Презентация на тему Основные методы исследования генетики человека

1876 г.)
Биохимический методы;
Дерматоглифический метод
Цитогенетический метод;
Популяционно-статистический метод;
Молекулярно-генетические методы (методы

анализа ДНК).

характер наследования;
зиготность лиц родословной;
пенетрантность гена;
вероятность рождения ребенка с данной

наследственной патологией

наличии определенного генотипа.
Норма реакции– границы варьирования признака, пределы

модификационной изменчивости, которые определяются генотипом.

П=ПВ\ТВ*100%

П – пенетрантность
ПВ – практическая вероятность
ТВ – теоретическая вероятность

(анамнез);
Построение родословной;
Анализ родословной:
3.1. Определение, наследуемый ли данный признак;
3.2. Определение

типа наследования;
3.3.Определение генотипов членов родословной;
3.4.Определение вероятности проявления признаков у потомков .

семьи. Анализируя родословные, изучают какой-либо нормальный или (чаще) патологический

признак в поколениях людей, находящихся в родственных связях.

с которого начинается исследование, называется пробандом (если родословная составляется

таким образом, что от пробанда спускаются к его потомству, то ее называют генеалогическим древом).
Потомок брачной пары называется сиблингом, родные братья и сестры – сибсами, кузены – двоюродными сибсами и т.д.
Потомки, у которых имеется общая мать (но разные отцы), называются единоутробными, а потомки, у которых имеется общий отец (но разные матери) – единокровными; если же в семье имеются дети от разных браков, причем, у них нет общих предков (например, ребенок от первого брака матери и ребенок от первого брака отца), то их называют сводными.

римской цифры и арабской, обозначающих соответственно номер поколения и

номер индивидуума при нумерации поколений последовательно слева направо.
При родословной должна быть легенда, т. е. пояснение к принятым обозначениям.

карие глаза..)

зачатые и рожденные одной матерью почти одновременно.
Термин «близнецы»

используется по отношению к человеку и тем млекопитающим, у которых в норме рождается один ребенок (детеныш). Различают однояйцевых и разнояйцевых близнецов.

оплодотворенной яйцеклетки и имеют совершенно одинаковый генотип.

Дизиготные (двуяйцевые) близнецы

– развиваются из нескольких оплодотворенных яйцеклеток и имеют разный генотип.

составляет около 1%, из них 1/3 приходится на монозиготных

близнецов. Однако, в пересчете на общую численность населения Земли в мире проживает свыше 30 млн. разнояйцевых и 15 млн. однояйцевых близнецов.

(МБ) между собой;
Дизиготных (разнояйцевых) близнецов (ДБ) между собой;
Монозиготных c

дизиготными близнецами;
Данных анализа близнецовой выборки с общей популяцией

Конкордантность – процент сходства группы близнецов по изучаемому признаку.
Дискордантность – процент различия группы близнецов по изучаемому признаку

того или иного признака используют формулу Хольцингера:
где Н –

доля наследственности;
КМБ% - конкордантность монозиготных близнецов; КДБ% - конкордантность дизиготных близнецов.

Е = 100% – Н

Влияние среды на развитие признака (Е) вычисляется по формуле:

– область науки, изучающая структуру и функции хромосом
Цитогенетические методы

предназначены для изучения структуры хромосомного набора или отдельных хромосом
Обьектом цитогенетичеких исследований могут быть делящиеся соматические, мейотические и интерфазные клетки

(простые, дифференциальные и флуоресцентные)
Молекулярно-цитогенетические методы – метод цветной гибридизации

in situ (FISH)

ДНК-проб
Анализ относительной пространственной локализации
и интенсивностей сигналов
SKY
MCB

с дупликацией.

