Презентация на тему Иммунитеттің Т және В-жүйесін бағалаудың зертханалық әдістері

әдістері.

Сынамалар

1-нші деңгейдегі сынамалар.

2-нші деңгейдегі сынамалар.

анықтау
Жетілген Т-лимфоциттердің және екі негізгі субпопуляцияларының (хелпер/индуктор CD4 және

киллер/супрессор CD8) пайызы мен абсолюттік санын анықтау

пробиркаға алынады
фиколл-верографин ( лимфоциттерді бөліп алу үшін) қоспасына жаймен

құйылады
центрифугада айналдырылады
эритроциттер пробирканың түбіне шөгеді, ал лимфоциттер фиколл-верографин және плазманың шегарасында жіңішке қабат болып орналасады
лимфоциттер қабаты жаймен алынады
2-4х109/мл концентрациясына дейін жеткізіледі
1:1 қатынаста қой эритроциттері қосылады
10 минут 370C температурада инкубацияланады
қайта центрифугада айналдырылады
бірнеше сағатқа 40C мұздатқышқа салынады
Горяев камерасында люминесцентті микроскоп астында лимфоциттердің абсолюттік саны есептеледі
Т-лимфоциттердің қалыпты деңгейі – лимфоциттердің жалпы санының 50-70% құрайды.

25 үлкен тағы да 16 кіші төртбұрыштарға бөлінген. Үлкен

төртбұрыштың жаны 0,2 мм-ге тең, кіші төртбұрыштың жаны - 4 есе кем (0,05 мм). Сонымен, үлкен төртбұрыштың көлемі 0,04 мм2 (4x10-2 мм2), кіші төртбұрыштың көлемі - 0,0025 мм2 (25x10-4 мм2) құрайды.

жоғары шегарасында орналасқан лейкоциттер саналады. Бұл бір лейкоцитті екі

рет санап кетпеу үшін маңызды.

ИЛ-5, ІНФ және т.б.) бөлінуін анықтау
Адгезия молекулаларын анықтау
Тері сынамалары

арқылы аллергиялық реакцияларды анықтау

жасау әдісі: Т-хелперлер мен Т-супрессорларды анықтау әдісі
Лимфоциттердің бластты трансформациялану

реакциясы (РБТЛ)
Лейкоциттердің миграциялануын тежеу реакциясы (РТМЛ)
Цитокиндердің өндірілуін анықтау

санын анықтау әдісі. Әдіс Т-лимфоциттердің барлық субпопуляцияларында қой эритроцитіне

рецепторлардың болуымен және Т-лимфоциттердің олармен тығыз байланысу (розетка) қабілетінің болуымен негізделеді

түзе алатын жасушалар Қалыпты жағдайда шеткі қанда 23-40% белсенді Т-лимфоциттер

анықталады

сынамалары латекстiң бөлшегiн қолдану арқылы жүргiзедi. Латекс пен фагоцитоз

нейтрофилдердiң латекс бөлшегiн жұтуға негiзделген (адгезия, ұстап алу және толық жұту). Серпiлiстi жүргiзу кезiнде, шеткi қаннан алынған лейкоциттердi латекс бөлшегiнiң суспензиясымен араластырады; индуцирленген фагоцитоз серпiлiсiн жүргiзу кезiнде алынған қоспаға пирогенал ерiтiндiсiн қосады. 30 минут бойы 370 С инкубацияланғаннан кейiн жағынды дайындап, бекiтiлген және Романовский-Гимза бояуымен боялған жағындыда латекстi жұтқан нейтрофилдердiң пайызын есептейдi

пайызы мен абсолюттік санын анықтау
Сары суда G, M, A,

E иммуноглобулиндерін анықтау

анықтау
Секреторлық IgA анықтау
Ақуызды және полисахаридті антигендерге қарсы спецификалық антиденелерді

анықтау
Пролиферативті қабілетін анықтау

(ЕТ-РОК)
Манчини реакциясы: A, M, G иммуноглобулиндері деңгейін анықтау әдісі
ИФА:

Е иммуноглобулині деңгейін анықтау әдісі
ИФА: жұқпалы және жұқпалы емес антигендерге қарсы спецификалық антиденелерді анықтау
Циркуляциядағы иммундық комплекстерді анықтау (ЦИК)

жасушалардың бетінде иммуноглобулиндерге
және комплементке спецификалық
рецепторлардың болуымен негізделеді.

Шеткі қанда қалыпты жағдайда В-лимфоциттер
30-35% құрайды.

анти сары су (қоянды қой эритроциттерімен иммунизациялау арқылы алынады)

және құрамында комплемент бар тышқанның сары суы қажет.

ЕАК-розетка түзу сынамасы

құрамын анықтау (радиалді иммунодиффузия (РИД))
Спецификалық антиденелердің құрамын анықтау
Циркуляциядағы иммундық

комплекстерді анықтау