох и Джеймс Тилл нашли История открытия. Исследования.1970-е гг. А.Я. Фриденштейн и И.Л. Чертков заложили основы науки История открытия. Исследования.1998 г. публикация статей о выделении эмбриональных стволовых клеток из Стволовые клетки. Определение термина.это недифференцированные клетки, способные как к самоподдержанию, так и Стволовые клетки. Свойства. Стволовые клетки. Свойства. Дифференцировка.дифференцировка большинства типов стволовых клеток происходит по принципу поэтапного Стволовые клетки. Классификация по способности к дифференциации.Потентность – это способность стволовых клеток http://www.tankonyvtar.huКлассификация по способности к дифференциацииТотипотентные клетки: программа тотипотентности существует в ооците, зиготе Стволовые клетки. Классификация по источнику для получения.Эмбриональные стволовые клетки (ЭСК)Фетальные стволовые клетки Классификация по источнику выделения. Эмбриональные.образуют внутреннюю клеточную массу, или эмбриобласт, на ранней Характеристика:1.могут генерировать до 300 популяций2.стабильный диплоидный кариотип3.высокая теломеразная активность4. минимальный фенотип5. рост Фетальные СК частично детерминированные клетки определенных тканей сформировавшегося фетуса (гестация от 6 Рисунок из http://razumru.ru/science/popular/smirnov.htmСтволовые клетки взрослого организма СК тканевые предшественникиТканеспецифичные прогениторные клетки (клетки-предшественницы) – стволовые клетки, детерминированные на дифференцировку Стволовые кроветворные клеткиМультипотентные стволовые клетки, дающие начало клеткам крови:миелоидного ряда (моноциты, макрофаги, Мезенхимальные стромальные клеткиМультипотентные стволовые клетки, способные дифференцироваться в остеобласты (клетки костной ткани), Лимит Хейфликав клетках существует механизмих старения (теломеры), который лимитирует количество клеточных делений Индуцированные стволовые клетки (иСК) – клетки, полученные из каких-либо иных (соматических, репродуктивных Стволовые клетки. Перепрограммирование. SCNT – пересадка ядер, взятых из соматических клеток, в Стволовые клетки. Перспективы. Клеточная трансплантология Клеточная терапияметод позволяет преодолеть:дефицит донорских органоввысокую стоимость КЛОНИРОВАНИе ЖИВОТНЫХКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9 Формы клонирования Предыстория метода1938 г. – Х. Шпеман предложил эксперимент по переносу ядра ЭКСПЕРИМЕНТ Г.В. ЛОПАШЕВАГеоргий Викторович Лопашов (1912-2010)1948 г.разработал метод трансплантации ядер в яйцеклетку лягушки ЭКСПЕРИМЕНТ  Р. БРИГГСА и Т. КИНГА Роберт Бриггс и Томас Кинг(1911-1983) ЭКСПЕРИМЕНТ Дж. ГЕРДОНАДжон Гёрдон (1933)1962 г. использовал в качестве донора ядер специализировавшиеся ЭКСПЕРИМЕНТ Л.М. ЧАЙЛАХЯНА и сотр.1987 г.первое клонирование млекопитающих (лабораторная линия мышей-альбиносов CBWA ЭКСПЕРИМЕНТ Я. УИЛМУТАЯн Уилмут   Долли(1944)     (1996-2003)Билл перенос ядра из дифференцированной клетки в неоплодотворённую яйцеклетку в энуклеированную яйцеклетку с I этап Получение ядра для трансплантацииII этап Получение энуклеированной клетки-реципиентаIII этап Получение 1 Этап. Получение ядра для трансплантацииДонорская клетка отбирается у клонируемого животного и 2 Этап. Получение энуклеированной яйцеклеткиРеципиентная клетка (неоплодотворенная яйцеклетка) отобранная у животного непосредственно 3 Этап. Реконструирование зиготыядро с хромосомной ДНК клетки-донора соединяется с лишенной генетического материала яйцеклеткой (слияние) МЕТОДЫ СЛИЯНИЯ. МИКРОМАНИПУЛЯЦИЯтонкой микропипеткой прокалывают зоны пеллюцида и плазматической мембраны и извлекают МЕТОДЫ СЛИЯНИЯ.  ЭЛЕКТРОСТИМУЛЯЦИЯпервый разряд – для слияния клетоквторой – для стимуляции механизма дробления 4 Этап. Процедура ЭКО или терапевтическое клонированиеКультивирование in vitro – реконструированный зародыш вступает в стадию дробления Бластоциста приближается к стенке матки Бластоциста начинает внедряться (имплантироваться) под слизистую оболочку клонированиерепродуктивноетерапевтическоесоздание точной копии организма с использованием его генетического материала (клонирование исчезающих или Основные современные подходы при клонировании животныхФрагментирование предимплантационного эмбриона со стимуляцией последующего развития ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ КЛОНИРОВАНИЕполучения клеточных культур – трансплантатов 1. Оплодотворенная яйцеклетка (зигота)  2. Зигота делится надвое 
Слайды презентации

