Слайд 2
содержат остатки спиртов и жирных кислот, связанные сложноэфирной
связью,
нерастворимы в воде и хорошо растворимы в органических растворителях
(эфир, бензин, бензол, четыреххлористый углерод и др.)
Липиды
органические соединения различной структуры
Небольшая часть липидов в воде растворима
(желчные кислоты, короткоцепочечные жирные кислоты…)
Слайд 3
Классификация
ЛИПИДЫ
Ацилглицерины
(нейтральные жиры)
Фосфолипиды
Глицериды
Жирные кислоты
Стерины и
стериды
Гликолипиды
Сфинголипиды
Слайд 4
Насыщенные (предельные) ЖК
нет связей С=С.
Непредельные
ЖК:
мононенасыщенные - моноеновые ЖК (одна связь С=С).
полиненасыщенные - полиеновые
ЖК (две и более связи С=С).
Жирные кислоты
Слайд 5
Часть ПНЖК (незаменимые ЖК, витамин F = ω3-ЖК
+ ω6-ЖК)
не синтезируется в организме человека в достаточном
количестве, и должна поступать с пищей.
Рекомендации МЗ РФ: вит. F - 6-8 г/сут, ω3-ЖК > 1 г/сут.
ЖК в организме человека
*
Wikipedia 2012
**
Слайд 6
Биологическая роль ЖК
Структурная: ЖК - компоненты триглицеридов, фосфолипидов,
эфиров холестерина…
Энергетическая - основная роль насыщенных ЖК.
Окисление стеариновой
кислоты => 147 молекул АТФ.
В крови ЖК транспортируются в связи с альбумином. Концентрация свободных ЖК в плазме крови – 0,4-0,8 ммоль/л (в покое).
Каждую минуту утилизируется 20-40% свободных ЖК сыворотки крови, столько же выходит в кровь из жировых депо.
По Первушину Ю.В. 2009
Слайд 7
При физической нагрузке ЖК становятся источником энергии для
скелетных мышц,
при длительном голодании – и для нервной
ткани (головного мозга).
В митохондриях клеток - β-окисление ЖК: в каждом цикле от молекулы ЖК отщепляется молекула ацетил-КоА (2 атома С) --->
в цикл трикарбоновых кислот.
По Первушину Ю.В. 2009
Энергетическая роль ЖК
В покое ЖК - основной источник энергии для печени и миокарда.
Слайд 8
Биологическая роль ненасыщенных ЖК
Пластическая - НЖК в составе
ФЛ и эфиров ХС участвуют в построении клеточных мембран.
Синтез биологически активных веществ из НЖК :
простагландины, тромбоксаны и лейкотриены - иммунно-воспалительные регуляторы;
резолвины, докозатриены и нейропротектины - метаболиты ЭПК и ДГК с противовоспалительными и защитными свойствами.
Wikipedia 2012
Слайд 9
Триглицериды
Триглицериды (ТГ), триацилглицерины, нейтральные жиры - сложные эфиры
глицерина и трех молекул ЖК
РОЛЬ ТРИГЛИЦЕРИДОВ:
Основной долговременный резерв энергетических
веществ в организме
Защита от теплопотери (подкожный жир)
Защита внутренних органов от механических поврежде-ний (капсула почки) и воспаления (сальник)
Синтез ТГ - в основном в жировой ткани и в печени.
Первушин Ю.В. 2009
Слайд 11
Основа клеточных мембран.
В составе ФЛ много ПНЖК,
в том числе ω3- и ω6-ЖК.
Основа липопротеиновых комплексов -
транспортных форм липидов в крови.
Биологическая роль фосфолипидов
Слайд 12
Стерины и стериды. Холестерин.
Первушин Ю.В. 2009
Слайд 13
Биологическая роль холестерина
Холестерин
Гормоны коры
надпочечников
Желчные
кислоты
Клеточные
мембраны
Витамин D
Половые гормоны
Стероидные
гормоны
Слайд 14
Переваривание липидов в ЖКТ
Расщепление липидов начинается с их
эмульгирования
в 12-перстной кишке, продолжается в тонком кишечнике.
