Cholera
Это острая антропонозная
кишечная инфекция,
которая характеризуется
водной диареей (watery diarrhea)
нарушением водно-солевого обмена
обезвоживанием (dehydratation),
что проявляется в форме энтерита или гастроэнтерита и нарушения сердечно-сосудистой системы
Слайд 3
Холера отнесена к группе особо опасных карантийных заболеваний
Исторический
очерк
холера известна с древних времен, первые упоминания в
санскритских ведах -500 лет до н.э.
До XIX века холера встречалась только в Индии, в долинах рек Ганга и Брахмапутры, где образовались эндемические очаги.
Слайд 4
Исторический очерк
В начале XIX века холера заносится в
Европу, В Россию – через Астрахань и Оренбург.
Впервые вибрион описал Ф.Пачини (Флоренция).
Этиологическую роль вибриона доказал Р.Кох (1883г.) – он выделил чистую культуру вибриона в Египте и позже – в Индии.
В 1937-1938 г.г. Появился новый эндемик в Индонезии – на острове Сулавеси
Слайд 5
Исторический очерк (продолжение)
Возбудитель отличался
от классического варианта, ранее этот вибрион был описан на
карантинной станции Эль -Тор в Египте.
С 1961 года началась 7-я пандемия холеры, обусловленная именно этим
вибрионом, получившим название Эль -Тор. К началу XXI в
пандемия охватила около100 стран мира.
В последующие годы регистрировали случаи холеры (вариант Эль -Тор) в России (Астрахань)
и сопредельных государствах - на Украине (Одесса, Керчь), в Казахстане, Узбекистане
Исторический очерк (продолжение)
Возбудитель отличался от классического варианта, ранее этот вибрион был описан на карантинной станции Эль -Тор в Египте.
С 1961 года началась 7-я пандемия холеры, обусловленная именно этим вибрионом, получившим название Эль -Тор. К началу XXI века пандемия охватила около100 стран мира.
В последующие годы регистрировали случаи холеры (вариант Эль -Тор) в России (Астрахань)
и сопредельных государствах - на Украине (Одесса, Керчь), в Казахстане, Узбекистане
Слайд 6
Этиология
Возбудитель холеры - Vibrio cholerae
представлен двумя
биологическими вариантами:
Vibrio cholerae, биовар классический
Vibrio cholerae, биовар El-Tor.
Это
Грам - палочки,
аэробы, имеют жгутики
Слайд 7
Отличия биовара Эль-Тор
от класического биовара
Vibrio cholerae
Эль-Тор:
устойчив во внешней среде и быстро распространяется
по регионам мира
вызывает бессимптомную инфекцию
лизис эритроцитов животных в течение 48ч
Слайд 8
Общие свойства биоваров
возбудителя холеры
Морфология:
изогнутые палочки,
Грам-,
в
капле жидкости- выстраиваются как «стая рыб».
Слайд 9
Общие свойства биоваров
возбудителя холеры
Культуральные свойства –
образование
пленки
на жидких средах
Слайд 10
Общие свойства биоваров
возбудителя холеры
Культуральные свойства –рост на среде
с желатином
Биохимическое типирование: разлагают крахмал,
разжижают желатину,
Нe разлагают
арабинозу ara-
Слайд 11
Общие свойства биоваров
возбудителя холеры (фаготипирование, тест на
чувствительность к антибиотикам
Слайд 12
Общие свойства биоваров
возбудителя холеры
Серологическое типирование: серогруппа
01, которая включает
3 серотипа-Инаба,Огава, Гикошима. Исключение: вибрион 0:139
Бенгал, способный продуцировать токсин
Реакция агглютинации на стекле
Слайд 13
Бактериологическое исследование
Питательные среды:
Жидкая I% щелочная пептонная вода
Плотные среды:
щелочной агар, TCBS (желтые
колонии на зеленом фоне)
Для сокращения сроков культивирования получают “пленку” из вибрионов в жидкой питательной среде, а затем делают посев на плотные среды
Слайд 14
Колонии Vibrio cholerae (средаTCBS)
Слайд 15
Эпидемиология
Источник инфекции
-
больные типичной формой холеры,
больные субклинической формой
(выделители)
находящиеся в инкубационном периоде
реконвалесценты (продолжающие
выделять вибрионы в течение 2-4 нед.)