Слайд 2 Основные методы клеточной инженерии
культивирование
гибридизация
реконструкция

Основные методы клеточной инженериикультивированиегибридизацияреконструкция

Слайд 3 ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

Слайд 4 Культуры животных. Среды для культивирования

Культуры животных. Среды для культивирования

Слайд 5 Культуры животных. Методы культивирования

Культуры животных. Методы культивирования

Слайд 6 Культуры животных. Классификация по адаптации к жизни in

Культуры животных. Классификация по адаптации к жизни in vitro.

vitro.


Слайд 7 ОБЛАСТИ ПРИМЕНЕНИЯ
КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

ОБЛАСТИ ПРИМЕНЕНИЯКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

Слайд 8 Фундаментальные аспекты

Фундаментальные аспекты

Слайд 9 Прикладные аспекты

Прикладные аспекты

Слайд 10 ТЕСТ-СИСТЕМЫ
КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

ТЕСТ-СИСТЕМЫКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

Слайд 11 ПРЕИМУЩЕСТВА по сравнению с тест-системами in vivo:

простота культивирования
возможности

ПРЕИМУЩЕСТВА по сравнению с тест-системами in vivo:простота культивированиявозможности контроля и большая

контроля и большая воспроизводимость
сокращение временных и экономических затрат
возможность прижизненного

визуального наблюдения клеток, сохраняющих жизнеспособность в течение всего эксперимента, с помощью микроскопа

ТРЕБОВАНИЯ
стандартизация качества культуры клеток и тканей (принципы GLP для альтернативных методов: Good Cell Culture Practice (GCCP))

Культуры в тестировании


Слайд 12 Культуры клеток как тест-система в доклинических исследованиях
В системе

Культуры клеток как тест-система в доклинических исследованияхВ системе доклинического исследования лекарственных

доклинического исследования лекарственных препаратов первым этапом является оценка токсичности

соединения для культуры клеток и лабораторных животных

GMP (Good Manufacturing Practice) – надлежащая производственная практика

GLP (Good Laboratory Practice) – Надлежащая лабораторная практика

GCP (Good Clinical Practice) – надлежащая клиническая практика


Слайд 13 СОМАТИЧЕСКИЕ ГИБРИДЫ
КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

СОМАТИЧЕСКИЕ ГИБРИДЫКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

Слайд 14 Получение гибридных клонов «человек-мышь»
http://vivovoco.astronet.ru/VV/JOURNAL/NATURE/06_07/INST-3.HTM
Клетки мыши и лейкоциты человека

Получение гибридных клонов «человек-мышь»http://vivovoco.astronet.ru/VV/JOURNAL/NATURE/06_07/INST-3.HTMКлетки мыши и лейкоциты человека обрабатывают полиэтиленгликолем, образуются

обрабатывают полиэтиленгликолем, образуются гетерокарионы, затем формируется гибридная клетка с

ядром, содержащим хромосомы обоих родительских видов.
В используемой селективной среде погибают мышиные клетки, не имеющие активного гена ТК1 (необходимого для биосинтеза ДНК), и лейкоциты человека, поскольку без специальных стимуляторов они in vitro не делятся. Выживают только гибридные клетки, в которые лейкоциты внесли ген ТК1.

