Презентация на тему Нетипичные мембраны. Мембраны архебактерий

evolution of the Archaea
David L. Valentine, Nature Reviews Microbiology

5, 316-323 (April 2007)

МЕМБРАНЫ АРХЕБАКТЕРИЙ

Археи живут преимущественно в экстремальных условиях: низкие рН или высокие температуры.

Вулканические горячие
источники

Кислотные минеральные
источники

не фосфоглицериды жирных кислот, как у эукариот и бактерий,

а многоатомные спирты с цепочками длиной 20—40 атомов углерода; в случае 40-углеродных спиртов мембрана представляет собой не липидный бислой,
а монослой

кислот.

У архей боковые цепи представлены разветвлёнными изопренами.

a unique cell surface
Sonja-Verena Albers, Zalán Szabó & Arnold

J. M. Driessen Nature Reviews Microbiology 4, 537-547 (July 2006)

a | Schematic representation of a cross-section of the cell envelope of Sulfolobus solfataricus showing the cytoplasmic membrane, with membrane-spanning tetraether lipids and an S-layer composed of two proteins: a surface-covering protein (red oval) and a membrane-anchoring protein (yellow oblong). b | Schematic representation of a cell envelope of an archaeon that stains positive with the Gram stain and that contains a pseudomurein layer in addition to the S-layer. The cytoplasmic membrane is composed of diether lipids.

typical habitats for Halobacterium salinarium. Synthesized under increasingly anaerobic

conditions Bacteriorhodopsin provides these archaea with a simple form of photosynthesis. The protein is incorporated in certain areas of the cell membrane (called purple membrane) in a highly organized manner of hexamers & trimers. Bacteriorhodopsin uses light energy to transport protons out of the cell, thus building up a proton gradient that can drive ATP synthases.

ГАЛОБАКТЕРИИ ─ ПРИМЕР ПРОСТЕЙШЕЙ ФОРМЫ ФОТОСИНТЕЗА

спиралей молекулы кофактора — ретиналя. Он перекрывает центральный канал бактериородопсина.

Поглотив фотон, ретиналь переходит из полностью-транс в 13-цис форму. При этом он изгибается и переносит протон с одного конца семиспирального пучка на другой. А потом ретиналь разгибается и возвращается назад, но уже без протона.

громких достижений оптики последних лет стало замедление света до

«человеческих скоростей» и консервация светового импульса.
В этой ситуации настоящей сенсацией стала опубликованная двух физиков из Массачусетского университета в Бостоне P. Wu and D. V. G. L. N. Rao, Physical Review Letters, 95, 253601 (12 December 2005). Авторы работы сообщают, что групповая скорость распространения светового импульса через полимерную пленку с высокой концентрацией белка бактериородопсина составляла менее 0,1 мм/сек, что на 12 порядков меньше скорости света в вакууме!
Авторы работы приводят результаты опытов, в которых пленка толщиной всего десятую долю миллиметра, освещенная управляющим лазером, задерживала прохождение сигнального светового импульса без изменения его формы. В зависимости от параметров управляющего лазерного света длительность задержки широко варьировалась и достигала даже 1 секунды, при этом прозрачность пленки для этого импульса всегда оставалась близкой к 100%.

oscillations and superluminal light in a protein complex (

Optics Express, 16, 3844 (23 April 2008)). В этой статье сообщается уже о наблюдении отрицательной групповой скорости на длине волны 647.1 нм. Кроме того, в 2006 году было заявление о том, что на основе этого белка можно создать новый тип оптической памяти (Protein-coated disc) с беспрецедентной плотностью записи (50 Терабайт на одном диске).

Молекулярное разрешение на упорядоченном участке бислойной пленки бактериородопсина в липидном матриксе Размер СТМ-изображения 2,14´ 2,14 нм2. Средние межмолекулярные растояния 0,33 и 0,37 нм. Величина туннельного напряжения 50 мВ, туннельного тока 1 нА

непредсказуемому мутированию объясняется тем, что грипп представляет собой конструкцию

из восьми отдельных кусочков РНК, свободно плавающих в белковой оболочке (нуклеокапсид), надежно покрытой мембраной. Против самого вируса человечество пока бессильно. Ничто не способно остановить необратимый процесс в зараженной клетке. Но у каждого Ахиллеса где-нибудь да найдется своя «пята». Такое уязвимое место есть у гриппа. Каждая клетка окружена поверхностными антигенами, своего рода «шипами» белков гемаглютинина (H) и нейраминидазы (N), с помощью которых вирус проникает через слизь в клетку, а также покидает погибающую клетку для следующего нападения.

и атакуют конкурентов или врагов этих животных»                         Франк Райан,

британский медик и автор книги
«Вирус X: отслеживание очередного мора» (1998).

