Презентация на тему Молекулярно-генетические исследования

от родителей к детям посредством наследования дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК).

ДНК—это линейный полимер, состоящий из пуриновых и пиримидиновых оснований, последовательность которых полностью предопределяет последовательность аминокислот любого белка, синтезируемого организмом. Четыре типа оснований ДНК организованы в группы по три; каждый триплет образует кодовое слово, или кодон, которое кодирует конкретную аминокислоту.

генными мутациями.
2. Хромосомные болезни - обусловленные хромосомными и геномными

мутвциямы.
3. Мультифакториальные болезни (с наследственной предрасположенностью) обусловлены комбинацией генетических и негенетические факторов.
4. Болезни генетической несовместимости матери и плода (иммунологические реакции матери на антиген плода)
Различают: моногенные - обусловлены действием одного гена;
и полигенные болезни - действием нескольких генов.

(молекулярные) болезни - это наследственные болезни, которые возникают вследствие

генных мутаций.

Виды генных мутаций: замены, вставки, выпадения, удвоение пар нуклеотидов.
В результате нарушается строение белков

характеризующееся недостаточной выработкой лютеотропного гормона гипофиза, в результате чего

недостаточно производится тестостерона в яичках и возникает недостаточность мужских половых желез (гипогонадизм). Это сопровождается снижением подвижности сперматозоидов, уменьшением объема спермы, нарушением биохимического состава спермы, нежизнеспособностью сперматозоидов.
Рост пациентов высокий, пропорции тела евнухоидные, недоразвиты яички и половой член, оволосение на теле скудное. Бесплодие наблюдается в большинстве случаев.
Диагноз  при синдроме Паскуалини устанавливается по характерному внешнему виду больных, нарушениям половой функции, снижению в крови количества лютропина, тестостерона, при нормальном содержании фоллитропина. Генетическое исследование не выявляет отклонений от нормы.

точная диагностика
Возможна даже в тех случаях, когда неизвестен ген,

ответственный за заболевание

хромосомы, несущей поврежденный ген при семейном анализе

– анализ (количественная лигазная реакция)
Ресеквенирование

С помощью ПЦР можно непосредственно исследовать места локализации предполагаемых

мутаций или полиморфных сайтов, а также изучать наличие любых других специфических особенностей ДНК.

ПЦР

2001)

генов
Метод флуоресцентной количественной полимеразной цепной реакции

(quantitative Fluorescent PCR – QF-PCR) заключается в амплификации коротких тандемных повторов ДНК (STR), расположенных на исследуемой хромосоме или сцепленных с исследуемым геном. Использование в ПЦР специальной флуоресцентной метки позволяет идентифицировать количество аллелей STR-маркеров при разделении на капиллярном электрофорезе и точно определять дозу каждого фрагмента ДНК гена или хромосомы, для этого в реакционную смесь добавляют специфический флюоресцентный зонд и далее через 30-40 циклов определяют уровень флюоресценции. Интерпретация результатов проводится с учетом количества пиков на электрофореграмме и их относительной высоты.

генов
- онкологические исследования
- трисомии

- анализ плодного материала по кровотоку матери
- генотерапия

увеличение флюорисценции может быть связано как с накоплением специфического

продукта, так и неспецифического (праймеры-димеры, шмер).
Для этого после окончания ПЦР реакционную смесь нагревают и непрерывно измеряют флюоресценцию. По достижении температуры плавления продукта амплификации флюоресценция резко снижается. Температура плавления зависит от нуклеотидного состава, поэтому путем сравнения кривых плавления изучаемых образцов с таковыми в образцах, имеющих известную последовательность, можно выявить кандидатов на дальнейшее секвенирование.

– мутация TSC1c.1525C>T; D – нормальная нуклеотидная последовательность TSC1

копий фрагмента (дозы гена)
- Носительство

Х-сцепленных делеций для женщин
- Аутосомные делеции/дупликации
- Микроделеционные синдромы
- Анеуплоидии
- Определение числа копий гена/псевдогена
Анализ однонуклеотидных замен (SNP)

выявления разнообразных структурных вариаций (однонуклеотидных полиморфизмов, или «снипов», а также

инсерций, делеций, повторов, инверсий, транслокаций). В отличие от секвенирования неизвестных последовательностей de novo, при котором прочтения соотносятся друг с другом и собираются в контиги, для ре-секвенирования достаточно просто «картировать» прочтения на референсную последовательность, уже имеющуюся под рукой. Снипы выглядят как однонуклеотидные замены в коротких прочтениях, при этом количество прочтений с заменой говорит о состоянии аллеля — гомозиготном (все прочтения с заменой) или гетерозиготном (половина прочтений с заменой).

после рождения является напивмикрометод, при котором анализируют лимфоциты периферической

крови после предварительного культивирования. Культивирования происходит в специально предназначенном инкубаторе (37 ° С, 5% С02) в течение 50 или 69 часов (срок первого и второго митотических делений соответственно).

наследования генных заболеваний:
1) аутосомно-доминантный;
2) аутосомно-рецессивный;
3) Х-сцепленный доминантный;
4) Х-сцепленный рецессивный;
5)

Y-сцепленный тип

возникновения заболеваний, ассоциированных с теми или иными мутациями/полиморфизмами и

профилактические и лечебно-диагностические рекомендации для пациента и лечащего врача.

Заключение

Н.А. Базовый проект “Лаборатория ДНК – диагностики Школы биомедицины

ДВФУ”
Перевод с английского под редакцией проф. В.В. Фадеева “Диагностика и лечение в эндокринологии ”-2010

Литературы