Слайд 2
Трансферазы- ферменты, катализирующие перенос различных групп атомов от
одной молекулы к другой.
АМИНОТРАСФЕРАЗЫ- катализируют перенос аминогруппы от аминокислоты
на кетокислоту.
АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА- катализирует перенос аминогруппы от Ĺаланина к α –кетоглутаровой ислоте.
АСПАРТАТАМИНОТРАСФЕРАЗА- катализирует перенос аминогруппы от аспарагиновой кислоты к α –кетоглутаровой ислоте
Слайд 3
Аминотрансферазы: аланинаминотранс
фераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ)-близкие по
действию ферменты, участвующие в обмене аминокислот. Коферметом является пиридоксальфосфат.
Реакция обратима.
Слайд 4
Клиническое значение аминотрансфераз
Аминотрансферазы - ферменты, катализирующие межмолекулярный перенос
аминогруппы между аминокислотами и кетокислотами.
Наибольшее клинико-диагностическое значение имеет
определение двух аминотрансфераз: аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ).
Различия в наименовании аминотрансфераз определяются названием той аминокислоты, от которой отделяются аминогруппа. Фермент, катализирующий перенос аминогруппы с аспарагиновой кислоты на кетоглутаровую кислоту, получил название АСТ. Фермент же, катализирующий обратимый перенос аминогруппы с аланина на кетоглутаровую кислоту называется АЛТ.
Слайд 5
Фермент АСТ имеется во всех тканях тела, но
наибольшая активность его наблюдается в печени, сердце, скелетных мышцах
и эритроцитах. Наименьшая активность АСТ отмечена в коже, почках, поджелудочной железе.
Слайд 6
Самое большое количество АЛТ находится в печени, что
определяет важное диагностическое значение активности фермента при заболеваниях этого
органа
Слайд 7
Содержание АСТ и АЛТ в различных клетках в
порядке уменьшения их концентрации.
Слайд 8
Нормальная активность АСТ в сыворотке крови— 10-20 МЕ/л
или до 40 ед.
Нормальная активность АЛТ в сыворотке
крови — 7-40 МЕ/л или до 40 ед.
Слайд 9
При поражении клеток печени вирусами, различными химическими веществами,
в том числе алкоголем и лекарствами (гепатиты), а также
при нарушении оттока желчи из-за сдавления желчного протока или его закупорки камнями, активность АЛТ в крови существенно увеличивается пропорционально тяжести заболевания, и в острых случаях может в 5-10 раз превышать норму. Повышение активности фермента происходит значительно раньше, чем другие очевидные признаки заболевания (желтуха, болевые ощущения и др.).
Определение активности АЛТ обязательно для всех доноров крови для исключения хронических заболеваний печени.
Слайд 10
АСТ в большом количестве находится в сердце и
печени, что используется для диагностики заболеваний этих органов.
Повышение
активности фермента происходит при тех же заболеваниях печени, что и АЛТ, но пропорция между увеличением АСТ и АЛТ при разных заболеваниях различна, поэтому их одновременное определение дает врачу хорошую информацию для постановки точного диагноза. Увеличение активности фермента при инфаркте миокарда происходит через 6-8часов, максимальная активность через 24-36 часов и снижается до нормы через5-6 дней.
Слайд 11
Для постановки диагноза важно значение коэффициента
Де Ритиса
(АСТ/АЛТ)=1,33.
При заболевании печени величина ниже этого значения, при заболеваниях
сердца –выше.
Снижение активности АСТ и АЛТ ниже нормы встречается только при тяжелых поражениях печени, когда значительно уменьшается количество клеток, синтезирующих эти ферменты (обширный некроз, цирроз).
Период полувыведения АСТ составляет 17 часов, АЛТ-47часов.
АЛТ локализуется преимущественно в цитоплазме гепатоцитов. АСТ в цитоплазме и митохондриях клетки.
