Слайд 2
План:
1. Введение
2. История туберкулинодиагностики.
Что представляет собой туберкулин?
Проба Манту
Подкожная туберкулиновая проба Коха
GeneXpert при туберкулезе
Заключение
Список литературы
Слайд 3
Введение
По оценке ВОЗ, около трети
всего населения земного шара (приблизительно 1,7—2 млрд. человек.) инфицированы,
в том числе около 50 млн. - мультирезистентными штаммами микобактерий туберкулеза. В промышленно развитых странах наибольшая доля инфицированных приходится на пожилых людей, в то время как в развивающихся странах подавляющее большинство инфицированных принадлежит к наиболее трудоспособным группам населения репродуктивного возраста.
Для улучшения эпидемической обстановки фтизиатры разных стран проводят мероприятия, способствующие снижению риска инфицирования человека в обществе. Для уменьшения риска заболеваемости туберкулезом необходима своевременная диагностика контагиозных случаев и эффективное лечение выявленных больных. Особую опасность представляют неэффективно и неадекватно леченные больные: лечение обеспечивает им увеличение продолжительности жизни, но при этом эти пациенты долгое время могут оставаться бацилловыделителями. Более того, у таких больных чаще развивается резистентность микобактерий к препаратам, используемым в стандартных схемах лечения, что ведет к неудаче лечения тех, у кого развиваются туберкулез после заражения от такого хронического бактериовыделителя. Так формируются контингенты больных с первичной лекарственной устойчивостью.
Туберкулинодиагностика основана на определении туберкулиновой аллергии, возникшей в результате заражения вирулентными микобактериями туберкулеза или вакцинации БЦЖ. Реакция Манту- это реакция повышенной чувствительности замедленного типа это ответ организма на внутрикожное введение туберкулина. У инфицированных и бецежированных лиц через 6 час. в месте иньекции препарата возникает специфическое воспаление, вызванное инфильтрацией лимфоцитов, ответственными за клеточный иммунитет.
Слайд 4
История туберкулинодиагностики
История туберкулинодиагностики.
Туберкулин в его классическом виде был
изобретен в 1890 известным немецким врачом Робертом Кохом, именем
которого назван и возбудитель туберкулеза – палочка Коха.
Авторство метода туберкулинодиагностики, то есть применения туберкулина Коха с целью диагностики, принадлежит Пирке, который в 1907 году впервые предложил применять туберкулин для диагностики туберкулеза. На поврежденную специальным бориком кожу наносился туберкулин. Позднее этот метод был модифицирован и повреждение кожи (скарификацию) стали производить специальным ланцетом. Приблизительно в таком виде проба Пирке дошла и до нынешних дней.
Несколько позже французский врач Манту (Mantoux) предложил другую модификацию пробы - внутрикожное введение туберкулина. Проба в модификации Манту применяется в России с 1965 года.
Что представляет собой туберкулин?
Смысл туберкулина – «обозначить» в организме присутствие туберкулезной палочки с тем, чтобы можно было оценивать реакцию организма (качественно и количественно) на это «присутствие». В этом смысле туберкулин отлично справляется со своей задачей – именно по этой причине препарат так и не был подвергнут коренной переработке и вот уже более 100 лет, до настоящего дня является одним из основных средств диагностики туберкулеза.
.
Слайд 5
Туберкулин (точное название «альттуберкулин», АТ) Коха –
это «вытяжка», лизат из микобактерий туберкулеза, инактивированных нагреванием. Классический
препарат, помимо самого туберкулина, содержал много примесей – остатки питательной среды, на которой выращивали бактерии, соли и другие вещества, влиявшие на чистоту реакции и затруднявшие оценку результата проб. С конца 60-х годов 20-го столетия были разработаны более чистые препараты туберкулина, так называемые PPD (Purified Protein Derivate – очищенный дериват белка), которые применяются и по сей день. В России применяется препарат ППД-Л, т.е. очищенный туберкулин, полученный русским ученым Линниковой в 1965 году. Современный препарат туберкулина, помимо самого туберкулина, содержит соли фосфатного буферного раствора, натрия хлорид, стабилизатор Твин-80, и фенол в качестве консерванта. В основном препарат избавлен от балластных примесей, однако он может содержать их в следовых количествах, что может влиять на результат реакции.