Слайд 15 НА ГЕТЕРОКАРИОНАХ И СОМАТИЧЕСКИХ ГИБРИДАХ

ИЗУЧАЮТ:
реактивацию геномов
активацию и

НА ГЕТЕРОКАРИОНАХ И СОМАТИЧЕСКИХ ГИБРИДАХ ИЗУЧАЮТ:реактивацию геномовактивацию и подавление экспрессии генов,

подавление экспрессии генов, роль в этих процессах ядра и

цитоплазмы

СОСТАВЛЯЮТ:
карты хромосом

Соматические гибриды. Применение.


Слайд 16 РЕКОНСТРУКЦИЯ. СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ
КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

РЕКОНСТРУКЦИЯ. СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

Слайд 17 История открытия. Появление термина.
1908 г. – появление

История открытия. Появление термина. 1908 г. – появление термина «стволовые клетки»

термина «стволовые клетки»
гистолог А.А. Максимов исследуя развитие клеток

крови создал теорию стволовых клеток

Александр Александрович
Максимов

Доклад «Лимфоцит как общая стволовая клетка различных элементов крови в эмбриональном развитии и постфетальной жизни млекопитающих» в 1909 г. в Берлине на заседании гематологов


Слайд 18 История открытия. Исследования.
1960-х гг.
канадские ученые Эрнест Мак-Кулох

История открытия. Исследования.1960-х гг. канадские ученые Эрнест Мак-Кулох и Джеймс Тилл

и Джеймс Тилл нашли кроветворные (гемопоэтические) стволовые клетки в

костном мозге

Слайд 19 История открытия. Исследования.
1970-е гг. А.Я. Фриденштейн и И.Л.

История открытия. Исследования.1970-е гг. А.Я. Фриденштейн и И.Л. Чертков заложили основы

Чертков заложили основы науки о стволовых клетках костного мозга,

открыв гемопоэтические и стромальные стволовые клетки («переоткрытые» в 1990-х гг. американцами)

Александр Яковлевич
Фриденштейн

Иосиф Львович
Чертков

Монография «Клеточные основы кроветворения (кроветворные клетки предшественники », 1977 г.


Слайд 20 История открытия. Исследования.
1998 г. публикация статей о выделении

История открытия. Исследования.1998 г. публикация статей о выделении эмбриональных стволовых клеток

эмбриональных стволовых клеток из бластоцисты человека
Джеймс Томсон в журнале

Science
Джон Герхарт в Анналах национальной академии США

По утверждению журнала Science выделение и размножение в питательной среде эмбриональных стволовых клеток является третьим по значимости открытии в биологии (после расшифровки двойной спирали ДНК и завершении научной программы «Геном человека»).

Джеймс Томсон

Джон Герхарт


Слайд 21 Стволовые клетки. Определение термина.
это недифференцированные клетки, способные как

Стволовые клетки. Определение термина.это недифференцированные клетки, способные как к самоподдержанию, так

к самоподдержанию, так и к дифференцировке в зрелые специализированные

клетки

Слайд 22 Стволовые клетки. Свойства.

Стволовые клетки. Свойства.

