Слайд 2
РАЗМНОЖЕНИЕ БАКТЕРИЙ НА ЖИДКИХ И ПЛОТНЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ.
ФАЗЫ
РАЗВИТИЯ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ПОПУЛЯЦИИ
Размножение бактерий определяется временем генерации, т. е.
периодом, в течение которого осуществляется деление клетки.
Продолжительность генерации зависит от вида бактерий, возраста, популяции, состава питательной среды, температуры и других факторов.
В оптимальных условиях время генерации у разных бактерий колеблется довольно в широких пределах: от 20 мин у кишечной палочки до 14 ч у микобактерий туберкулеза, в связи с чем, их колонии образуются через 18—20 ч, либо через 3—5 нед. соответственно.
Слайд 3
Кривая роста микроорганизмов
Время культивирования
Слайд 4
Особенности микробного роста
на жидких питательных средах
1. Рост
бактерий с равномерным помутнением среды.
2. Придонный рост бактерий,
характеризующийся образованием осадка на дне пробирки с жидкой питательной средой.
3. Пристеночный рост бактерий, выражающийся в образовании рыхлых хлопьев, прикрепленных к внутренней поверхности стенок сосуда.
4. Поверхностный рост бактерий, характеризующийся появлением на поверхности жидкой питательной среды пленки.
Слайд 5
Этапы выделения чистой культуры микроорганизмов
I этап (нативный материал)
Микроскопия (ориентировочное представление о микрофлоре).
Посев на плотные питательные
среды (получение колоний).
II этап (изолированные колонии)
Изучение колоний (культуральные свойства бактерий).
Микроскопическое изучение микробов в окрашенном мазке
(морфологические свойства бактерий).
Посев на скошенный питательный агар для выделения чистой культуры.
III этап (чистая культура)
Определение культуральных, морфологических, биохимических
и других свойств для идентификации культуры бактерий
Слайд 6
Выделение чистой культуры
Культуральные свойства:
Характеристика колоний микроорганизма
Слайд 7
Морфологическое и структурное разнообразие колоний
1 — формы выпуклости
колоний над поверхностью питательной среды; 2 — очертания колоний;
3 — характер края колоний; 4 — внутренняя структура колоний.
Слайд 8
Форма колоний:
а – круглая; б – круглая с
фестончатым краем;
в – круглая с валиком по краю; г;
д – ризоидная; е – с ризоидным краем;
ж –амебовидная; з – нитевидная; и – складчатая; к – неправильная;
л – концентрическая; м – сложная
Слайд 9
Профиль колоний
а – изогнутый;
б – кратерообразный;
в
– бугристый;
г – врастающий в агар;
д –
плоский;
е –выпуклый;
ж – каплевидный;
з - конусовидный
Слайд 10
Край колоний
а - гладкий;
б – волнистый;
в
– зубчатый;
г – лопастный;
д – неправильный;
е –
реснитчатый;
ж – нитчатый;
з – ворсинчатый;
и - ветвистый
Слайд 11
Пигменты бактерий
Колонии многих бактерий могут быть ярко окрашены,
что связано с выделением окрашивающего вещества в среду либо
окраской самих бактерий. Среди пигментов преобладают жёлтые, оранжевые и красные каротиноидные пигменты.
Пигменты бактерий — вторичные метаболиты, то есть они не являются веществами, обязательно присутствующими у всех бактерий. Например, даже внутри одного вида Serratia mareescens есть пигментообразующие и беспигментные штаммы.
Способность к пигментообразованию выражена у видов Sarcina, Micrococcus, Staphylococcus, Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia и др. Этот признак генетически детерминирован, поэтому его используют в качестве дифференцирующего критерия.