Однако до конца до сих пор неизвестен в точности механизм взаимодействия туберкулина с иммунной системой. С одной стороны, лизат белков (пептиды, аминокислоты) не может являться полноценным антигеном. И действительно, туберкулин не вызывает образования иммунитета. Но эта точка зрения не объясняет усиления, как при вакцинации, реакции при частой постановки пробы – т.н. «бустерный эффект» пробы Манту. Так что же такое туберкулин? Скорее всего, туберкулин можно охарактеризовать как разнородную смесь из органических веществ разной степени сложности, полученных из микобактерий
Слайд 6
Проба Манту
Проба Манту (проба Пирке, туберкулиновая проба, туберкулинодиагностика,
tuberculin skin-test, PPD test) – метод исследования напряженности иммунитета
к возбудителю туберкулеза с помощью оценки реакции на специальный препарат микобактерий, туберкулин.
Определение реакции Манту.
Реакция Манту – это результат реакции организма на введение туберкулина. В месте инъекции препарата в кожу возникает специфическое воспаление, вызванное инфильтрацией Т-лимфоцитами – специфическими клетками крови, ответственными за клеточный иммунитет (в отличие от антительного иммунного ответа, при котором основную роль играют белки-антитела). Фрагменты микобактерий как бы притягивают к себе лимфоциты из пролегающих поблизости кровеносных сосудов кожи. Но в игру вступают не все Т-лимфоциты, а только те, что уже полностью или частично «знакомы» с палочкой Коха.
Слайд 7
Реакция (проба) Манту нужна для:
• выявления первично-инфицированных, то
есть тех, у кого впервые выявлен факт инфицирования туберкулезной
палочкой;
• выявления инфицированных более одного года с гиперергическими реакциями на туберкулин;
• инфицированных более одного года с увеличением инфильтрата на 6 мм и более;
• диагностики туберкулеза у лиц, которые инфицированы палочкой Коха, но не проявляют, в данный момент, симптомов заболевания; подтверждения диагноза туберкулеза;
• отбора контингентов детей, подлежащих ревакцинации против туберкулеза.
Слайд 8
Противопоказаниями к проведению туберкулиновой пробы являются:
1. кожные заболевания,
2. острые и хронические инфекционные и соматические заболевания в стадии
обострения (проба Манту ставится через 1 месяц после исчезновения всех клинических симптомов или сразу после снятия карантина),
3. аллергические состояния,
4. эпилепсия.
Слайд 9
Подкожная туберкулиновая проба Коха
Подкожная туберкулиновая проба Коха представляет
собой подкожное введение туберкулина. В детской практике пробу Коха
чаще начинают с 20 ТЕ. Для этого подкожно вводят 1 мл очищенного туберкулина в стандартном разведении или 0.2 мл 3-го разведения сухого очищенного туберкулина без учёта предварительного исследования порога чувствительности к туберкулину.
Рядом авторов первая доза 20 ТЕ для пробы Коха рекомендована при нормергическом характере пробы Манту с 2 ТЕ и отрицательной или слабоположительной реакции на 100% раствор туберкулина при ГКП. При отрицательной реакции на пробу Коха с 20 ТЕ дозу увеличивают до 50 ТЕ. а затем до 100 ТЕ. У детей с гиперергически-ми реакциями на пробу Манту с 2 ТЕ пробу Коха начинают с введения 10 ТЕ.
