Презентация на тему Гены сегментации

вентральной борозды

Удлинение зародышевой полоски сопровождаемое образованием амниосерозы
Сегментация

и укорочение длинной оси эмбриона («сокращение зародышевой полоски»)

Завершение спинного закрытия

Амниосероза инвагинирует и дегенерирует

различий между вентральной и дорcальной сторонами эмбриона.

мРНК Dorsal

поступает в ооцит из трофоцитов, но транслироваться начинает спустя 90 мин после оплодотворения и по всему эмбриону.

Дорcовентральная система – контроль концентрации ядерного морфогена

Почему Dorsal является морфогеном?

к белку Dorsal
Эмбрион дикого типа
Дорзализованный мутант
Вентрализованный мутант

вентральных фк Pipe завершает модификацию неизвестного фактора Х.
7 –Nüdel

и фактор Х, взаимодействуя, расщепляют белок Gd (Gastrulation defective) - протеолитический каскад.
8 – активированный Gd расщепляет белок Snake, а активированный Snake расщепляет белок Easter.
9 – активированный Easter расщепляет Spätzle, после чего Spätzle связывается с рецептором Toll.
10 – Уже в эмбрионе активированный Toll активирует белки Tube и Pelle, которые фосфорилируют белок Cactus. Cactus деградирует с высвобождением белка Dorsal.
11 – В эмбрионе белок Dorsal поступает в ядро и вызывает вентрализацию.

1 – перемещение ядра ооцита в передний дорcальный отдел, вместе с мРНК gurken.
2 – трансляция мРНК gurken и связывание Gurken с рецептором Torpedo.
3a – сигнал Torpedo дифференцирует фк в дорcальном направлении, синтез белка Pipe ингибируется – 3b.
4 – белок Gurken не диффундирует в вентральную область, поэтому Pipe синтезируется только в вентральных фк – 5.

и млекопитающих (эффект коопции). Сигнальная цепочка, действующая через Toll-рецептор,

используется для запуска воспалительного ответа у млекопитающих и для активации антифунгального действия у взрослых мух.

Интерлейкин 1

Рецептор интерлейкина 1

Миелоидный дифференцированный фактор 88

Адапторные
Молекулы



Ингибитор кВ

Ядерный фактор транскрипции кВ

вентральных клеток инвагинируют, формируя желобок, трубку, которая затем уплощается

и образует мезодермальные органы – мускулатуру, жировое тело и гонады.

Dorsal активирует Twist

Tw

Dorsal
Спецификации вентральной части эмбриона
Мезодерма формируется в присутствии Twist

и Snail. Глиальные клетки - там, где взаимодействуют Twist и Rhomboid. Клетки, которые экспрессируют лишь Rhomboid, формируют нейрогенную эктодерму. Рецептор fgf8 экспрессируется в мезодерме. Связывание с ним его лиганда запускает клеточное движение, необходимое для инвагинации мезодермы.

Белок Dorsal ингибирует те гены, которые активны в дорзальной части – tolloid, decapentaplegic и zerknült. И активирует 3 гена в вентральной части. Белок Snail ингибирует транскрипцию Rhomboid и предотвращает формирование нейроэктодермы в вентральной зоне. Twist активирует dMet2 и bagpipe, которые формируют мускулатуру, а также tinman – развитие сердечной мускулатуры.

замкнулась в определенных рамках и создала все живые существа

по единому плану, одинаковому в принципе, но который она варьировала на тысячу ладов во всех его деталях” 

«О естественных отношениях Маки (Makis lemur L.) и описание нового вида млекопитающих, сделанное гражданином Жоффруа, профессором зоологии при Музее естественной истории» 1876 г.

Зародыш лягушки эмбрион дрозофилы

Ланцетник



членистоногие

Decapentaplegic (DPP) – на 28% гомолог ВМР-4 позвоночных животных
Shot gastrulation (SOG) – на 76% гомолог хордина позвоночных животных

system defective - нейрогенная эктодерма
Intermediate neuroblast defective -

латеральная эктодерма
Muscle-specific homeobox экспрессируется в мезодерме
Decapentaplegic экспрессируется в дорсальной эктодерме

После инвагинации

сегментации

развития Drosophila

гены формируют градиенты и области экспрессии продуктов морфогенов.

Далее

формируется градиент белка Hunchback, который по-разному определяет активность gap-генов.

Gap-гены определяют конкретные области эмбриона.

Gap-гены разрешают экспрессию генов правила парности (pair-rule), каждый из которых делит эмбрион на зоны, шириною в 2 сегмента.

Гены сегментной полярности (segment polarity) определяют развитие отдельных сегментов эмбриона.

Все вместе эти гены определяют экспрессию гомеозисных генов, которые специфицируют каждый сегмент.

генах, которые нарушали план строения тела. Эти гены подразделили

на группы в соответствии с мутантным фенотипом

Мутации в gap-генах вызывают делеции группы сегментов

Мутации в генах правила парности вызывают нехватки части каждого второго сегмента

Мутации генов сегментной полярности вызывают дефекты (делеции, дупликации, изменение ориентации) части каждого сегмента

на один компартмент вперёд по отношению к сегментам. Каждый

парасегмент состоит из заднего отдела сегмента и переднего отдела следующего сегмента.
Паттерн экспрессии генов сегментации в раннем эмбрионе очерчен границами парасегментов, а не сегментов.
Поэтому именно парасегмент стал фундаментальной единицей эмбриональной экспрессии генов.

Сегменты

Компартменты

Парасегменты

Экспрессия ftz+

ось специфицируется градиентом белка Bicoid. (жёлтый переходящий в красный).