Слайд 23 Стволовые клетки. Свойства. Дифференцировка.
дифференцировка большинства типов стволовых клеток

Стволовые клетки. Свойства. Дифференцировка.дифференцировка большинства типов стволовых клеток происходит по принципу

происходит по принципу поэтапного иерархического созревания через промежуточные интенсивно

пролиферирующие клетки-предшественники

Слайд 24 Стволовые клетки.
Классификация по
способности к дифференциации.
Потентность –

Стволовые клетки. Классификация по способности к дифференциации.Потентность – это способность стволовых

это способность стволовых клеток давать начало зрелым (специализированным, дифференцированным)

клеточным линиям

Тотипотентные – клетки способные к при определенных условиях развиться до целого организма
Плюрипотентные – клетки способные дифференцироваться во все типы клеток, кроме клеток внезародышевых органов (плаценты и желточного мешка)
Мультипотентные – клетки способные дифференцироваться в разные типы зрелых клеток одного вида ткани
Полипотентные – клетки способные давать до 5 линий развития
Унипотентные – клетки способные дифференцироваться только в один тип клеток

Слайд 25 http://www.tankonyvtar.hu
Классификация по способности к дифференциации
Тотипотентные клетки: программа тотипотентности

http://www.tankonyvtar.huКлассификация по способности к дифференциацииТотипотентные клетки: программа тотипотентности существует в ооците,

существует в ооците, зиготе и 2-8 - клеточных бластомерах.
Плюрипотентные

клетки: клетки эмбриона и внезародышевых оболочек (до 11 дня после оплодотворения, период имплантации зародыша в стенку матки).
Мультипотентные клетки: до 8 недели развития эмбриона включительно.

Слайд 26 Стволовые клетки. Классификация по источнику для получения.
Эмбриональные стволовые

Стволовые клетки. Классификация по источнику для получения.Эмбриональные стволовые клетки (ЭСК)Фетальные стволовые

клетки (ЭСК)

Фетальные стволовые клетки

Стволовые клетки взрослого организма а.) Гемопоэтические

стволовые клетки (ГСК) б.) Мультипотентные мезонхимальные стромальные клетки (ММСК) г.) Тканеспецифичные стволовые клетки

Слайд 27 Классификация по источнику выделения. Эмбриональные.
образуют внутреннюю клеточную массу,

Классификация по источнику выделения. Эмбриональные.образуют внутреннюю клеточную массу, или эмбриобласт, на

или эмбриобласт, на ранней стадии развития эмбриона, являются плюрипотентными,

не экспрессируют HLA антигены

Слайд 28 Характеристика:
1.могут генерировать до 300 популяций
2.стабильный диплоидный кариотип
3.высокая теломеразная

Характеристика:1.могут генерировать до 300 популяций2.стабильный диплоидный кариотип3.высокая теломеразная активность4. минимальный фенотип5.

активность
4. минимальный фенотип
5. рост клонами
Эмбриональные СК
выделяют из внутренней

массы бластоцисты предимплантированного зародыша (гестация 5-10 дней)

Получение:
1.из бластоцисты отбирают внутреннюю клеточную массу
2.помещают ее в чашку Петри с клетками-кормилицами
3.культивируют несколько дней в чашке до образования колоний эмбриональных стволовых клеток.


Слайд 30 Фетальные СК
частично детерминированные клетки определенных тканей сформировавшегося

Фетальные СК частично детерминированные клетки определенных тканей сформировавшегося фетуса (гестация от

фетуса (гестация от 6 до 24 недель)
Характеристика:
могут специализироваться в

1-3 направлениях
частично маркированы МНС
активно пролиферируют

Получение:
1.из абортивного материала
2.помещают на питательные среды
3.культивируют несколько дней в чашке до образования колоний фетальных стволовых клеток.


Слайд 31 Рисунок из http://razumru.ru/science/popular/smirnov.htm
Стволовые клетки взрослого организма

Рисунок из http://razumru.ru/science/popular/smirnov.htmСтволовые клетки взрослого организма

Слайд 33 СК тканевые предшественники
Тканеспецифичные прогениторные клетки
(клетки-предшественницы) – стволовые

СК тканевые предшественникиТканеспецифичные прогениторные клетки (клетки-предшественницы) – стволовые клетки, детерминированные на

клетки, детерминированные на дифференцировку в определённый тип клеток, располагаются

в различных тканях и органах, отвечают за обновление их клеточной популяции, то есть замещают погибшие клетки.

