Что такое findslide.org?

FindSlide.org - это сайт презентаций, докладов, шаблонов в формате PowerPoint.


Для правообладателей

Обратная связь

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Яндекс.Метрика

Презентация на тему Модели биомембран

Содержание

МОДЕЛИ БИОМЕМБРАН МОНОСЛОЙНЫЕБИСЛОЙНЫЕПОЛИСЛОЙНЫЕОДНОСЛОЙНЫЕМНОГОСЛОЙНЫЕПЛОСКИЕ(БЛМ)СФЕРИЧЕСКИЕ (ЛИПОСОМЫ)
МОДЕЛИ  БИОМЕМБРАНДеев Анатолий ИвановичКафедра медицинской биофизикиadeyev@mail.ru МОДЕЛИ БИОМЕМБРАН МОНОСЛОЙНЫЕБИСЛОЙНЫЕПОЛИСЛОЙНЫЕОДНОСЛОЙНЫЕМНОГОСЛОЙНЫЕПЛОСКИЕ(БЛМ)СФЕРИЧЕСКИЕ (ЛИПОСОМЫ) МОНОСЛОИ ФОСФОЛИПИДОВМонослои фосфолипидов высокочувствительны к анестетикам, изменяющим упаковку фосфолипидов БИСЛОЙНЫЕ ЛИПИДНЫЕ МЕБРАНЫ1 - Стакан с раствором электролита (2)3 - Тефлоновый стаканчик Вольт-амперные характеристики БЛМ БЛМ БЛМ4080120012Ток (пА)Разность потенциалов (мВ)+ 20% of cholesterol+ UVcontrolПри Самопробой БЛМ протонным диффузионным потенциаломHClj (mV)123456789120100806040200Time (min)DpH = 1.2DpH = 3.2Измерение потенциала, На БЛМ были открыты ионофоры, среди которых самый известный — ВАЛИНОМИЦИНВалиномицин за Скульптурная композиция из бронзы, изображающая молекулу валиномицина. Институт биоорганической химии, ул. Академика Волгина. СФЕРИЧЕСКИЕ ФОСФОЛИПИДНЫЕ СЛОИ — ЛИПОСОМЫВ водном растворе происходит самосборка мембран и замыкание Получение мультиламеллярных липосом из пленки фосфолипидов ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЛИПОСОМ С КЛЕТКАМИ ПЕРСПЕКТИВА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ  ЛИПОСОМ ДЛЯ ДОСТАВКИ НК В КЛЕТКИ Наиболее разработанными контейнерами для доставки лекарственных препаратов и генетического материала через гематоэнцефалический Векторные иммунолипосомы на основе антител к нейроспецифическим белкам В наших экспериментах с Накопление векторных липосом на мембранах живых Сх43 положительных клеток глиомы С6.A - Успешные зарубежные и отечественные исследования, проведенные в последние десятилетия, позволили разработать многочисленные NanoSorb® is BioPharma Scientific's trademark for its patented delivery system proven to
Слайды презентации

Слайд 2 МОДЕЛИ БИОМЕМБРАН
МОНОСЛОЙНЫЕ
БИСЛОЙНЫЕ
ПОЛИСЛОЙНЫЕ
ОДНОСЛОЙНЫЕ
МНОГОСЛОЙНЫЕ
ПЛОСКИЕ
(БЛМ)
СФЕРИЧЕСКИЕ (ЛИПОСОМЫ)

МОДЕЛИ БИОМЕМБРАН МОНОСЛОЙНЫЕБИСЛОЙНЫЕПОЛИСЛОЙНЫЕОДНОСЛОЙНЫЕМНОГОСЛОЙНЫЕПЛОСКИЕ(БЛМ)СФЕРИЧЕСКИЕ (ЛИПОСОМЫ)

Слайд 3 МОНОСЛОИ ФОСФОЛИПИДОВ
Монослои фосфолипидов высокочувствительны к анестетикам, изменяющим упаковку

МОНОСЛОИ ФОСФОЛИПИДОВМонослои фосфолипидов высокочувствительны к анестетикам, изменяющим упаковку фосфолипидов

фосфолипидов


Слайд 4 БИСЛОЙНЫЕ ЛИПИДНЫЕ МЕБРАНЫ
1 - Стакан с раствором электролита

БИСЛОЙНЫЕ ЛИПИДНЫЕ МЕБРАНЫ1 - Стакан с раствором электролита (2)3 - Тефлоновый

(2)
3 - Тефлоновый стаканчик с отверстием (4)
4 - БЛМ
5

и 6 - неполяризующиеся электроды

Установка для изучения электрических свойств бислойной липидной мембраны (БЛМ)

Стадии приготовления БЛМ.