здоровые (транзиторные) носители,
переодически выделяющие (9-14 дней) вибрионы
Слайд 16
Основные пути передачи инфекции
Водный (Эль-Тор сохраняется у обитателей
водоемов, включая рыбы, крабы, креветки, моллюски)
Пищевой(сохраняется в холодильнике на
сыром мясе, рыбе, овощах и фруктах),
Контактный
Трансмиссивный (может также переноситься с мухами)
cholerae
сохраняются при комнатной температуре и в холодильнике
погибают при
кипячении через 1 мин или при нагревании до 56 С через 30 мин
чувствительны к действию желудочного сока, УФ
чувствительны к хлорсодержащим препаратам, сулеме
Слайд 19
Патогенный микроорганизм V.cholerae
ПАТОГЕННОСТИ
Факторы адгезии и колонизации
Протеазы
- ферменты, осуществляют гидролиз слизи для подхода вибриона к поверхности энтероцитов
Токсин-корегулирующие пили (Tcp A); их адгезивный эффект служит механизмом запуска продукции токсина (активность пилей и синтез холерогена кодирует одна и та же система регуляторных генов)
Адгезины - белки на концах пилей (способствуют адгезии и колонизации),
Слайд 21
Факторы патогенности
Фактор проницаемости -нейраминидаза,
действует в комплексе с толерогеном и способствует
проникновению токсина в клетку
Экзотоксин (толероген, белковый токсин) -действует как энтеротоксин и вызывает основные проявления холеры -обезвоживание и нарушение водно-солевого обмена,
Эндотоксин (липополисахарид, ЛПС) вызывает интоксикацию, поликлональную пролиферацию В клеток
Слайд 22
Экзотоксин холерного вибриона
Структура и взаимодействие с
клеткой
Токсин состоит из 2-х субъеднниц A и
B:
A- субъединица (2 компонента А1 и А2),
ответственна за токсические свойства,
B- субъединица (5 компонентов),
ответственна за связывание на
энтероцитах и иммуногенность.
При взаимодействии с клеткой В-субъединица связывается с GM1 - ганглиозидными рецепторами энтероцитов и встраивается в клеточную мембрану, при этом дисульфидные мостики разрываются
Слайд 24
МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ
ХОЛЕРНОГО
ТОКСИНА
Токсин не вызывает повреждения клеток,
его механизм действия связан
с
повышением концентрации цАМФ
путем воздействия на встроенную в клеточную мембрану
аденилатциклазную систему
Слайд 25
Функция аденилатциклазной системы
- регуляция потребления и выхода жидкости через мембрану
Система состоит
из G-белка и циклазы.
G-белок - способен выполнять функцию GTPазы (расщеплять GTP до GDP)
В норме возможны 2 состояния G-белка
1. G+GTP c усилением активности циклазы
и повышением синтеза цАМФ, что
приводит к выходу жидкости из энтероцитов
2. G+ GDP (результат расщепления GTP до GDP), что приводит к неактивной форме циклазы, снижению синтеза цАМФ и потреблению растворимых веществ
Слайд 26
Воздействия холерного токсина
на Gsα-субъединицу G-белка
(механизм диареи)
Токсин
обладает активностью ADP-рибозил-трансферазы и катализирует перенос ADP-рибозил группы с фермента NAD на GTP-связывающий белок (Gsα-субъединицу G-белка - мишень ); В результате -
происходит ADP-рибозилирование Gsα и отмена фазы G+GDP
комплекс G-белок+GTP приводит к постоян ной активации аденилатциклазы и повыше нию внутриклеточного синтеза цАМФ.
Жидкость выходит в просвет кишечника
Слайд 27
патогенез холеры (4 звена)
1- вибрион проникает
через рот, поступает в желудок, где может погибнуть от
кислоты желудочного сока или при сниженной кислотности следует в тонкую кишку;
2- в тонкой кишке высокое содержание пептона и благоприятная щелочная среда; здесь происходит интенсивное размножение вибрионов, которые располагаются на поверхности слизистой оболочки и в просвете тонкой кишки.
Слайд 28
ПАТОГЕНЕЗ ХОЛЕРЫ (продолжение)
3-размножение вибрионов приводит
к накоплению эндотоксина, а при адгезии через TcP(токсин-корегулирующие пили)
происходит запуск продукции экзотоксина.
Экзотоксин проникает в энтероциты, активирует аденилатциклазную систему путем воздействия на G-белок, что приводит к повышению концентрации цАМФ и усилению секреции воды и электролитов.
Слайд 29
ПАТОГЕНЕЗ ХОЛЕРЫ
(продолжение)
4- происходит быстрая утрата крупных объемов
жидкости и развитие диареи (электролитной).
