Слайд 2
Введение
Вся информация о строении и
функционировании любого организма содержится в закодированном виде в его
генетическом материале, основу которого у подавляющего числа организмов составляет ДНК. Роль ДНК заключается в хранении и передаче генетической (наследственной) информации в живых организмах. Чтобы эта информация могла передаваться от одного поколения клеток (и организмов) к другому, необходимо её точное копирование и последующее распределение её копий между потомками. Процесс, с помощью которого создаются копии молекулы ДНК, называется репликацией.
Слайд 3
Репликация состоит из большого числа последовательных
этапов, которые включают:
Узнавание точки начала репликации
Расплетание родительского дуплекса
Удержание его
на значительном расстоянии друг от друга
Инициация синтеза новых дочерних цепей
Закручивание цепей в спираль
Слайд 4
Общий механизм репликации
Уотсон
и Крик предположили, что для удвоения ДНК должны произойти
разрыв водородных связей и расхождение цепей и что удвоение ДНК происходит путём последовательного соединения нуклеотидов на матрице материнской цепи в соответствии с правилом комплиментарности. В дальнейшем эта матричная природа механизма репликации была подтверждена многочисленными опытами.
Слайд 5
Зона, где происходит репликация, двигается вдоль родительской двойной
спирали. Из-за Y-образной структуры её назвали репликативной вилкой. Именно в
ней и происходят основные процессы, обеспечивающие синтез ДНК. Вилки образуются в структуре, называемой репликативный пузырёк. Это области хромосомы, где две нити родительской спирали ДНК разъединяются и служат как матрицы для синтеза ДНК. Это место, где происходит инициация репликации, называется точкой начала репликации
Слайд 6
Синтез ДНК в репликативной вилке проходит следующим образом.
Цепи синтезируются в результате присоединения 5¢-дезоксинуклеотидильных единиц дезоксирибонуклеотидтрифосфатов к
3¢-гидроксильному концу уже имеющейся цепи (праймер, затравка).За один акт репликации праймерная цепь удлиняется на один нуклеотид, при этом одновременно удаляется один остаток пирофосфата. Цепи синтезируются в направлении 5¢®3¢ вдоль матричной цепи, ориентированной в противоположном, 3¢®5¢, направлении. Синтез Цепей в обратном направлении не происходит никогда, поэтому синтезируемые цепи в каждой репликативной вилке должны расти в противоположных направлениях.
Слайд 8
Основные ферменты репликации
Репликация является
ферментативным процессом, а не спонтанным как сначала предполагали Уотсон
и Крик. В репликации участвуют следующие основные группы ферментов.
РНК-полимераза --- фермент участвующий в стадии инициации репликации ДНК, он еще называется праймаза, этот фермент катализирует синтез короткого алигорибонуклеотида который называется праймером, с которого начинается синтез белка
Слайд 9
ДНК-полимеразы. Ферменты, которые узнают нуклеотид материнской
цепи, связывают комплиментарный нуклеозидтрифосфат и присоединяют его к 3’-концу
растущей цепи 5’-концом. В результате образуется 5’-3’-диэфирная связь, высвобождается пирофосфат и растущая цепь удлиняется на один нуклеотид.
Слайд 10
ДНК-лигазы --ферменты, осуществляющие соединение цепей
ДНК, т.е. катализирующие образование фосфодиэфирных связей между 5’-фосфорильной и
3’-гидроксильной группами соседних нуклеотидов в местах разрывов ДНК. Для образования новых фосфодиэфирных связей требуется энергия в форме АТФ либо НАД.
Слайд 11
ДНК-геликазы (ДНК-хеликазы)—ферменты, осуществляющие расплетание
двойной спирали ДНК. Для разделения цепей используется энергия АТФ.
Геликазы часто функционируют в составе комплекса, осуществляющего перемещение репликативной вилки и репликацию расплетённых цепей. Для расплетания достаточно одного геликазного белка, но для того, чтобы максимизировать скорость раскручивания. Несколько геликаз могут действовать совместно.
Слайд 12
ДНК-топоизомеразы—ферменты, изменяющие степень сверхспиральности
и тип сверхспирали. Путём одноцепочечного разрыва они создают шарнир,
вокруг которого нереплецированный дуплекс ДНК, находящейся перед вилкой, может свободно вращаться. Это снимает механическое напряжение, возникающее при раскручивании двух цепей в репликативной вилке, что является необходимым условием для её непрерывного движения.
Топоизомеразы типа II вносят временные разрывы в обе комплиментарные цепи, пропускают двухцепочечный сегмент той же самой или другой молекулы ДНК через разрыв, а затем соединяют разорванные концы. В результате за один акт снимаются два положительных или отрицательных сверхвитка. Топоизомеразы типа II тоже используют тирозиновые остатки для связывания 5’-конца каждой разорванной цепи в то время . когда другой дуплекс проходит через место разрыва.
Праймаза—фермент, обладающий РНК-полимеразной активностью; служит для образования РНК-праймеров, необходимых для инициации синтеза ДНК и дальнейшем для синтеза отстающей цепи.