Слайд 34 Стволовые кроветворные клетки
Мультипотентные стволовые клетки, дающие начало клеткам

Стволовые кроветворные клеткиМультипотентные стволовые клетки, дающие начало клеткам крови:миелоидного ряда (моноциты,

крови:
миелоидного ряда (моноциты, макрофаги, нейтрофилы, базофилы, эозинофилы, эритроциты, мегакариоциты,

тромбоциты, дендритные клетки)
лимфоидного ряда (Т-лф, В-лф и естественные киллеры)

Слайд 35 Мезенхимальные стромальные клетки
Мультипотентные стволовые клетки, способные дифференцироваться в

Мезенхимальные стромальные клеткиМультипотентные стволовые клетки, способные дифференцироваться в остеобласты (клетки костной

остеобласты (клетки костной ткани), хондроциты (хрящевые клетки) и адипоциты

(жировые клетки).

Слайд 37 Лимит Хейфлика
в клетках существует механизм
их старения (теломеры), который

Лимит Хейфликав клетках существует механизмих старения (теломеры), который лимитирует количество клеточных

лимитирует количество клеточных делений (не более 50 - 60)
2004

г. журнал Nature Genetics опубликовал результаты длительного
культивирования 9 линий ЭСК из коллекции NIH (национальный институт здоровья, США)

8 из 9 линий на поздних пассажах (55-59) несли генетические изменения характерные для злокачественных клеток:
• 45 % - генные мутации (делеции или амплификации) в области проонкогенов;
• 22 % - мутации митохондриальной ДНК;
• 90 % - увеличение метилирования генных промоторов (эпигенетические изменения).

Вывод: терапевтическое клонирование ЭСК требует минимального
числа пассажей in vitro.

Слайд 38 Индуцированные стволовые клетки (иСК) – клетки, полученные из

Индуцированные стволовые клетки (иСК) – клетки, полученные из каких-либо иных (соматических,

каких-либо иных (соматических, репродуктивных или плюрипотентных) клеток путем эпигенетического

перепрограм-мирования.

Слайд 39 Стволовые клетки. Перепрограммирование.
SCNT – пересадка ядер, взятых

Стволовые клетки. Перепрограммирование. SCNT – пересадка ядер, взятых из соматических клеток,

из соматических клеток, в оплодотворенную
яйцеклетку, из которой предварительно

удалено ядро

слияние соматических клеток с плюрипотентными стволовыми клетками (соматическая гибридизация)
модификация с помощью: генетического материала, кодирующего белковые репрограммирующие факторы (генетическая инженерия)


Слайд 40 Стволовые клетки. Перспективы.
Клеточная трансплантология
Клеточная
терапия
метод позволяет преодолеть:
дефицит

Стволовые клетки. Перспективы. Клеточная трансплантология Клеточная терапияметод позволяет преодолеть:дефицит донорских органоввысокую

донорских органов
высокую стоимость трансплантации
опасность осложнений
проблемы этического характера
метод позволяет осуществлять:
тканевую

и клеточную инженерию
косметологические процедуры
лечебные процедуры
заместительную терапию

Слайд 41 КЛОНИРОВАНИе ЖИВОТНЫХ
КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

КЛОНИРОВАНИе ЖИВОТНЫХКЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕРЕНИЯ. ЖИВОТНЫЕ. Лекция 9

Слайд 42 Формы клонирования

Формы клонирования

Слайд 43 Предыстория метода

1938 г. – Х. Шпеман предложил эксперимент

Предыстория метода1938 г. – Х. Шпеман предложил эксперимент по переносу ядра

по переносу ядра


Слайд 44 ЭКСПЕРИМЕНТ Г.В. ЛОПАШЕВА
Георгий Викторович
Лопашов (1912-2010)
1948 г.
разработал метод

ЭКСПЕРИМЕНТ Г.В. ЛОПАШЕВАГеоргий Викторович Лопашов (1912-2010)1948 г.разработал метод трансплантации ядер в яйцеклетку лягушки