Слайд 12
АСТ и АЛТ обладают различной активностью в различных
органах и тканях. Наибольшая активность АСТ наблюдается в сердечной
мышце, а АЛТ в ткани печени.В сыворотке активность аминотрасфераз низка и заметно повышается при нарушении целостности мембран клеток печени или сердечной мышцы.
Слайд 13
Определение активности в сыворотке крови является важным тестом
для диагностики инфаркта миокарда и вирусного гепатита. Изучают активность
АЛТ и АСТ в сыворотке крови, а также В тканях печени и сердца.
Слайд 14
СХЕМА ПРИНЦИПА МЕТОДА:
АЛТ
Α-аланин + ά-кетоглутаровая кислота
→ ПВК+2,4ДНФГ→
гидразон ПВК + NaOH → коричневое окрашивание.
АСТ
Аспарагиновая аминокислота + ά-кетоглутаровая кислота → ПВК+2,4ДНФГ→ гидразон ПВК + NaOH → коричневое окрашивание
АЛТ и АСТ –ферменты ; аланин, аспарагиновая кислота, кетоглутаровая кислота-субстрат ; 2,4ДНФГ-ингибитор ; гидразон ПВК -продукт реакции.
При определении активности АСТ и АЛТ пользуются тем, что образующийся продукт реакции пировиноградная кислота (ПВК) при добавлении 2,4 динитрофенилгидрозина (2,4ДНФГ) образует окрашенный гидразон ПВК в щелочной среде. Интенсивность окраски прямо пропорционально количеству образовавшейся ПВК, а значит и активности фермента.
Слайд 16
1этап-подготовительный
2этап-ферментативная реакция
3этап-остановка ферментативной реакции
4этап-обнаружение продукта реакции
5этап-измерение оптической плотности
раствора
6этап-расчет по калибровочной кривой
7этап-интерпретация результатов
Слайд 17
Приготовление 0,4 н NaOH.
Содержимое флакона NaOH (4,0моль/л) развести
в 10 раз.
Слайд 18
Вопросы
Ситуационные задачи
Тесты
Слайд 19
ВОПРОСЫ.
1.К какому классу ферментов относятся аминотрансферазы.
2.Какую реакцию катализируют
АСТ и АЛТ.
3.Какую роль выполняют в организме человека аминотрансферазы.
4.Какие
патологические состояния можно диагностировать при повышении активности АЛТ, АСТ.
5.Составте схему анализа.
6.Какую роль при проведении анализа выполняют физ р-р; 2,4ДНФГ; 0,4 н NaOH.
7.Перечислите этапы анализа, их суть.
8.Укажите нормальные показатели активности АЛТ и АСТ.
9.Укажите название метода определения активности аминотрасфераз.
10.В чем состоит принцип метода.
11.Как определить активность фермента.
12.Как построить калибровочную кривую.
13.КДЗ исследований.
Слайд 20
ЗАДАЧИ.
1.При проведении анализа активность АЛТ и АСТ увеличилась
более чем 10 раз. Какое патологическое состояние можно предположить.
2.
При проведении анализа активность АСТ увеличилась более чем 5 раз, а активность АЛТ изменилась незначительно. Какое патологическое состояние можно предположить.
3.При определении коэффициента Де Ритиса, значение больше, чем 1,33. Что это означает.
4. .При определении коэффициента Де Ритиса, значение меньше, чем 1,33. Что это означает.
5.Больной обратился в ЛПУ с жалобами на сильные боли в области сердца с иррадиацией в левую лопатку, руку, шею. Какой анализ необходимо провести.
6. .Больной обратился в ЛПУ с жалобами на общую слабость, недомогание, похудание, потерю аппетита, тошнота, боль в правом подреберье. Какой анализ необходимо провести.
7.При проведении анализа кровь больного попала на халат. Ваши действия.
8.При проведении анализа кровь больного попала на стол. Ваши действия.