Дупликация - имитация комбинации делеции с дупликацией.
Структурные хромосомные перестройки (MCB,

проблемы)

по клинической симптоматике (для подтверждения диагноза)
Наличие у ребенка множественных

ВПР, не относящихся к генному синдрому
Многократные спонтанные аборты, мертворождения или рождения детей с ВПР
Нарушение репродуктивной функции неясного генеза у женщин и мужчин
Существенная задержка умственного и физического развития у ребенка

транслокации у родителей, при рождении предыдущего ребенка с хромосомной

болезнью
Подозрение на синдромы, характеризующиеся хромосомной нестабильностью
Лейкозы (для дифференциальной диагностики, оценки эффективности лечения и прогноза лечения)
Оценка мутагенных воздействий

сыворотка крови, форменные элементы крови, культуры клеток
Программы биохимической диагностики

– массовые и селективные
Массовые просеивающие программы используются для диагностики ФКУ, АГС,
врожденного гипотиреоза, ВПР нервной трубки и болезни Дауна
Селективные - для диагностики ФКУ, гемоглобинопатий, нарушений обмена аминокислот и органических кислот

судороги, кома, рвота, гипотония, желтуха, специфический запах пота и

мочи, остановка роста
У детей – задержка умственного и физического развития, потеря приобретенных функций, специфическая для какого-либо НЗ клиническая картина
У взрослых – для диагностики НЗ и гетерозиготных состояний (недостаточность альфа1-антитрипсина, Г-6-ФД)

Мюллисом.
В России получил развитие с 1989 г.
Полимеразная цепная реакция

синтеза ДНК – это метод амплификации ДНК in vitro, с помощью которого в течение нескольких часов можно выделить и размножить определенный участок ДНК (размером от 80 до 3000 пар нуклеотидов (пн)) в миллиарды раз.

комплементарное достраивание ДНК по матрице с помощью фермента ДНК-полимеразы.
*

Праймеры строго комплементарны правой и левой границам специфического фрагмента ДНК и синтез цепи протекает только между ними.

нуклеотиды

А

Т

Г

Ц

Фермент ДНК-полимераза

амплификация отдельных экзонов в 5' и 3' "горячих" районах

гена дистрофина

1-положительный контроль;
5-болыюй с делецией 44-50 экз.;
3,4-больные с делецией 19 экз.;
2, 6-больные, у которых делеций не обнаружены

1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6

44

51
43

45
50

53
47
42
60
52

19
49
3
8



13
6

46

предложил способ ферментативного секвенирования, получивший название метода терминирующих аналогов

трифосфатов. В основе метода лежит ферментативное копирование с помощью ДНК полимеразы I из E.coli. Специфическая терминация синтеза обеспечивается добавлением в реакционную смесь помимо четырех типов dNTP (один из которых радиоактивно мечен по альфа положению фосфата) одного из 2',3'-дидезоксинуклеози-дтрифосфатов (ddATP, ddTTP, ddCTP или ddGTP), который способен включаться в растущую цепь ДНК, но не способен обеспечивать дальнейшее копирование из-за отсутствия 3'-ОН группы.

Секвенирование ДНК
по Сэнгеру

(3190G/A)
His1069Gln (3207C/A)

анализа конформа-
ционного полиморфизма
однонитевой ДНК,
предложенный М. Orita с

соавт. (1989), основан на
регистрации различий
в электрофоретической
подвижности однонитевых
фрагментов ДНК,
одинаковых по величине,
но различающихся
вследствие нуклеотидных
замен по пространственной
организации молекул.
Метод включает в себя:
амплификацию специфи-
ческих фрагментов ДНК
денатурацию
электрофорез

структуры ДНК принадлежит нашей стране
Биочип - это набор микроплощадок,

каждая из которых содержит фрагмент ДНК из своего экзона генома человека

А. Мирзабеков - соавтор статьи за которую дана Нобелевская премия (В.Гилберт, секвенирование ДНК)

о специфическом гене исследуемого образца
ДНК-чип представляет собой пластину площадью

около 1 см2,
на которой в строго определенном порядке размещены ячейки, каждая из которых содержит одноцепочечные полинуклеотиды определенной последовательности оснований. Количество таких полинуклеотидных ячеек, а, следовательно, и количество различных нуклеотидных последовательностей, может превышать 1 млн. на 1 см2, их длина варьирует от 9-10 до 1000 нуклеотидов.