Пигменты: 1.участвуют в метаболизме бактерий, 2.повышают их устойчивость к химическим веществам, 3. защищают бактерии от действия видимого света и УФ-лучей. Мутанты, лишённые способности к пигментообразованию, быстро погибают на свету. Искусственно окрашенные бактерии (например, метиленовым синим) также проявляют повышенную лабильность к инсоляции. Бактерицидное действие солнечного света проявляется в присутствии кислорода и обусловлено фотоокислением. При этом клеточные пигменты (флавины и цитохромы) действуют как катализаторы.
Каротиноиды ингибируют этот процесс. У некоторых бактерий образование пигментов происходит только на свету (например, каротиноидов у туберкулёзной палочки).
Многие пигменты проявляют антибиотические свойства. Между пигментацией и образованием вторичных метаболитов существует такая тесная корреляция, что при наличии пигментов можно с большой долей вероятности ожидать образования антибиотиков и других БАВ.
Слайд 13
Биохимические признаки (свойства) бактерий
определяются набором ферментов, присущих определенному
роду, виду, варианту микроорганизмов
Выявляют посевами на дифференциально-диагностические среды
Слайд 14
Ферменты бактерий
Энзимы – специфические белки, которые катализируют
химические реакции.
Классификация ферментов бактерий:
По типу катализируемой реакции
– оксиредуктазы, лиазы, трасферазы, гидролазы и т.д.
По локализации – эндоферменты – катализируют реакции внутри клетки. Экзоферменты – выделяются из бактериальной клетки, катализируют расщепление
Генетический контроль образования – конститутивные (в течение всего жизненного цикла, не влияет наличие субстрата), индуцибильные – они образуются в ответ на наличие субстрата
По субстрату – протеолитические – расщепляют белки, сахаролитические – расщепляют углеводы, липолитические – расщепляющие жиры.
Слайд 15
Протеазы
расщепляют белки до аминокислот, мочевины, индола, сероводорода, аммиака.
По выделению этих продуктов на средах с белком выявляют
наличие протеаз.
Среды:
С желатином, разжижение среды
На свернутой сыворотке по ее разжижению
На молоке по его просветлению
Казеин – будет разрушаться, белок свертываться.
На МПБ по выделению газа индола и сероводорода, которые выявляют с помощью индикаторных бумажек
Слайд 16
Протеолитические свойства микроорганизмов
1 - формы разжижения желатина; II
- определение сероводорода; III - определение индола: 1 -
отрицательный результат; 2 - положительный результат
Слайд 17
Бумажные индикаторные системы
представляют собой полоски или диски
хроматографической бумаги, пропитанные соответствующими субстратами и индикаторами и покрытые
для стабилизации пленкообразующим полимером — водным раствором поливинилового спирта.
Слайд 18
Сахаролитические ферменты
расщепляющие углеводы
Эти ферменты расщепляют углеводы до
альдегидов, кислот, углекислого газа и H2.
Для их определения
используют МПБ или МПА, к которым добавляют индикатор кислотообразования + углевод + поплавок для газообразования.
Пример - среды Гисса. Если свет среды меняется, выделяется газ, значит идет расщепление углеводов (моносахара).
На этом принципе создаются панели, планшеты, бумажные индикаторные системы и приборы для учета ферментативной активности.
Слайд 20
Липолитические ферменты
– липазы – выявляют на ЖСА
– желточно- солевой агар, который содержит желток, разрушение липидов
желтка сопровождается помутнением среды
Слайд 21
Комплексная система идентификации бактерий
Микробиологический анализатор Multiskan FC
Позволяет идентифицировать более 500 видов микроорганизмов и
патогенных грибов.
Система микробиологической диагностики включает оценку данных, полученных в результате проведения исследований по идентификации микроорганизмов и определении их антибиотикочувствительности in vitro, и коррекцию их на основании сведений о природной устойчивости или чувствительности отдельных микроорганизмов или их групп, о распространении среди них приобретенной резистентности, а также сведений о корреляции данных по чувствительности, полученных in vitro, клинической эффективности антибактериальных препаратов.
