Слайд 2
Устойчивость нуклеопротеиновых комплексов обеспечивается нековалентным взаимодействием. У различных
нуклеопротеинов в обеспечение стабильности комплекса вносят вклад различные типы
взаимодействий, при этом нуклеиново-белковые взаимодействия могут быть специфичными и неспецифичными. В случае специфичного взаимодействия определённый участок белка связан со специфичной (комплементарной участку) нуклеотидной последовательностью, в этом случае вклад водородных связей, образующихся между нуклеотидными и аминокислотными остатками благодаря пространственному взаимному соответствию фрагментов, максимален. В случае неспецифичного взаимодействия основной вклад в стабильность комплекса вносит электростатическое взаимодействие отрицательно заряженных фосфатных групп полианиона нуклеиновой кислоты с положительно заряженными аминокислотными остатками белка.
Слайд 3
Примером специфичного взаимодействия могут служить нуклеопротеидные комплексы рРНК
— субъединицы рибосом; неспецифичное электростатическое взаимодействие характерно для хромосомных
комплексов ДНК — хроматина и комплексов ДНК-протамины головок сперматозоидов некоторых животных.
Нуклеопротеиновый комплекс — субчастица 50S рибосом бактерий.
Коричневым показана рРНК, синим — белки.
Слайд 4
Наличие отрицательно заряженного фосфата в каждом нуклеотиде делает
НК полианионами. Поэтому с белками они образуют солеподобные комплексы.
Схематично
это можно представить так:
Начальный этап упаковки ДНК осуществляют гистоны, более высокие
уровни обеспечиваются другими белками. В начале молекула ДНК обвивается вокруг гистонов, образуя нуклеосомы. Сформированная таким образом нуклеосомная нить напоминает бусы, которые
складываются в суперспираль (хроматиновая фибрилла) и суперсуперспираль (хромонемма интерфазы). Благодаря гистонам и другим белкам в конечном итоге размеры ДНК уменьшаются в тысячи раз: длина ДНК достигает 6-9 см (10-1), а размеры хромосом – всего несколько микрометров (10-6).
Этапы организации хроматина
Слайд 5
В каждом живом организме присутствуют 2 типа нуклеиновых
кислот: рибонуклеиновая кислота (РНК) и дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК). Молекулярная
масса самой "маленькой" из известных нуклеиновых кислот - транспортной РНК (тРНК) составляет примерно 25 кД. ДНК - наиболее крупные полимерные молекулы; их молекулярная масса варьирует от 1 000 до 1 000 000 кД. ДНК и РНК состоят из мономерных единиц - нуклеотидов, поэтому нуклеиновые кислоты называют полинуклеотидами.
Слайд 6
Каждый нуклеотид в свою очередь состоит из трех
компонентов: азотистого основания, являющегося производным пурина или пиримидина, пентозы
(рибозы или дезоксирибозы) и остатка фосфорной кислоты. В состав нуклеиновых кислот входят два производных пурина - аденин и гуанин и три производных пиримидина - цитозин, урацил (в РНК) и тимин (в ДНК).
Пурины: аденин и гуанин входят в состав ДНК и РНК, пиримидины: цитозин и тимин - в состав ДНК, цитозин и урацил - в состав РНК.
Слайд 7
Свойства азотистых оснований:
—плохо растворимы в воде (гидрофобны);
— плоскостные
(копланарные);
— поглощают ультрафиолет при 260 нм.
Слайд 9
В нуклеиновые кислоты входят два вида пентоз: β-D-рибоза
в РНК и β-D-2-дезоксирибоза в молекулу ДНК
АО +
пентоза = нуклеозид:
гидрофильны
N-гликозидная связь
Номенклатура нуклеозидов:
Все пуриновые ? -озин
Все пиримидиновые ? -идин
Слайд 10
Свойства:
—несут отрицательный заряд
— проявляют кислотные свойства
Номенклатура нуклеотидов:
нуклеозид-5´-монофосфат, нуклеозид-5´-дифосфат,
нуклеозид-5´-трифосфат.
Строение АТФ
Строение ЦТФ
Нуклеотид = фосфорилированный нуклеозид = нуклеозид +
1-4 остатка H3PO4
Слайд 11
Образование названий нуклеозидов и нуклеотидов
аденозин-5`-монофосфат
или
адениловая кислота
или
АМФ
аденин
аденозин
гуанин
цитозин
урацил
тимин
гуанозин
цитидин
уридин
тимидин
В случае
дезоксирибонуклеотидов к названию основания прибавляется «дезокси»
основание
нуклеозид
Кирюхин Д.О.
Слайд 14
Известны также циклические нуклеотиды, в которых фосфорная кислота
образует сложноэфирные связи одновременно с 5’ и 3’-атомами углерода
рибозного цикла. Это аденозин-3’,5’-циклофосфат (цАМФ) и гуанозин-3’,5’-циклофосфат (цГМФ). Эти два нуклеотида не входят в состав НК, но играют роль передатчиков, вторичных посредников (мессенджеров) сигналов в клетке, стимулируя переход белков из неактивного состояния в активное, или наоборот.
