Слайд 2
Лактатдегидрогеназа – относится к классу оксидоредуктаз.
Оксидоредуктазы катализируют
ОВР.
ЛДГ – цитоплазматический цинксодержащий гликолитический фермент, обратимо катализирующий восстановление
пировиноградной кислоты (пируват) в молочную кислоту(лактат) в процессе окисления глюкозы и образования молочной кислоты.
ПИРУВАТ +НАД(Н) ? ЛАКТАТ +НАД
Слайд 3
Фермент широко распространен в организме человека. По степени
убывания активности фермента органы и ткани располагаются в следующем
порядке: почки, сердце, скелетные мышцы, поджелудочная железа, селезенка, печень, легкие, сыворотка крови.
Слайд 4
ЛДГ имеет 5 изоферментов, представляющих различные комбинации из
четырех субъединиц двух основных типов – Н(сердце) и М(мышцы)
по названию органов, где обнаружена их наибольшая активность, которые обозначают цифрами от 1 до5 : ЛДГ1,ЛДГ2,…..ЛДГ5.
Слайд 5
В составе изофермента может быть 4 субъединицы типа
Н(4Н) НННН;
В другом 3 субъединицы Н и одна М(3Н1М)
НННМ
В 3м – 2 субъединицы Н и 2 субъединицы М(2Н2М) ННММ;
В 4м – 1 субъединица Н и 3 М(1Н3М) НМММ
В 5М – четыре субъединицы М(4М) ММММ
Слайд 6
В тканях с преимущественным аэробным обменом веществ (мозг,
сердце, почки) наибольшей активностью обладают
ЛДГ1 и
ЛДГ2;
В тканях с выраженным анаэробным обменом веществ (печень, легкие, скелетная мускулатура, и др.) преобладают ЛДГ4 и ЛДГ5.
Изофермент ЛДГ1 активен при низкой концентрации пирувата и ингибируется его избытком, ЛДГ5 активен при высоких концентрациях пирувата. ЛДГ1 происходит в основном из сердца, а ЛДГ5 – из печени.
Слайд 7
ЛДГ1 обладает устойчивостью к действию мочевины. ЛДГ содержится
не только в сыворотке , но и в эритроцитах,
поэтому сыворотка для анализа должна быть свежей, без следов гемолиза.
Исследование общей активности фермента характеризует интенсивность ОВР организма, определение активности отдельных изоферментов ЛДГ способствует диагностике некоторых заболеваний сердца, печени и др. органов
Слайд 8
Существуют следующие методы определения общей активности ЛДГ в
сыворотке крови:
Колориметрические :
Динитрофенилгидразиновые методы основаны на определении количества ПВК
(продукт реакции) при помощи 2,4-ДНФГ (унифицированный метод)
Редоксиндикаторные методы основаны на превращении бесцветной окисленной формы тетрозолиевых солей в окрашеную форму за счет окисления восстановленного молочной кислотой НАДН.
Слайд 9
Спектрофотометрические – основаный на различии спектров поглощения окисленной
и восстановленной формой НАД.
Принцип метода:
ЛДГ катализирует
превращение лактата в пируват при одновременном восстановлении НАД в НАД(Н) , которые далее восстанавливает в присутствии п-метилфеназонийметилсульфата йоднитротетразониевой фиолетовый в красный формазан.
Слайд 10
Одновременно с определением общей каталитической активности ЛДГ можно
определить долю фермента, устойчивого к действию мочевины, что характерно
для изофермента сердечной фракции.
НАД(Н)+йоднитротетрафиолет+N- метил-Ф. ?красный формазан+НАД
Слайд 11
КДЗ
В норме основным источником ЛДГ в сыворотке крови
являются разрушенные клетки крови. При повреждении тканей фермент поступает
в кровь.
Активность общей ЛДГ возрастает при повреждении миокарда, лейкозах, почечных заболеваниях, гемолитической, серповидноклеточной анемиях, тромбоцитопениях, инфекционных мононуклеозах, а также прогрессивной мышечной дистрофии.
Слайд 12
Все заболевания, протекающие с некрозом тканей(инфаркт миокарда, некротические
поражения почек, гепатиты, панкреатиты, опухоли)как правило, сопровождаются резким повышением
активности ЛДГ в сыворотке крови.
Слайд 13
Увеличение активности ЛДГ1-ЛДГ2:
Инфаркт миокарда, анемия
Острые поражения почечной ткани
Опухолевые
заболевания яичников
Увеличение активности ЛДГ3-ЛДГ4:
Массивные разрушения тромбоцитов и вовлечение в
патологический процесс лимфатической системы.
Увеличение активности ЛДГ5:
- Повреждение скелетных мышц, воспалительные заболевания мышц, печени (гепатиты, цирроз), раковые опухоли.
Слайд 14
Увеличение общей ЛДГ:
Вирусный гепатит, шок, гипоксия, обширные опухолевые
процессы, циррозы, обтурационная желтуха, заболевания почек, опорно-мышечного аппарата.
Нормальные показатели
ЛДГ в сыворотке крови:
0,65-2,60 мккат/л
Доля устойчивого к действию мочевины фермента (сердечная фракция) – 60-80%
Слайд 16
К какому классу ферментов относится ЛДГ?
В каких органах
содержится фермент?
Как различаются ферменты ЛДГ?
Где преимущественно содержится ферментЛДГ1?
Где преимущественно
содержится ферментЛДГ5?
Какая фракция стабильна к мочевине ?
Какими субъединицами представлен фермент ЛДГ?
Какими методами можно определить активность ЛДГ?
Почему при проведении анализа надо использовать свежую сыворотку?