Степень и скорость обезвоживания и деминерализации определяют тяжесть течения холеры.
Возможен шок как результат снижения объема циркулирующей крови (hypovolemia)
Слайд 31
Утрата воды и электролитов приводит к обезвоживанию
организма:
Падает артериальное давление
Нарушается микроциркуляция
Развивается гипоксия тканей
Метаболический ацидоз
Гипокалиемия
Острая почечная
недостаточность
Сердечная недостаточность
Возможен гиповолемический шок
Патогенез холеры
Слайд 32
Принципы лабораторной диагностики
Методы:
1. Бактериологический – основной метод
Серологический –
определение антител к холерогену, агглютинины и вибриоцины в сыворотке
– РПГА, ИФА
Молекулярно-генетический (ПЦР для определения генов, ответственных за активность факторов вирулентности)
4. Ускоренные методы диагностики (прямая иммунофлюоресценция, антитела анти-О к 1 Аг)
Слайд 33
Подходы к лечению
регидратация (препараты: трисоль, квартасоль; оралит
( рекомендован ВОЗ),
купирование интоксикации (нитрофураны, фторхинолоны),
связывание и выведение токсина
(ваулен, энтеродез),
применение цитопротекторов (смекта),
восстановление нормальной микрофлоры
Слайд 34
ПОДХОДЫ К ПРОФИЛАКТИКЕ
Полученная вакцина первого
поколения (живая аттенуированная) оказалась не вполне эффективна.
К успеху
может привести вакцина, которая способна формировать антибактериальный, антитоксический и местный иммунитет.
Слайд 35
Эшерихиозы
Это заболевания, вызываемые
патогенными штаммами Escherichia coli
Их отличия от
условно-патогенной кишечной палочки - в продукции факторов патогенности, ответственных
за клиническую картину заболевания.
Их сходство с условно-патогенной E.coli
- по основным морфологическим,
биохимическим, культуральным
cвойствам
Слайд 36
Микробиологическая идентификация E.coli
Возбудители эшерихиозов сохраняют классические характеристики E.coli:
грамотрицательные палочки,
образуют лактозоположительные (Lac+, яркокрасные с металлическим блеском)
колонии на средах Эндо и Левина,
ферментируют глюкозу (с образованием газа), лактозу, сахарозу (вариабельно), маннит
Слайд 40
Категории эшерихиозов
1- ETEC энтеротоксигенная E.coli, штаммы O6, O7, O8, O9, O148, O158.
Клиника -холероподобный синдром (диарея путешественников),
инкуб.период - 16-72ч, болеют взрослые и дети.
Факторы патогенности:
LT -термолабильный токсин,
ST-термостабильный токсин (или оба),
их синтез кодируют гены плазмид, структура LT подобна В-субъединице толерогена
категория эшерихиозов
2-EPEC энтеропатогенная E.coli Открыл
Эшерих, 1886. Штаммы O26,O55,O125,O44.
Клиника- водная диарея, эксикоз у детей до 1 года жизни, инкуб.период 6-24ч.
Факторы патогенности: связанные в узел
пили, которые через сигнальную систему
вызывают фосфорилирование
белка Hp-90 клеток эпителия, активацию фосфолипазы С.
Повреждающее действие связано с
перестройкой цитоскелетной структуры.
Энтеротоксина не выявлено.
Слайд 43
3 категория эшерихиозов
3- EIEC энтероинвазивная E.coli
штаммы O124,O135,O143,O144
клиника- дизентерия-подобный синдром,
локализация процесса- нижний отдел
подвздошной кишки, толстая кишка. Чаще
болеют дети 1,5-2 лет, подростки. Инкуб.период 6-48ч.
Факторы патогенности: плазмида, подобная
плазмиде шигелл, кодирующая токсигенные, инвазивные свойства. EIEC внедряется и размножается в клетках слизистой оболочки кишки, вызывая ее деструкцию.
Слайд 44
4 категория эшерихиозов
4-EHEC энтерогеморрагическая E.coli Штамм O157:H7 госпитальный.
Вспышки в домах престарелых.Инкуб.период 72-120ч.
Клиника- геморрагический колит, тромбоцитопеническая пурпура, диарея, гемолитический-уремический синдром.
Факторы патогенности: фактор адгезии - плазмида кодирует новый тип фимбрий;
синтез 2-х токсинов, один из которых
подобен токсину типа1 шигелл (шигеллоподобный токсин)
Слайд 45
Энтерогеморрагическая E.coli
Обнаружена у человека и крупного рогатого скота.