Слайд 15
Гуанозин-5’-дифосфат-3’-дифосфат —внутриклеточный регулятор метаболизма бактерий
Слайд 17
Соединение двух нуклеотидов
в динуклеотид 3’,5’- фосфодиэфирной связью
Слайд 18
Первичная структура нуклеиновых кислот - это порядок чередования
нуклеотидов, связанных друг с другом в линейной последовательности 3',5'-фосфодиэфирной
связью. В результате образуются полимеры с фосфатным остатком на 5'-конце и свободной -ОН-группой пентозы на 3'-конце.
Слайд 19
Первичная структура нуклеиновых кислот Х = Н для
ДНК, Х = ОН для РНК
Связи в молекуле нуклеиновых
кислот: 1 - 5'-фосфоэфирная (или сложноэфирная); 2 - N-гликозидная; 3 - 3',5'-фосфодиэфирная.
Чтение последовательности производится от 5`-конца к 3`-концу.
Слайд 20
Для краткого изображения последовательности нуклеотидов в нуклеиновых кислотах
пользуются однобуквенным кодом. При этом запись осуществляют слева направо
таким образом, что первый нуклеотид имеет свободный 5'-фосфатный конец, а последний -ОН группу в положении 3' рибозы или дезоксирибозы.
Так, первичная структура ДНК может быть записана следующим образом: CGTAAGTTCG...
Если в изображаемом фрагменте ДНК нет Т, то перед началом записи ставится приставка д- (дезокси).
Иногда полинуклеотидная цепь имеет противоположное направление, в этих случаях направление цепей обязательно указывается от 5'- к 3'- или от 3'- к 5'-концу.
Первичную структуру РНК можно представить таким образом: САUUAGGUAA...
Слайд 22
Вторичная структура ДНК представлена двойной спиралью, в которой
две полинуклеотидные цепи расположены антипараллельно и удерживаются относительно друг
друга за счет взаимодействия между комплементарными азотистыми основаниями. Полинуклеотидные цепи молекулы ДНК неидентичны, но комплементарны друг другу.
Слайд 23
Все основания цепей ДНК расположены внутри двойной спирали,
а пентозофосфатный остов - снаружи. Полинуклеотидные цепи удерживаются относительно
друг друга за счёт водородных связей между комплементарными пуриновыми и пиримидиновыми азотистыми основаниями А и Т (две связи) и между G и С (три связи). При таком сочетании каждая пара содержит по три кольца, поэтому общий размер этих пар оснований одинаков по всей длине молекулы. Водородные связи при других сочетаниях оснований в паре возможны, но они значительно слабее. Комплементарые основания уложены в стопку в сердцевине спирали. Между основаниями двухцепочечной молекулы в стопке возникают гидрофобные взаимодействия (стекинг-взаимодействия), стабилизирующие двойную спираль.
Слайд 24
наибольшее перекрывание
наименьшее перекрывание
Комплементарные основания обращены внутрь
молекулы, лежат в одной плоскости, которая практически перпендикулярна оси спирали. В результате образуется стопка оснований, между которыми возникают гидрофобные взаимодействия, обеспечивающие основной вклад в стабилизацию структуры спирали.
Слайд 25
Существует несколько форм правозакрученной двойной спирали ДНК. В
клетке ДНК чаще всего находится в В-форме, в которой
на один виток спирали приходится до 10 пар нуклеотидов. В А-форме на 1 виток приходится 11 пар нуклеотидов, а в С-форме – 9,3 пар нуклеотидов. Цепи ДНК образуют 2 желоба - малую и большую борозды. Считается, что в А-форме ДНК принимает участие в процессах транскрипции, а в В-форме – в процессах репликации. Кроме правозакрученной спирали существует одна левая
спираль ДНК - (Z -форма), в которой на один виток приходится 12 пар
нуклеотидов.
Слайд 26
Третичная структура ДНК формируется при ее взаимодействии с
белками. Каждая молекула ДНК упакована в отдельную хромосому, в
составе которой разнообразные белки связываются с отдельными участками ДНК и обеспечивают суперспирализацию и компактизацию молекулы. Общая длина ДНК гаплоидного набора из 23 хромосом человека составляет 3,5×109 пар нуклеотидов. Хромосомы образуют компактные структуры только в фаз уделения. В период покоя комплексы ДНК с белками равномерно распределены по объему ядра, образуя хроматин. Белки хроматина делят на две группы: гистоны и негистоновые белки.
Слайд 27
Гистоны - это небольшие белки с высоким содержанием
положительно заряженных аминокислот лизина и аргинина. Они взаимодействуют с
отрицательно заряженными фосфатными группами ДНК длиной около 146 нуклеотидных пар, образуя нуклеосомы. Между нуклеосомами находится участок ДНК, включающий около 30 нуклеотидных пар, - линкерный участок, к которому также присоединяется молекула гистона.
Негистоновые белки представлены множеством ферментов и белков, участвующих в синтезе ДНК и РНК, регуляции этих процессов, а также структурных белков, обеспечивающих компактизацию ДНК.
