Презентация на тему Серологические методы исследования в диагностике инфекционных заболеваний

или антител в сыворотке крови пациента, основанный на иммунных

реакциях организма.

Исследуемый материал:
в первую очередь используют биологический материал, собранный от пациента:

сыворотка крови
слюна
фекальные массы

В некоторых случаях исследуется материал, выделенный из определённых объектов окружающей среды: вода, почва.

с участием комплемента.
5. Реакция с использованием меченых антител или

антигенов.

Серологические исследования включают в себя различные серологические реакции:

корпускулярных антигенов с помощью антител, в результате чего образующийся

комплекс антиген-антитело выпадает в виде осадка.

Используется для диагностики: бруцеллеза, туляремии, лептоспироза, шигеллеза, иерсиниоза, псевдотуберкулёза, листериоза и др.

которой антигены возбудителя определяют с помощью стафилококков, предварительно обработанных

иммунной диагностической сывороткой.

Разновидности реакции агглютинации:

прямые реакции агглютинации, которые используют для выявления антител в сыворотке крови больного. Добавление взвеси убитых микробов к сыворотке больного вызывает образование хлопьевидного осадка.

реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации основана на использовании эритроцитов с адсорбированными на их поверхности антигенами, взаимодействие которых с соответствующими антителами сыворотки крови больных приводит к образованию фестончатого осадка.

реакция торможения гемагглютинации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы, которые в результате теряют свойство склеивать эритроциты. Используется для диагностики вирусных болезней;

преципитатом. Реакцию ставят путем наслоения раствора антигена на иммунную

сыворотку. При оптимальном соотношении антиген-антитело на границе этих растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата, диаметр кольца которого пропорционален концентрации антигена.

Реакция преципитации

Реакция преципитации — реакция, в которой происходит осаждение комплекса антиген-антитело.

Наибольшее распространение получила реакция преципитации в полужидком геле агара.

Реакцию используют для определения содержания в крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента.

нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или их токсинов на чувствительные

клетки или ткани.

Реакция нейтрализации

При отсутствии повреждающего эффекта смеси антител и микробов или их токсинов на культуру клеток говорят о специфичности взаимодействия комплекса антиген-антитело.

на активации комплемента в результате присоединения его к комплексу

антиген-антитело.
Если комплекс антиген-антитело не образуется, то комплемент присоединяется к комплексу эритроцит-антиэритроцитарное антитело, вызывая тем самым гемолиз эритроцитов (отрицательный результат реакции связывания комплемента). Положительный результат РСК – отсутствие гемолиза – если в исследуемой сыворотке содержатся антитела, гомологичные антигену. Применяется для диагностики риккетсиозов, хламидиозов, инфекционного мононуклеоза, гельминтозов, протозойных инфекций и др. инфекционных заболеваний.

сыворотками, меченными флюорохромами, способны светиться в ультрафиолетовых лучах люминисцентного

микроскопа (реакция иммунофлюоресценции).

Реакция с использованием меченых
антител или антигенов

Меченую антисыворотку наносят на фиксированный мазок, приготовленный из исследуемого материала. После тщательного промывания мазка на нем останутся только антитела, связавшиеся с антигеном, которые дают характерное свечение при люминесцентной микроскопии (прямой метод).
Непрямой метод требует лишь одной флюоресцирующей сыворотки — антиглобулиновой, содержащей антитела против кроличьих глобулинов, так как большинство диагностических сывороток приготовляется путем иммунизации кроликов. При образовании комплекса антиген — антитело флюоресцирующие антиглобулиновые антитела фиксируются на нем.

иммунная реакция антигена и антитела. Один из этих реагентов

является определяемым веществом, а другой - узнающим, обладающим известной стандартной специфичностью (избирательностью) по отношению к определяемому веществу. Для выявления образовавшихся иммунных комплексов (антиген-антитело) используетсяфермент, которым предварительно метится узнающий компонент (антиген или антитело). Сам фермент, естественно, не виден, поэтому визуализация присутствия вещества, определяемого методом ИФА, достигается применением посредника - хромогена. Это особое химическое соединение, которое хорошо растворимо в воде, и раствор которого бесцветен. Превращение бесцветного хромогена в цветное вещество хромофор происходит под действием фермента, для которого хромоген является субстратом.

В основе - иммунная реакция антигена и антитела. Один из этих реагентов является определяемым веществом, а другой - узнающим, обладающим известной стандартной специфичностью (избирательностью) по отношению к определяемому веществу. Для выявления образовавшихся иммунных комплексов (антиген-антитело) используется фермент, которым предварительно метится узнающий компонент (антиген или антитело). Сам фермент, естественно, не виден, поэтому визуализация присутствия вещества, определяемого методом ИФА, достигается применением посредника - хромогена. Это особое химическое соединение, которое хорошо растворимо в воде, и раствор которого бесцветен. Превращение бесцветного хромогена в цветное вещество хромофор происходит под действием фермента, для которого хромоген является субстратом.

Иммуноферментный анализ (ИФА)