EHEC может вызывать гемолитический уремический синдром и
острую почечную недостаточность.
Слайд 46
5 категория эшерихиозов
EAggEC энтероагрегативная E.coli
Аутоагглютинаты
(агрегаты) в культуре ткани ассоциируются с диареей детей раннего
возраста (до 6 мес)
Наряду с этим, выявлена персистирующая диарея у ВИЧ-инфицированных взрослых лиц
Слайд 47
Энтероагрегативная E.coli
Бактерии обнаружены только у человека,
получили свое
название за способность с помощью фимбрий вызывать агрегацию клеток
в клеточной культуре
EAggEC адгезируют на поверхности слизистой тонкого кишечника и вызывают водную диаррею без лихорадки
Неинвазивны, продуцируют гемолизин и ST-энтеротоксин, сходный с энтеротоксином энтеротоксигенных эшерихий
Слайд 49
Дизентерия
Это инфекционное заболевание, вызванное бактериями рода шигелл,
которое характеризуется
интоксикацией и
поражением дистального отдела толстого кишечника (слизь,
кровь в стуле),
часто с хроническим течением
(У детей нередко поражается и подвздошная кишка)
Изучение заболевания связано с именами Шига,
Григорьева, Штуцера, Шмитца, Ларджа, Сакса, Флекснера, Бойда, Зонне
Слайд 50
Shigella – возбудитель дизентерии
Семейство Enterobacteriaceae
Род Shigella
Дизентерия
- полиэтиологическое заболевание
Виды: Shigella dysenteriae, S.flexneri, S.boydii, and S.sonnei
Слайд 52
Shigella
морфология
Мелкие
грамотрицательные
палочки с закругленными
концами, неподвижные
S.
sonnei - ферментируют
лакатозу
Слайд 53
Shigella
Трансмиссивная электронная микроскопия. Колонизация эпителиоцитов
Шигеллы внутри эпителиоцитов
Слайд 54
Факультативные анаэробы
На среде Эндо – бесцветные
лактозонегативные колонии
Селективные среды-
среда Плоскирева, сальмонелла-шигелла агар
Слайд 55
Антигены
О-антиген - термостабильный, ЛПС наружной мембраны
К-антиген – капсульный
антиген (поверхностные полисахариды) , термолабильный
Биохимически малоактивны
расщепляют отдельные углеводы только
до кислоты
чувствительны к дезинфектантам
Слайд 56
Факторы патогенности
Фимбрии и белки наружной мембраны – факторы
адгезии,
Ферменты патогенности: гиалуронидаза, муциназа,нейраминидаза,
Эндотоксин (ЛПС);
Токсин Шига и
шигаподобные токсины
взаимодействуют с рецепторами энтероцитов,
макрофагов и нервных клеток
обладают цитотоксическим, нейротоксическим и
энтеротоксическим эффектами
Шига-токсин может вызывать гемолитический
уремический синдром с развитием почечной
недостаточности
S.flexneri, S.boydii, и S.sonnei способны продуцировать LT-энтеротоксин
Слайд 57
ELISA для определения Shiga токсинов в клиническом материале
Слайд 58
Shigella после адгезии лизирует мембрану энтероцита и выходит
в цитоплазму,
вызывает реорганизацию клеточного актина, формируя себе
«хвост», выполняющий роль пропеллера, обеспечивающего перемещение из клетки в клетку.
На рис. А показана
иммунофлюоресцетная окраска: клетки шигеллы (красные) перемещаются с помощью полимеризованного актина (зеленый)
На рис.В. Показана реорганизация цитоскелета - полимеризация актина
Слайд 59
Shigella flexneri
инфицирует культуру клеток Hela
Шигеллы -красное свечение
и зеленые «хвосты» актина
Слайд 61
Лабораторная диагностика
Ускоренные методы - латексагглютинация, прямой метод
иммунофлуоресценции
Бактериологический (культуральный метод) –основной;
Серологический метод
(ИФА, РСК, РНГА, развернутая реакция агглютинации) для обнаружения антител в сыворотке больного при хронических, атипичных формах и с целью ретроспективной диагностики,
Молекулярно-генетический метод: ПЦР
Слайд 62
Проводят в кратчайшие сроки – «у постели больного»
Предварительный
этап. Посев в селенитовый бульон
1 этап: Посев клинического материала
или пробы из селенитового бульона на среды Эндо, Плоскирева и др.
2 этап: Макро- и микроскопическое изучение колоний пересев лактозонегативных колоний на среды Ресселя или Клиглера.