Слайд 28
Взаимодействие гистонов и ДНК
Участок суперспирали ДНК
Слайд 30
Вторичная структура РНК формируется в результате спирализации отдельных
участков одноцепочечной РНК. В спирализованных участках или шпильках комплементарные
пары азотистых оснований А и U, G и С соединяются водородными связями. Длина спирализованных участков невелика, содержит от 20 до 30 нуклеотидных пар. Эти участки чередуются с неспирализованными участками молекулы.
Третичная структура РНК формируется за счет образования дополнительных водородных связей между нуклеотидами, полинуклеотидной цепью и белками, стабилизируется ионами Мg2+ и обеспечивает дополнительную компактизацию и стабилизацию пространственной структуры молекулы.
Слайд 31
Минорные основания входят в состав 10% от всех
нуклеотидов.
Обнаружено до 50 разновидностей. Встречаются в т-РНК, р-РНК и
митохондриальной
ДНК.
Минорные основания выполняют 2 функции: они делают НК устойчивыми к действию нуклеаз и поддерживают определённую третичную структуру молекулы, так как не могут участвовать в образовании комплементарных пар, и препятствуют спирализации определённых участков в полинуклеотидной последовательности тРНК.
Слайд 32
Типы клеточной РНК в зависимости от функций.
Слайд 33
Транспортные РНК (тРНК) являются молекулами-адапторами, у которых к
3'-концу присоединяется аминокислота, а участок антикодона - к мРНК.
Семейство тРНК включает более 30 различных по первичной структуре молекул, состоящих примерно из 80 нуклеотидов. Особенностью тРНК является содержание 10-20% модифицированных или минорных нуклеотидов. Вторичная структура тРНК описывается как структура клеверного листа, где наряду с 70% спирализованных участков имеются одноцепочечные фрагменты, не участвующие в образовании водородных связей между нуклеотидными остатками. К ним, в частности, относят участок, ответственный за связывание с аминокислотой на 3'-конце молекулы и антикодон - специфический триплет нуклеотидов, взаимодействующий комплементарно с кодоном мРНК. На долю тРНК приходится около 15% всей РНК клетки.
Слайд 36
Рибосомные РНК (рРНК) составляют около 80% всей РНК
клетки и входят в состав рибосом. В цитоплазматические рибосомы
эукариот входит 4 типа рРНК с разной константой седиментации (КС) - скоростью оседания в ультрацентрифуге (различают рРНК - 5S, 5,8S, 28S и 18S (S - коэффициент седиментации)). рРНК образуют комплексы с белками, которые называют рибосомами. Каждая рибосома состоит из двух субъединиц - малой (40S) и большой (60S). Комплекс большой и малой субъединиц рибосомы образует компактную частицу и имеет КС 80S.
Матричные РНК (мРНК), или информационные, составляют 2-4% всей РНК клетки. Они чрезвычайно разнообразны по первичной структуре, и их количество столь же велико, как и число белков в организме, так как каждая молекула мРНК является матрицей в синтезе соответствующего белка.
Слайд 37
Отличия между РНК и ДНК:
— количество цепей: в
РНК одна цепь, в ДНК две цепи,
— размеры: ДНК
намного крупнее,
— локализация в клетке: ДНК находится в ядре, почти все РНК – вне ядра,
— вид моносахарида: в ДНК – дезоксирибоза, в РНК – рибоза,
— азотистые основания: в ДНК имеется тимин, в РНК – урацил.
— функция: ДНК отвечает за хранение наследственной информации, РНК – за ее реализацию.
Слайд 38
Таким образом, нуклеотиды, мононуклеотиды и олигонуклеотиды присутствуют в
цитоплазме клеток и ее органеллах, выполняя определенные функции.
1. Структурная
функция - участвуют в построении нуклеиновых кислот, некоторых коферментов и ферментов.
Слайд 42
2. Энергетическая.
Макроэргические молекулы (макроэрги) — биологические молекулы,
которые способны накапливать и передавать энергию в ходе реакции.
При гидролизе одной из связей высвобождается более 20 кДж/моль в отличие от простой связи, энергия которой составляет около 13 кДж/моль.
Все нуклеозидтрифосфаты и нуклеозиддифосфаты (АТФ, ГДФ и их аналоги) содержат одну или две фосфоангидридные связи, энергия каждой из них составляет 32 кДж/моль.
Слайд 44
При отщеплении от молекулы АТФ (ГТФ и т.д.)
одного или двух остатков фосфорной кислоты образуется соответственно молекула
АДФ (аденозиндифосфат) или АМФ (аденозинмонофосфат).
Слайд 45
Наличие макроэргических связей в нуклеотидах позволяет им являться
активаторами и переносчиками мономеров в клетке:
— УТФ -
уридин трифосфорная кислота используется для синтеза гликогена,
— ЦТФ - цитидинтрифосфорная кислота - для синтеза липидов,
— ГТФ гуанозинтрифосфат - для движения рибосом в ходе трансляции (биосинтез белка) и передачи гормонального сигнала (G-белок).