трансплантации ядер в яйцеклетку лягушки


Слайд 45 ЭКСПЕРИМЕНТ Р. БРИГГСА и Т. КИНГА
Роберт Бриггс

ЭКСПЕРИМЕНТ Р. БРИГГСА и Т. КИНГА Роберт Бриггс и Томас Кинг(1911-1983)

и Томас Кинг
(1911-1983) (1921-2000)
1952 г.
повторили

и усовершенствовали метод трансплантации ядер

Слайд 46 ЭКСПЕРИМЕНТ Дж. ГЕРДОНА
Джон Гёрдон
(1933)
1962 г.
использовал в

ЭКСПЕРИМЕНТ Дж. ГЕРДОНАДжон Гёрдон (1933)1962 г. использовал в качестве донора ядер

качестве донора ядер специализировавшиеся клетки эпителия кишечника головастика. Выживало

не более двух процентов клонированного потомства.
1970-е гг.
разработал метод серийных пересадок

Слайд 47 ЭКСПЕРИМЕНТ Л.М. ЧАЙЛАХЯНА и сотр.
1987 г.
первое клонирование млекопитающих (лабораторная

ЭКСПЕРИМЕНТ Л.М. ЧАЙЛАХЯНА и сотр.1987 г.первое клонирование млекопитающих (лабораторная линия мышей-альбиносов

линия мышей-альбиносов CBWA )
Мышку клонировали из невзрачной тушки, которая

16 лет провела в холодильнике

Чайлахян Л.М, Вепренцев Б.Н., Свиридова Т.А., Никитин В.А. Электростимулируемое слияние клеток в клеточной инженерии //Биофизика, 1987


Слайд 48 ЭКСПЕРИМЕНТ Я. УИЛМУТА
Ян Уилмут Долли
(1944)

ЭКСПЕРИМЕНТ Я. УИЛМУТАЯн Уилмут  Долли(1944)   (1996-2003)Билл РитчиКарен Майкок

(1996-2003)
Билл Ритчи
Карен Майкок
Кейт Кэмпбэлл
(1954-2012)
Долли со

своим
первым ягненком Болли

клонирование осуществлялось при помощи технологии ядерного переноса


Слайд 50 перенос ядра из дифференцированной клетки в неоплодотворённую яйцеклетку

перенос ядра из дифференцированной клетки в неоплодотворённую яйцеклетку в энуклеированную яйцеклетку

в энуклеированную яйцеклетку с последующей пересадкой реконструированной зиготы в

яйцевод сурогатной матери

КЛОНИРОВАНИЕ.
ТРАНСНУКЛЕОГЕНЕЗ.
Определение термина.


Слайд 51 I этап Получение ядра для трансплантации
II этап Получение

I этап Получение ядра для трансплантацииII этап Получение энуклеированной клетки-реципиентаIII этап

энуклеированной клетки-реципиента
III этап Получение реконструированной зиготы
IV этап Клонирование
ТЕХНИКА КЛОНИРОВАНИЯ


Слайд 53 1 Этап. Получение ядра для трансплантации
Донорская клетка отбирается

1 Этап. Получение ядра для трансплантацииДонорская клетка отбирается у клонируемого животного

у клонируемого животного и из нее при помощи микропипетки

забирается ядро

Слайд 54 2 Этап. Получение энуклеированной яйцеклетки
Реципиентная клетка (неоплодотворенная яйцеклетка)

2 Этап. Получение энуклеированной яйцеклеткиРеципиентная клетка (неоплодотворенная яйцеклетка) отобранная у животного

отобранная у животного непосредственно после овуляции подвергается энуклеации (удаление

ядра)

Слайд 55 3 Этап. Реконструирование зиготы
ядро с хромосомной ДНК клетки-донора

3 Этап. Реконструирование зиготыядро с хромосомной ДНК клетки-донора соединяется с лишенной генетического материала яйцеклеткой (слияние)