3 этап: Идентификация :биохимическое тестирование по системе API-20E;
серологическая (антигенная) идентификация в реакциях агглютинации на стекле (с поливалентной дизентерийной сывороткой и с группоспецифическими сыворотками);
определение чувствительности к антибиотикам
Бактриологический метод
Слайд 63
Получение проб биоматериала ( ректальный мазок)
Слайд 64
Особенности иммунитета
После перенесенного заболевания формируется типоспецифический
иммунитет
- к тому виду, с которым связана этиология дизентерии
(иммунитет нестойкий)
Необходима ранняя и дифференциальная диагностика -
S.flexneri (Lac-) от S.sonnei(Lac+ через 48ч), чтобы разместить больных по разным палатам
Слайд 65
Особенности клинического течения
Инкубационный период 1 -7 дней (чаще
2-3 дня)
Острое течение –колиты, гастроэнтероколиты, гастроэнтериты,
Хронически рецидивирующее течение
Бактериовыделители
Характерные симптомы:
тенезмы (частые позывы), схваткообразные боли,
слизь и кровь – примеси в стуле
Слайд 66
Лечение
Симтоматическое:
пероральная (в тяжелых случаях
внутривенная) регидратация
Патогенетическое:
Антибиотики (ампициллин, триметоприм, фторхинолоны, ципрофлоксацин)
Дизентерийный поливалентный бактериофаг
Профилактика: Инактивированная дизентерийная вакцина (содержит взвесь убитых шигелл) для лечения хронических форм инфекции
Препараты для коррекции микрофлоры кишечника
Слайд 68
Listeria monocytogenes –возбудитель листериоза
Листериоз – зоонозное инфекционное заболевание,
которое характеризуется поражением моноцитов и макрофагов, нервной системы
Листерии –
мелкие Грам+ палочки, микроаэрофилы,
хорошо растут на простых средах. На кровяном агаре образуют мелкие колонии с зоной гемолиза,
ферментируют глюкозу, рамнозу, каталазоположительные
Слайд 69
Listeria
бактериологический метод
Слайд 71
Эпидемиология листериоза
Основной источник заболевания для человека – грызуны(
домашние мыши и крысы) и сельскохозяйственные животные
(обычно
животные заражаются через воду и корма, ИНФИЦИРОВАННЫЕ ВЫДЕЛЕНИЯМИ ГРЫЗУНОВ ИЛИ ИХ ТРУПАМИ).
Больные животные выделяют листерии с фекалиями и молоком.
Пути передачи листериоза - фекально-оральный, трансплацентарный, но возможен контактный, аэрогенный, трансмиссивный.
Возможна передача инфекции от больной матери плоду через плаценту или во время родов.
В последние годы листериоз все чаще обнаруживают у наркоманов (выявлены наиболее опасные наркотики, например, фентанил)
Слайд 72
Продукты питания – источники листериоза
Слайд 73
Пищевые продукты –источник листерий
Слайд 75
Факторы патогенности
Это внутриклеточные паразиты
Факторы адгезии и инвазии:
фосфолипазы- мембранолитические свойства, лизис макрофагов,
интерналины - поверхностные белки, участвуют в инвазии листерий в клетки эпителия, гепатоциты, эндотелия
Главный внеклеточный белок –муреингидролаза участвует в адгезии и инвазии
Белок ActA способствует полимеризации актина с образованием «актинового хвоста» для проникновения листерий внутрь клеток.
Токсин - листериолизин О (гемолизин)
Слайд 76
Клинические проявления
Первые симптомы появляются через 2-3
нед после заражения. Больные чувствуют
тошноту и рвоту, сонливость,
боли в животе.
Повышается температура тела до 38-39 0
Нередко отмечаются признаки поражения ЦНС (энцефалит, менингит).
У беременных женщин и детей листериоз сопровождается расстройствами координации, тремором, судорогами и регидностью затылочных мышц
Влияние листериоза на развитие плода –
бактериемия, поражение печени и селезенки, папулезная сыпь
Слайд 78
Лечение и профилактика листериоза
Лечение - не всегда
успешно, важно как можно раньше установить диагноз
Наиболее эффективны препараты:
ампициллин, гентамицин и бисептол
Используют комплексную терапию: антибактериальную, иммунокорригирующую, симптоматическую
Профилактика -- регулярное проведение санитарно-гигиенических мероприятий в животноводческих хозяйствах и на предприятиях, которые перерабатывают продукты животного происхождения.
