FindSlide.org - это сайт презентаций, докладов, шаблонов в формате PowerPoint.
Email: Нажмите что бы посмотреть
На этих адсорбентах разделяют:
Малополярные органические Неорганические и сильнополярные вещества (углеводороды, их органические вещества (соли, амино- галоидопроизводные, углеводы) кислоты, карбоновые кислоты и др.)
В качестве элюентов при этом используют:
Органические растворители Водные и водно-органические
(гексан, хлороформ и др.) растворы, ацетонитрил и др.
Соответствующие варианты ЖХ называют:
нормально-фазовая обращенно-фазовая
хроматография хроматография
Силанольные группы (кислотные центры) для нормально-фазовой хроматографии
Алкильные группы (гидрофобные центры для обращенно-фазовой хроматографии)
R = С2, С4, С8, С18, С30
Г = da / dC = f (C,T)
При низких С Г = Const,
а = Г С
w ≈
При Vнф ≈ Vпф и Г >> 1:
При Г1 = Г2 компоненты выходят из колонки одновременно, не разделяясь
Выбор адсорбентов ограничен, а их свойства при повторном
приготовлении колонки плохо воспроизводимы и теоретически
не предсказуемы;
возможность необратимой сорбции и химических превращений
компонентов пробы на активных центрах;
нелинейность изотерм адсорбции, ведущая к искажению формы
пиков и неполному разделению компонентов.
Подвижные фазы:
смеси органических растворителей
Нередко сорбент заранее пропитывают растворителем 1, а используют в качестве элюента растворитель 2. Это меняет механизм разделения – молекулы Х распределяются между двумя жидкими фазами (не адсорбционная, а распределительная ТСХ).
Объем пробы должен быть минимальным (около 0,01 мл),
чтобы не изменить Rf и правильно опознать компонент.
Линия финиша
Величина Rf зависит
от природы сорбата,
сорбента и элюента,
но от концентрации сорбата и присутствия примесей не зависит.
F -
mx
функция Кубелки-Мунка
F
Принципиальная схема хроматографа для ВЭЖХ
1Б
4
проба
Детектор
1А
2
Насос
3
элюент
Сборник фракций или слив
Набивка – модифицированный силикагель или оксид алюминия, сферические частицы диаметром 5 – 10 мкм.
Химическая активность
OH-групп на поверхности
pH стабильность (2-9)
Адсорбированная вода
(NMC)
Column, Mightysil RP-18 (150x4.6 I.D.); mobile phase: methanol-0.01 M Na2HPO4, pH 6.0,
gradient elution flow-rate, 0,5 ml/min. Detection: DAD, λ=340 nm.
Peaks: 1=L-Asp, 2=D-Asp, 3=L-Glu, 4=D-Glu, 5=L-Asn, 6=D-Asn, 7=L-Ser, 8=L-Gln, 9=D-Ser, 10=D-Gln, 11=D-His, 12=L-Thr, 13=Gly+L-His, 14=D-Thr, 15=D-Arg, 16=L-Arg, 17=β-Ala, 18=L-Ala, 19=L-Tyr+GABA, 20=D-Ala, 21=D-Tyr, 22=L-Met+L-Trp, 23=L-Val, 24=L-Phe, 25=D-Met, 26=D-Trp, 27=D-Val, 28=D-Phe,
29=L-Ile, 30=L-Leu, 31=L-Lys, 32=D-Ile, 33=D-Lys, 34=D-Leu.