соединяется с лишенной генетического материала яйцеклеткой (слияние)


Слайд 56 МЕТОДЫ СЛИЯНИЯ. МИКРОМАНИПУЛЯЦИЯ
тонкой микропипеткой прокалывают зоны пеллюцида и

МЕТОДЫ СЛИЯНИЯ. МИКРОМАНИПУЛЯЦИЯтонкой микропипеткой прокалывают зоны пеллюцида и плазматической мембраны и

плазматической мембраны и извлекают пронуклеусы
пипеткой, большего диаметра (12 мкм)

в то же отверстие вводят диплоидное ядро донора.

В этом случае меньше травмируется цитоплазма зиготы и транспортируемое ядро донора

Зона пеллюцида – наружная белковая оболочка яйцеклетки


Слайд 57 МЕТОДЫ СЛИЯНИЯ. ЭЛЕКТРОСТИМУЛЯЦИЯ
первый разряд – для слияния клеток
второй

МЕТОДЫ СЛИЯНИЯ. ЭЛЕКТРОСТИМУЛЯЦИЯпервый разряд – для слияния клетоквторой – для стимуляции механизма дробления

– для стимуляции механизма дробления


Слайд 58 4 Этап. Процедура ЭКО или терапевтическое клонирование
Культивирование in vitro

4 Этап. Процедура ЭКО или терапевтическое клонированиеКультивирование in vitro – реконструированный зародыш вступает в стадию дробления


реконструированный зародыш вступает в стадию дробления


Слайд 59 Бластоциста приближается к стенке матки
Бластоциста начинает внедряться

Бластоциста приближается к стенке матки Бластоциста начинает внедряться (имплантироваться) под слизистую

(имплантироваться) под слизистую оболочку
Имплантация практически закончена
Предимплантационный зародыш

помещают в матку суррогатной матери, либо развитие эмбриона останавливают

4 Этап. Процедура ЭКО или терапевтическое клонирование


Слайд 61 клонирование
репродуктивное
терапевтическое
создание точной копии организма с использованием его генетического

клонированиерепродуктивноетерапевтическоесоздание точной копии организма с использованием его генетического материала (клонирование исчезающих

материала
(клонирование исчезающих или вымерших видов; решение проблемы первичного

бесплодия: коммерческое клонирование домашних животных и пр.)

метод получения клеточных культур-трансплантатов
(решение проблем трансплантологии; генная терапия; научные исследования в области молекулярно биологии и пр.)


Слайд 62 Основные современные подходы при клонировании животных
Фрагментирование предимплантационного эмбриона

Основные современные подходы при клонировании животныхФрагментирование предимплантационного эмбриона со стимуляцией последующего

со стимуляцией последующего развития (таким путем были получены особи

разных видов млекопитающих – мышей, коров, овец, лошадей)

Пересадка ядер предимплантационных эмбрионов в энуклеированные клетки (клонирование земноводных – шпорцевой лягушки и пр.)

Пересадка ядер соматических клеток взрослой особи в энуклеированные клетки (овечка Долли)

Слайд 63 ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ КЛОНИРОВАНИЕ
получения клеточных культур – трансплантатов
1. Оплодотворенная яйцеклетка

ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ КЛОНИРОВАНИЕполучения клеточных культур – трансплантатов 1. Оплодотворенная яйцеклетка (зигота)  2. Зигота делится

(зигота)  2. Зигота делится надвое  3-4. Митотическое деление продолжается  5. Через 5-6 дней образуется бластоциста 6. Внутреннюю

часть бластоцисты (ВКМ) помещают на питательную среду для получения стволовых клеток
7. Воздействуя химическими веществами индуцируют дифференцировку СК в клетки разного типа (например, миоциты)
8. Предшественников миоцитов используют для клеточной терапии

  • Имя файла: kletochnaya-inzheneriya-zhivotnye.pptx
  • Количество просмотров: 140
  • Количество скачиваний: 0