С помощью капилляра в отверстие вводят маленькую каплю раствора фосфолипида в жидком углеводороде, гептане или гексане (А).

Молекулы фосфолипидов собираются на поверхности капли таким образом, что полярные головки молекул обращены в водную среду, а гидрофобные хвосты
- внутрь капли (Б).
Постепенно растворитель уходит из капли и улетучивается, а капля превращается в липидную пленку (БЛМ) (С и D).


Слайд 5 Вольт-амперные характеристики БЛМ БЛМ БЛМ
40
80
120
0
1
2
Ток (пА)
Разность потенциалов (мВ)
+

Вольт-амперные характеристики БЛМ БЛМ БЛМ4080120012Ток (пА)Разность потенциалов (мВ)+ 20% of cholesterol+

20% of
cholesterol
+ UV
control
При потенциалах, ниже порогового значения j*,

зависимость между током и разностью потенциалов на мембране – линейная. При потенциалах выше j* ток начинает расти. Процесс прогрессирует во времени и, если не сбросить потенциал, заканчивается механическим разрушением мембраны.
Такое явление называется электрическим пробоем мембраны. Потенциал j*называется потенциалом пробоя и может служить количественной характеристикой электрической прочности мембран.

Слайд 6 Самопробой БЛМ протонным диффузионным потенциалом
HCl
j (mV)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
120
100
80
60
40
20
0
Time (min)
DpH =

Самопробой БЛМ протонным диффузионным потенциаломHClj (mV)123456789120100806040200Time (min)DpH = 1.2DpH = 3.2Измерение

1.2
DpH = 3.2
Измерение потенциала, генерируемого мембраной в результате диффузии

ионов в присутствии переносчика протонов ClCCP (слева). Запись изменения потенциала (справа) . После добавления ClCCP с одной стороны мембраны добавляли кислоту для создания разности рН (DpH).

Потенциал пробоя

j (mV)


Слайд 7 На БЛМ были открыты ионофоры, среди которых самый

На БЛМ были открыты ионофоры, среди которых самый известный — ВАЛИНОМИЦИНВалиномицин

известный — ВАЛИНОМИЦИН
Валиномицин за 1 секунду переносит через мембрану

100 000 ионов калия.

Слайд 8 Скульптурная композиция из бронзы, изображающая молекулу валиномицина. Институт

Скульптурная композиция из бронзы, изображающая молекулу валиномицина. Институт биоорганической химии, ул. Академика Волгина.

биоорганической химии,
ул. Академика Волгина.


Слайд 9 СФЕРИЧЕСКИЕ ФОСФОЛИПИДНЫЕ СЛОИ — ЛИПОСОМЫ
В водном растворе происходит

СФЕРИЧЕСКИЕ ФОСФОЛИПИДНЫЕ СЛОИ — ЛИПОСОМЫВ водном растворе происходит самосборка мембран и

самосборка мембран и замыкание мембран
с образованием липидных пузырьков,

называемых липосомами.

На каф. биофизики РГМУ в 1970-80-ые
с липосомами работал аспирант и
впоследствие преподаватель
Анатолий Деев.


Слайд 10 Получение мультиламеллярных липосом из пленки фосфолипидов

Получение мультиламеллярных липосом из пленки фосфолипидов

Слайд 11 ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЛИПОСОМ С КЛЕТКАМИ

ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЛИПОСОМ С КЛЕТКАМИ

Слайд 12 ПЕРСПЕКТИВА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЛИПОСОМ ДЛЯ ДОСТАВКИ НК В КЛЕТКИ

ПЕРСПЕКТИВА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЛИПОСОМ ДЛЯ ДОСТАВКИ НК В КЛЕТКИ

Слайд 13 Наиболее разработанными контейнерами для доставки лекарственных препаратов и

Наиболее разработанными контейнерами для доставки лекарственных препаратов и генетического материала через

генетического материала через гематоэнцефалический барьер являются липосомы.
Чехонин Владимир Павлович


Заведующий кафедрой медицинских нанобиотехнологий РГМУ. Руководитель Отдела медицинских нанобиотехнологий РГМУ.