Перекрывающаяся экспрессия gap-генов. Зоны белков Hunchback и Kruppel (оранжевый и зелёный) перекрываются в зоне, окрашенной жёлтым.


Продукт гена правила парности fushi tarazu формируют семь полос.


Продукт гена сегментной полярности engrailed

Гены
сегментации

Гены-
координаторы

Kr

Hb

Ftz

En

bcd

(Материнские гены)

(Зиготические гены)

на
уровне транскрипции в общей
цитоплазме яйца (до
формирования клеток):

•bicoid активирет Kruppel;

•hunchback активирует Kruppel при низких концентрациях и репрессирует Kruppel при
высоких концентрациях

•knirps репрессирует Kruppel

Kr

Hb

Gt

gap-генов к концу 14-ого цикла ядерных делений:

Черточки между доменами

обозначают репрессию передних доменов задними доменами.
Стрелки обозначают направление сдвига, которое происходит после очередного цикла деления.
Сильная взаиморепрессия определяет базовый паттерн генной экспрессии.


В. Асимметричная репрессия:

Продукт «заднего» гена сильнее репрессирует экспрессию своих соседей спереди.

на сегментацию эмбриона мухи появляется тогда, когда начинают экспрессироваться

гены правила парности.
Транскрипционный паттерн этих генов делит эмбрион на области, которые являются предшественниками сегментированного плана строения тела.
Первичные гены правила парности каждый из которых экспрессируется в семи полосках.

Вторичные гены правила парности экспрессируются позже.

Ftz

его транскрипцию

Эмбрионы дикого типа, полученные после инъекций
трансгена, содержащего lacZ

и энхансера,
специфичного для полоски 1 (В), полоски 5 (С),
обеих полосок (D). Окраска х-gal и антителами к Eve

Карта части промотора гена eve. Показаны области, ответственные за различные полоски.

Репортерный β-галактозидазный ген (lacZ) был сшит с энхансером, специфичным для полоски 1, полоски 5, обеих полосок и промотора гена eve и инъецирован в эмбрион.

Область энхансера, специфичного для полосок 1 и 5, была инъецирована в эмбрион, мутантный по gap-гену giant. В этом случае исчезла задняя граница пятой полосы.

c белками Bicoid, Hunchback, Giant и Krüppel.
Вверху показаны

активаторы, внизу – репрессоры.
Подобные элементы могут действовать, как переключатели транскрипции, в зависимости от концентрации gap-белков в конкретной зоне эмбриона.

Gap-белки Hb и Kni взаиморепрессируют друг друга. Это взаимодействие фиксирует их локализацию.
Градиенты Hb и Kni «прочитываются» энхансерами, которые по-разному чувствительны к репрессии этих белков.
Полосы 3 и 7, как и полосы 4 и 6, транскрибирующие eve, будут симметрично расположены вдоль этих градиентов.

Полоса 2

Полосы 3+7 и 4+6

Схема формирования паттерна транскрипции гена even-skipped

Эмбрион дикого типа



В. Мутантный эмбрион на той же стадии

развития.


С. Диаграмма сегментированного эмбриона дикого типа. Тёмные области показывают парасегменты, которые отсутствуют у мутанта.

деления 14 уровень транскрипции гена ftz низок в сегментируемой

области эмбриона.


В-D. В течение следующих 30 мин., паттерн меняется, т.к. транскрипция ftz усиливается в отдельных регионах, формирующих полосы, и репрессируется в промежуточных зонах.


Е. Двойное окрашивание транскриптов генов eve (голубые полоски) и ftz (зелёные полоски), показывает, что на этой стадии ftz экспрессируется между полосами eve.

для восьми известных генов правила парности, между собой эти

паттерны не совпадают.

Т.о. каждый ряд ядер внутри парасегмента имеет свой собственный, отличный друг от друга, набор продуктов этих генов. Эти продукты активируют следующий уровень генов сегментации – генов сегментной полярности.

Гены сегментной полярности кодируют продукты, которые являются компонентами сигнальной трансдукции белков Wingless и Hedgehog.
Hedgehog активируется в клетках, экспрессирующих ген engrailed

Гены сегментной полярности

wingless (wg)
Экспрессия engrailed (en) и wingless (wg) инициируется генами

правила парности.
en экспрессируется в клетках с высокой концентрацией белков либо Even-skipped, либо Fushi tarazu.
wg экспрессируется там, где неактивны ни eve, ни ftz.
Экспрессия генов wg и en сохраняется благодаря взаимодействию клеток, экспрессирующих белки Wg и En.

В тех клетках, которые компетентны экспрессировать En, Wg связывается

с рецептором Frizzled, который способен блокировать деградацию Armadillo (бета-катенина). Armadillo активирует ген en.
Белок En активирует экспрессию гена hedgehog (hh) и свою собственную.
Белок Hh диффундирует из клеток и связывается с рецептором Patched на соседних клетках и активирует его при помощи белка Smoothened.
Сигнал Smoothened способствует транскрипции и экспрессии гена wg.

wingless/hedgehog

взаимодействуют так, что каждый из них определяет специфический регион

эмбриона.

Gap-белки активируют и репрессируют гены правила парности, определяя границы их транскрипции. Модульные промоторы генов правила парности активируют их вдоль A/P оси в семи «полосах», каждая из которых состоит из двух парасегментов.

Продукты генов правила парности активируют экспрессию engrailed и wingless в соседних клетках. Клетки, экспрессирующие engrailed, формируют переднюю границу каждого парасегмента. Эти клетки формируют сигнальный центр, который организует структуры кутикулы и сегментарное строение эмбриона.