Слайд 2
Синтетический аппарат клетки
Представлен органеллами, синтезирующими различные вещества,
которые используются самой клеткой или идут на нужды макроорганизма.
Белоксинтезирующий
аппарат клетки (БСА) состоит из рибосом, информационной РНК, транспортной РНК (тРНК), эндоплазматической сети (ЭПС), комплекса Гольджи и белковых факторов, регулирующих процессы синтеза.
Слайд 3
Рибосомы
Немембранные, электронноплотные, округлые (диаметром 15 -30 нм)
органеллы, обеспечивающие создание первичной структуры белка путем образования пептидных
связей между аминокислотами.
В химическом плане в рибосомах, примерно, поровну представлены рибосомальные РНК (рРНК) и рибосомальные белки (около 80 различных видов).
Слайд 4
Рибосомы
Каждая рибосома состоит из двух (большей и меньшей)
субъединиц, которые диссоциированно располагаются в цитоплазме и объединяются на
период работы БСА:
Малая субъединица связывается с иРНК, а большая субъединица катализирует образование полипептидной цепи.
Большая субъединица имеет 2 активных центра: аминоацильный (А) - для присоединения аминоацил – тРНК и пептидильный центр, в котором находится пептидил – тРНК (т.е. комплекс: тРНК + растущая полипептидная цепь).
Слайд 5
1. Синтез мРНК рибосомных белков РНК полимеразой II.
2. Экспорт мРНК из ядра. 3. Узнавание мРНК рибосомой
и 4. синтез рибосомных белков. 5. Синтез предшественника рРНК (45S — предшественник) РНК полимеразой I. 6. Синтез 5S pРНК РНК полимеразой III. 7. Сборка большой рибонуклеопротеидной частицы, включающей 45S-предшественник, импортированные из цитоплазмы рибосомные белки, а также специальные ядрышковые белки и РНК, принимающие участие в созревании рибосомных субчастиц. 8. Присоединение 5S рРНК, нарезание предшественника и отделение малой рибосомной субчастицы. 9. Дозревание большой субчастицы, высвобождение ядрышковых белков и РНК. 10. Выход рибосомных субчастиц из ядра. 11. Вовлечение их в трансляцию
Схема синтеза рибосом в клетках эукариот.
Слайд 6
Виды рибосом
Морфологически (по размерам, индексу седиментации и молекулярной
массе) различают рибосомы прокариот, цитоплазматические рибосомы эукариот и митохондриальные
рибосомы эукариот.
Таблица 1.
Характеристика различных видов рибосом.
Слайд 8
Строение
рибосомы
Схема РНК-связывающих участков рибосомы. Буквами обозначены участки
связывания тРНК. А — аминоацил-тРНК-связывающий участок, Р — пептидил-тРНК-связывающий участок, Е —
участок отсоединения тРНК от рибосомы (англ. exit).
Слайд 9
Виды РНК
матричные РНК являются матрицей для синтеза белка
в рибосомах;
транспортные РНК доставляют аминокислоты к рибосомам и
реализуют генетический код;
рибосомная РНК составляет активный центр рибосом, катализирующий образование пептидной связи между аминокислотами.
Слайд 10
Нуклеотиды — фосфатные эфиры нуклеозидов. Нуклеозиды — N–гликозильные производные (N–гликозиды)
разных азотистых оснований (пурины, пиримидины), содержащих дезоксирибозу или рибозу
(в молекуле РНК).
· Пуриновые основания — аденин (A) и гуанин (G).
· Пиримидиновые основания — цитозин (C), тимин (T) и урацил (U), присутствующий только в молекуле РНК.
Полинуклеотиды. При помощи фосфодиэфирных связей нуклеотиды образуют полинуклеотидную цепь, при этом ковалентные фосфодиэфирные связи соединяют 5’‑атом углерода одного нуклеотида с 3’‑атомом углерода следующего нуклеотида цепи. Последовательность нуклеотидов в цепи кодирует наследственную информацию.
· Экзон — последовательность нуклеотидов, кодирующих молекулу РНК.
· Интрон — некодирующая последовательность между экзонами. После синтеза РНК на ДНК–матрице (транскрипция) последовательности РНК, комплементарные последовательностям интронов, удаляются при помощи специальных ферментов, а оставшиеся последовательности сближаются (сплайсинг).
· Кодон — последовательность из трёх смежных нуклеотидов, кодирующая какую-либо аминокислоту или терминацию полипептидной цепи.
Слайд 11
Биосинтез белка (схематично)
Биосинтез белка осуществляется поэтапно в ядре
и цитоплазме.
В ядре происходит:
1. Образование (транскрипция, процессинг, сплайсинг) всех
видов РНК.
2. Транспорт всех РНК и рибосом в цитоплазму.
Слайд 12
Биосинтез белка (схематично)
В цитоплазме идет трансляция (синтез) на
свободных полисомах или грЭПС белковых молекул по следующей схеме:
1.
Инициация
2. Собственно трансляция (транслокация и элонгация)
3. Терминация
Слайд 13
Биосинтез белка (схематично)
Во время инициации последовательно происходит образование
комплекса полной рибосомы – иРНК и присоединение тРНК с
первой аминокислотой.