Современные методы позволяют приготовить липосомы, модифицированные инертными гидрофильными полимерами, образующим экранирующую «щетину» из цепочек полимера длиной 10-20 нм. Чаще всего в этом качестве используется полиэтиленгликоль (ПЭГ) с молекулярной массой около 2000 Да. Такие ПЭГилированные липосомы становятся «невидимками» (stealth-liposomes) для ретикулоэндотелиальной системы млекопитающих; они в гораздо меньшей степени, чем неПЭГилированные липосомы, подвергаются опсонизации, хуже распознаются макрофагами печени и селезенки и поэтому дольше циркулируют в кровотоке (период полувыведения составляет 15 и более часов).


Слайд 14 Векторные иммунолипосомы на основе антител к нейроспецифическим белкам

Векторные иммунолипосомы на основе антител к нейроспецифическим белкам В наших экспериментах


В наших экспериментах с липосомами в качестве векторных молекул

применялись моноклональные антитела к нейроспецифическим белкам (GFAP GFAP , MBP, NSE). Эти эксперименты проводились с ПЭГилированными иммунолипосомами, в которых с одним наноконтейнером размером 70-120 нм было конъюгировано примерно 90 молекул моноклональных антител. Факт связывания липосом с клетками определялся по появлению специфического красного свечения, обусловленного липидным флюоресцентным индикатором Dil, введенным в состав липосомных мембран. Это свечение появлялось уже при минимальной применявшейся дозе липосом и при самой короткой их инкубации с клеточной культурой, что доказывало адекватность векторной функции приготовленных наноконструкций по их связыванию с антигенами определённых клеток нервной ткани.

Визуализация шванновских клеток с помощью векторных липосом. В. —Dil-ПЭГилированные иммунолипосомы с антителами кклеткам внутри. D —неспецифические иммунолипосомы ×400.


Слайд 15 Накопление векторных липосом на мембранах живых Сх43 положительных

Накопление векторных липосом на мембранах живых Сх43 положительных клеток глиомы С6.A

клеток глиомы С6.
A - Биотинилированные anti-E2 Cx43 антитела +

липосомы со стрептавидином.

Интенсивная красная флюоресценция Сх43-положительных клеток глиомы С6 свидетельствовала о селективной адгезии векторных липосом со SAv и Dil на мембранах этих клеток. Подсчёт клеток с флюоресценцией Dil и сравнение их с общим количеством клеток, оцененных по флюоресценции CFDA SE, показал, что в среднем 10% клеток С6-глиомы в опытных лунках связывали липосомы, и, следовательно, являлись Сх43-положительными.
(Актовая речь в РГМУ им. Н.И.Пирогова
академика РАМН В.П.Чехонина
«Достижения молекулярной и клеточной нейробиологии и роль медицинских биотехнологий в ее развитии», 2010)


Слайд 16 Успешные зарубежные и отечественные исследования, проведенные в последние

Успешные зарубежные и отечественные исследования, проведенные в последние десятилетия, позволили разработать

десятилетия, позволили разработать многочисленные инновационные подходы к адресной доставке

лекарственных средств в ЦНС. Некоторые из них имеют хорошие клинические перспективы.

Наиболее перспективным в этом плане представляется создание наноконтейнерных систем, конъюгированных с иммунохимическими, биохимическими и/или другими молекулярно-биологическими векторами. И в этом аспекте клиническая апробация систем визуализации периглиомного пространства при мультиформных глиобластомах с помощью наночастиц на основе антител к GFAP GFAP и антител к экстраклеточному фрагменту Сх43 —
вопрос уже сегодняшнего дня.

  • Имя файла: modeli-biomembran.pptx
  • Количество просмотров: 133
  • Количество скачиваний: 0