Скорее всего, именно от уток и заразился человек гриппом приблизительно 4500 лет назад в Южном Китае, когда китайцы приручили их.

включены специализированные белки, способствующие слиянию мембран.
Такие вирусы называются

оболочечными. Требования к липидно-белковой оболочке двойственны. С одной стороны, она должна уберечь наследственный материал от превратностей судьбы, а с другой — легко разрушаться, когда вирус начинает активную жизнь внутри клетки-жертвы.

Два пути проникновения оболочечного вируса в клетку. Слева — эндоцитоз и слияние в эндосоме: 1 — вирус, 2 — эндосома, 3 — ядро. Справа — слияние с плазматической мембраной.

Оболочечные вирусы проникают в клетку двумя путями.
В первом случае вирус связывается с рецепторами клеточной поверхности, затем в результате эндоцитоза, везикулы, содержащие вирион, отпочковываются.

Другие вирусы, например вирус иммунодефицита человека (HIV), не нуждаются для активации в низких рН и проникают в клетку более простым путем, в ходе которого их оболочки сразу сливаются с плазматической мембраной, и наследственный материал оказывается к клетке.

при отпочковывании синтезируемого вируса. В этой мембране заякорены три

белка: нейраминидаза (Н), ионный канал М2 и гемагглютинин (ГА). При закислении среды
благодаря ионному каналу внутри вириона понижается рН, что приводит к разрушению белковой оболочки М1.
Одновременно активируется гемагглютинин, главная составляющая “машины слияния”.
В ходе ее работы мембраны вируса и клетки смыкаются, и в цитоплазму открывается путь для чужеродного генетического материала.

тримеров. Каждая его молекула состоит из двух субъединиц: ГА1,

обеспечивающей первичный контакт с клеткой-мишенью, и ГА2, отвечающей за слияние. В исходном, нейтральном, состоянии (при рН7) все тримеры ориентированы примерно перпендикулярно к поверхности мембраны, их протяженность ~13 нм. Каждая молекула гемагглютинина прочно заякорена в своей мембране и, что очень важно, имеет в своем составе короткий (25 аминокислот) пептид, который при рН7 спрятан внутри тримера и локализован недалеко от основания белка. После уменьшения pH с 7 до 5 молекулы гемагглютинина глобально перестраиваются, и пептид слияния не просто выходит на свободу, а перемещается в самый верхний конец молекулы и проникает в мембрану жертвы.

клеткой-мишенью образуются розетки из шести—восьми тримеров, внутри каждой из

которых находятся изогнутые липидные участки с радиусом ~10 нм. С помощью электронно-микроскопических и электрофизиологических исследований удалось обнаружить такие локальные вспучивания, получившие название димплов

Образование димплов между мембранами эритроцитов и клеток, экспрессирующих гемагглютинин. Вверху — граница мембран эритроцита и клетки, экспрессирующей ГА, рН 7.4; внизу — то же, но рН 4.9 — видно большое количество контактных областей (цветная стрелка). На врезке показана схема контакта.

образованию поры слияния. Теоретическая модель этого процесса состоит в

следующем: белки слияния, изгибая мембраны, не только сближают их, но и обеспечивают энергией, облегчая образование монослойной перемычки — сталка; липиды из удаленных монослоев деформируются без больших энергетических затрат. В результате образуются новые промежуточные структуры — низкоэнергетические интермедиаты, обеспечивающие слияние.

Первичная пора слияния образуется в области липидных димплов. Следовательно, изменяя липидный состав мембран, можно воздействовать на весь процесс. При сближении липидных бислоев может образоваться перемычка между близлежащими монослоями (так называемый сталк), зародыш будущей поры. Вероятность его образования существенно зависит от липидного состава. Например, введение в монослои лизофосфатидилхолина (LPC), даже в небольших концентрациях, полностью ингибирует слияние.

слияния (1), которая способствует образованию локального мембранного контакта (2)

и перемычки, которая затем превращается в пору слияния (3, 4).

мембраной.
В нейтральную среду (буферный раствор с рН7) впрыскиваются

вирионы, часть которых адсорбируется на бислое. После этого к плоской мембране прижимается микропипетка, заполненная раствором с рН5.
Поскольку кончик пипетки имеет радиус ~1 мкм, весьма вероятно, что внутри него, на липидном пятачке, окажется один или несколько вирионов, в мембрану которых включен флуоресцентный зонд в концентрации самогашения. Низкое рН внутри пипетки инициирует слияние, и зонд диффундирует в бислой. Возникающее при этом разбавление приводит к флуоресценции, которую можно регистрировать.

фосфолипидов имеет гидрофобные хвосты из насыщенных жирных кислот. Именно

они обеспечивают плотную упаковку фосфолипидов на плёнке во время выдоха.