В период собственно трансляции происходит, соответственно заданной программе, построение полипептидной цепочки (элонгация - удлинение).
Терминация (окончание синтеза белка) осуществляется бессмысленными кодонами иРНК (остановка трансляции) и специальными терминирующими факторами, приводящими к диссоциации компонентов БСА.
Слайд 14
Общая схема трансляции.
Инициация. 1. Узнавание стартового кодона (AUG),
сопровождается присоединением тРНК аминоацилированной метионином (М) и сборкой рибосомы
из большой и малой субъединиц.
Элонгация. 2. Узнавание текущего кодона соответствующей ему аминоацил-тРНК (комплементарное взаимодействие кодона мРНК и антикодона тРНК увеличено). 3. Присоединение аминокислоты, принесённой тРНК, к концу растущей полипептидной цепи. 4. Продвижение рибосомы вдоль матрицы, сопровождающееся высвобождением молекулы тРНК. 5. Аминоацилирование высвободившейся молекулы тРНК соответствующей ей аминоацил-тРНК-синтетазой. 6. Присоединение следующей молекулы аминоацил-тРНК, аналогично стадии (2). 7. Движение рибосомы по молекуле мРНК до стоп-кодона (в данном случае UAG).
Терминация. Узнавание рибосомой стоп-кодона сопровождается (8) отсоединением новосинтезированного белка и в некоторых случаях (9) диссоциацией рибосомы
Слайд 15
Эндоплазматическая сеть (ЭПС)
Это замкнутая, единая система цистерн, трубочек,
уплощенных или расширенных канальцев, окруженных биологической мембраной.
Слайд 16
Эндоплазматическая сеть (ЭПС)
Выделяют:
гранулярную или шероховатую ЭПС (грЭПС, шЭПС),
агранулярную или гладкую (аЭПС, глЭПС)
Слайд 17
Гранулярная ЭПС
Гранулярная ЭПС обеспечивает синтез всех мембранных белков,
в том числе циторецепторов (за исключением некоторых белков внутренней
мембраны митохондрий), белков пищеварительной системы клетки, и белков, предназначенных для экспорта из клетки, а также сегрегацию (отделение) этих белков от цитоплазмы.
На наружных участках грЭПС располагаются рибосомы, а синтезируемый продукт поступает в просвет сети для доработки и транспортировки в цитоплазму или ПКГ. Мембраны грЭПС содержат уникальный белок – рибофорин, который отвечает за присоединение рибосомы и является каналом, через который синтезируемая белковая цепь попадает в полость сети.
Слайд 18
Сигнальная гипотеза поступления секреторных, мембранных и лизосомных белков
в гранулярную эндоплазматическую сеть.
Слайд 19
Функции грЭПС
Обеспечивает синтез белков, липидов и углеводов, а
также начальное посттрансляционное преобразование белков (их дополнительное гидроксилирование, метилирование,
сульфатирование и правильное пространственное формирование вторичной и третичной структуры белка).
Слайд 20
Агранулярная ЭПС
Это участки эндоплазматической сети, на которых отсутствуют
рибосомы и осуществляет:
синтез липидов (в т.ч. холестерина и
стероидных гормонов);
углеводов (в т.ч. гликогена);
детоксикацию экзо- и эндогенных веществ (клетки печени);
запасание кальция (поперечно-полосатая мышечная ткань);
восстановление мембраны некоторых органелл в телофазе митоза.
Слайд 21
Пластинчатый комплекс Гольджи (ПКГ)
в световом микроскопе имеет
вид сети или отдельных диктиосом, расположенных возле ядра или
произвольно в цитоплазме
Слайд 22
Пластинчатый комплекс Гольджи (ПКГ)
Под электронным микроскопом представляет собой
мембранную органеллу, состоящую из:
а) стопки уплощенных цистерн, мешочков
(«блюдец», «тарелок»),
б) крупных вакуолей,
в) мелких пузырьков.
Слайд 23
Пластинчатый комплекс Гольджи (ПКГ)
Пространственно ПКГ представляет поляризованную структуру,
имеющую две морфологические и функционально различные поверхности:
1. цис -
сторона, формирующаяся (незрелая), обращенная к ЭПС;
2. транс - сторона зрелая, обращенная к цитолемме (плазмолемме), от которой отделяются крупные вакуоли.
Слайд 24
Пластинчатый комплекс Гольджи (ПКГ)
Цистерны имеют вид изогнутых дисков,
диаметром 0,5 – 5 мкм, объединяясь по 3 -
30 формируют стопку. Между цистернами имеется пространство шириной 15 – 30 нм. Периферические отделы цистерн расширены и от них отделяются пузырьки и вакуоли.
Пузырьки представляют собой умеренно электроноплотные структуры диаметром 40 – 80 нм.
Вакуоли являются электроноплотными образованиями и их размер достигает 0,1 – 1 мкм.
Слайд 26
Функции ПКГ
Доработка (процессинг) продуктов, поступивших из ЭПС (включение
углеводных или липидных компонентов в белковые молекулы, с образованием
гликопротеинов и липопротеинов)
Конденсация секреторного продукта и образование секреторных гранул (лизосом и др.)
Упаковка секретируемых веществ в мембраны
Экспорт секрета за пределы клетки.