Слайд 11
Эффективность молекулярно-генетического метода GeneXpert MTB/RIF для диагностики
туберкулеза
Молекулярно-генетические методы диагностирования туберкулеза – совокупность современных методов диагностики,
благодаря которым сокращаются длительные диагностические мероприятия и проводится выявление и определение МКБ в исследуемом материале с высокой чувствительностью и специфичностью, позволяет распознать МКБ и определить их чувствительность к лекарственному препарату. ольшую популярность в современных условиях стала приобретать внедренная система GeneXpert. Сама тест-система GeneXpert представляет собой полуколичественную гнездовую ПЦР, реакция проводится в картридже, для определения ДНК микобактерий туберкулеза в образцах мокроты. Также при помощи GeneXpert диагностики выявляются мутации устойчивости к рифампицину в тех образцах, получают от пациентов, у которых возможен риск развития устойчивости к данному лечебному препарату. Современная диагностическая система GeneXpert – это система закрытого типа, все диагностические мероприятия – определение, выделение проводят в одноразовом картридже, за счет чего предварительной обработки исследуемого материала не требуется, а это позволяет по максимуму избежать контаминации этого материала. По многочисленным клиническим исследованиям устойчивость к рифампицину обычно взаимосвязана с устойчивостью и к изониазиду, а это требует проводить полный диагностический тест к препаратам 1 — 2 ряда. Диагностика проводится только после выделения микобактерий туберкулеза. Затем результат диагностики обрабатывается на ПК и проясняет клиническую картину для решения вопросов лечения данного больного.
Слайд 12
К недостаткам этого метода исследования относится тот факт,
что определить устойчивость возбудителя возможно только к одному препарату
рифампицину, а это ведет к необходимости дальнейшей диагностики, чтобы определить мультирезистентность. Недостатком есть то, что для исследования возможно только использования мокроты и в современном мире ведутся работы, чтобы обеспечить возможность применения других биологических материалов, метод диагностики является достаточно дорогостоящим удовольствием, из-за этого имеет свои ограничения. Чаще всего такой метод проводят для обследования населения такой группы: ВИЧ инфицированные, лица, который имели тесный контакт с туберкулезным больным и ранее пролеченные больные
Слайд 13
Но, в тоже время,
такой метод пользуется популярностью и преимущественно выделяется среди других
за счет того, что процесс диагностики занимает по времени всего 2 часа, специфичность метода достигает 100%, для пациентов с положительным мазком мокроты высокая чувствительность – до 98%. Проведение такого метода диагностики требует минимальный уровень навыков, т.к. проводится все в закрытом картридже нет необходимости выделять отдельную комнату для проведения диагностики. К недостаткам этого метода исследования относится тот факт, что определить устойчивость возбудителя возможно только к одному препарату рифампицину, а это ведет к необходимости дальнейшей диагностики, чтобы определить мультирезистентность.
Этот метод применяют в лабораториях 2 — 3 уровней для того, чтобы быстрого определить и выявить МБТ, для своевременной изоляции и лечении больного.
Такой современный метод диагностики туберкулеза позволяет улучшить качество, своевременность выявления и лечения туберкулеза в стране. На сегодняшний день, далеко не все лаборатории имеют систему GeneXpert, поэтому в рамках общегосударственной социальной программы по борьбе с туберкулезом, планируется полное оснащение лабораторий такой современной диагностической системой.
Слайд 14
Чувствительность, специфичность, прогностическая ценность положительного и отрицательного результатов
бактериологического, микроскопического методов и молекулярно-генетического метода GeneXpert MTB/RIF
Слайд 15
Заключение.
Молекулярно-генетический метод GeneXpert
MTB/RIF является эффективным и быстрым методом диагностики туберкулеза. Высокая
эффективность метода GeneXepert MTB/RIF доказана в обеих группах и составила не менее 97,5 %. Являясь полностью автоматизированным методом, он помогает обеспечить должный уровень биологической безопасности персонала, проводящего исследования на туберкулез. Метод позволяет быстро, за 2 часа, выявить ДНК M. tuberculosis в биологическом материале, а также установить наличие лекарственной устойчивости микобактерии к рифампицину. Результаты лекарственной устойчивости к Rif, полученные бактериологическим методом и методом GeneXpert MTB/RIF, сопоставимы. Вследствие этого возможно произвести раннюю своевременную коррекцию схемы химиотерапии.