жировая
капля
Слайд 15
желчные
пути
Переваривание и
всасывание липидов в ЖКТ
ЛИПИДЫ
пищи
ТГ
Хс + Хс эф
ФЛ
Тонкий кишечник
водорастворимые
вещества (КЖК, ФК,
глицерол, N-спирты)
12-ПК
эмульгиро-
вание
ТГ
→ ДГ → МГ → (глицерол) + ЖК
ХС эфиры → ЖК + ХС
ФЛ → ЖК + глицерол + N-спирты + ФК
Тонкий кишечник
смешанные мицеллы
МГ+ЖК+(ТГ+ДГ)+
+ХС+желчные к-ты,
их всасывание
(пиноцитоз)
Эпителий тон-кого кишечника
ресинтез ТГ, ФЛ, ХС эф, апобелков
↓
ЛП комплексы
(хиломикроны)
Полость рта,
Желудок
переваривания
нет
ПЕЧЕНЬ
↓
желчные к-ты
ПОДЖЕЛУДОЧНАЯ ЖЕЛЕЗА
колипаза
в лимфу
в кровь
желчные
кислоты
всасывание
→ в кровь
Фосфолипазы
А, А2, С, D
Триглицерид-
липаза
Холестерол-
эстераза
Слайд 16
Действие липазы
МГЛ
ТГЛ
ЖК
Гли-
церин
ЖК + Моноглицерид
Триглицерид
+
Слайд 17
Желчные кислоты
Желчные кислоты из кишечника всасываются в кровь
--> в печень --> снова выводятся с желчью в
кишечник
(гепатоэнтеральная циркуляция, 6-8 раз).
Нарушение желчеобразования или поступления желчи в кишечник --> нарушение расщепления жиров --> выделение капель жира с калом (стеаторрея).
Окружают капли жира, снижают поверх-ностное натяжение --> облегчается дроб-ление капель --> идет эмульгирование жира.
+ активируют панкреатическую липазу.
Слайд 18
Транспорт липидов в крови
Строение липопротеидной частицы
Слайд 20
Транспорт и превращения
липопротеидов плазмы
ЖК
ЛПЛ
ЛПЛ
эндотелия
ЖК
Х М
ремнанты
ХМ
ЛПОНП
ЛПНП
ТКАНИ: мышечная, жировая, молочная
железа
П Е Ч Е Н Ь
ЛППП
Надпочечники,
половые железы
нЛПВП
Излишек ХС
из
тканей
Кишечник
ЛХАТ
апо В,Е-рецепторы
ЖК
ЛПВП3
ЛПВП2
Слайд 21
обратное
всасывание
в ЖКТ
Обмен
холестерина
ПУЛ ХОЛЕСТЕРИНА (в основном
печень)
ХС пищи ~0,4 г/сут
Синтез ХС ~0,8 г/сут
Сальные железы
~0,1 г/сут
Стероидные гор-моны ~0,1 г/сут
Вывод ХС в желчь → в киш-к ~0,5 г/сут
Желчные кислоты
(синтез ~0,5 г/сут)
гепато-энтеральная рециркуляция
~ 97 %
в кал
потери ~ 3 %
Слайд 22
Исследование липидного обмена
Показатели липидов меняются с возрастом, при
беременности и лактации, при тяжелых заболеваниях… => исследование базовых
параметров целесообразно проводить не ранее чем через 2-3 мес после родов или инфаркта миокарда.
Подготовка пациента
Взятие крови – натощак (12-14 часов голодания),
исключить алкоголь (↑ ТГ), учесть прием лекарств.
Венозный стаз < 1 мин.
Слайд 23
Предпочтительна сыворотка.
Если плазма, то только с ЭДТА
(не гепариновая!)
Сгусток / осадок отделить центрифугированием не позднее,
чем через 2 ч после взятия крови. При хранении цельной крови в плазме / сыворотке возрастает уровень ХС (выход из мембран эритроцитов).
Сыворотку / плазму можно хранить:
при +4 – +24°С - в течение 7 дней,
при -20°С - в течение 3 мес.
Повторное оттаивание и замораживание не допускается.
Взятие и обработка крови при исследовании липидного обмена
Слайд 24
Определение триглицеридов
1. ХИМИЧЕСКИЙ МЕТОД
а) экстракция липидов из
сыворотки (метанол,
этанол, изопропанол, хлороформ)
б) щелочной гидролиз: ТГ
→ ЖК + глицерин (to)
в) окисление KJO4: глицерин → формальдегид
г) цветная реакция с ацетил-ацетоном.
2. ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МЕТОДЫ
а) разрушение ЛП (детергенты, протеазы)
б) гидролиз липазой: ТГ → ЖК + МГ; МГ → ЖК + глицерин
в) глицеролкиназная реакция: глицерин + АТФ →
→ глицеролфосфат + АДФ
г) окисление ГФО: глиц-3-Ф + О2 → ДОАФ + Н2О2
д) пероксидазная реакция: Н2О2 + хромоген → цвет
УСТАРЕЛ
УСТАРЕЛ
Слайд 25
Определение холестерина
1. ХИМИЧЕСКИЙ МЕТОД (Либерманна - Бурхарда)
с реактивом Илька (уксусный ангидрид, уксусная и серная кислоты)
→ зеленая окраска. ЭХС реагирует медленнее, но дает более интенсивный цвет.
2. ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МЕТОДЫ
а) гидролиз ХС-эстеразой: ЭХС → ЖК + ХС
б) окисление ХС-оксидазой: ХС + О2 → холестенон + Н2О2
в) пероксидазная реакция: Н2О2 + хромоген → окраска
(p-аминоантипирин / р-аминофеназон – PAP-метод)
УСТАРЕЛ
УСТАРЕЛ
Слайд 26
Определение ЛП разных классов
А. По холестерину в
составе основных классов ЛП
Общий ХС = ХС ЛПОНП +
ХС ЛПНП + ХС ЛПВП (натощак)
Б. Электрофорез липопротеидов на геле или АЦ-пленке с окраской суданом черным
В. По количеству апопротеинов А1 и В.
напрямую – невозможно.
Косвенные методы:
Слайд 27
Определение ХС ЛПВП
В надосадочной жидкости после осаждения апо-В-содержащих
ЛП (гепарин + Mg; гепарин + Ca; гепарин +
Mn; фосфорно-вольфрамовая к-та + Mn) и центрифугирования.
Метод сложен, недостаточно специфичен,
трудновыполним на автоанализаторах.
"Прямое" определение ХС ЛПВП – 2 этапа:
а) блокирование и прециптация ЛПНП, ЛПОНП и ХМ
специфическими антителами и полианионами
б) разрушение ЛПВП слабыми детергентами и
ферментативное определение ХС в растворе
Метод хорошо автоматизируется,
центрифугирование не требуется
Слайд 28
Определение ХС ЛПНП
Прямой метод:
- стабилизация ЛПНП в
сыворотке антителами,
- разрушение ЛПВП и ЛПОНП детергентами, окисление
выделившегося холестерина ХС-эстеразой и каталазой,
- добавление деблокирующего реагента, освобождение ХС
из состава ЛПНП, определение концентрации ХС в растворе.
Расчет по формуле Фридвальда:
ХС ЛПНП = Общий ХС – ХС ЛПВП – ТГ / 2,2
Ограничения: ТГ < 4,5 ммоль/л; нет ГЛП-III.
Слайд 29
Апопротеины = белки в составе ЛП
Апо-А1 –
компонент ЛПВП, связывает избыток ХС в тканях ---> в
ПЧ. Антиатерогенен. Более информативен, чем ХС ЛПВП.
1,0-2,2 г/л ; > 1,15 г/л
Апо-В – компонент ЛПНП, ЛПОНП, ЛППП; участвует в переносе ХС из печени в ткани. Атерогенен. Более информативен, чем ХС ЛПНП.
0,5-1,8 г/л ; < 1,0 г/л
Коэффициент Апо-B / Апо-A1 – информативный показатель,
имеет прогностическое значение.
< 0,9
ЛП (а) – аналог ЛПНП, дополнительно
содержит апо(а) – неактивный аналог
плазминогена. Тромбогенен, очень
атерогенен.
< 0,3 г/л
Слайд 30
Электрофорез липопротеидов
- ОСНОВА ФЕНОТИПИРОВАНИЯ
ГЛП по Фредериксену
(с учетом количества ХС, ТГ и
ХС ЛПНП).
Методом электрофореза выявляется только относительное распределение фракций.
Не рекомендуется количественная оценка отдельных ЛП !
Фракции ЛП в сравнении с белками сыворотки:
Слайд 32
Атеросклероз
очаговая липидная инфильтрация стенок артерий, разрастание соединительной ткани
и образование фиброзных бляшек
=> сужение просвета сосуда, расстройства кровообращения.
Проявления атеросклероза:
ИШЕМИЧЕСКАЯ БОЛЕЗНЬ СЕРДЦА:
- острая (стенокардия, острый инфаркт миокарда, внезапная
«коронарная» смерть)
- хроническая (атеросклеротический кардиосклероз)
ИШЕМИЧЕСКАЯ БОЛЕЗНЬ МОЗГА (инсульты, ишемическая энцефалопатия)
ИШЕМИЧЕСКАЯ БОЛЕЗНЬ КОНЕЧНОСТЕЙ (облитерирующий атеросклероз, гангрена, синдром Лериша)
ИШЕМИЧЕСКАЯ БОЛЕЗНЬ КИШЕЧНИКА (атония, инфаркты)
ИШЕМИЧЕСКАЯ БОЛЕЗНЬ ПОЧЕК (гипертония, первично сморщенная почка, ХПН)
Слайд 33
Факторы риска ускоренного
прогрессирования атеросклероза
НЕМОДИФИЦИРУЕМЫЕ:
возраст (♂ > 45
лет, ♀ > 55 лет), мужской пол,
отягощенная наследственность
МОДИФИЦИРУЕМЫЕ:
атерогенные дислипидемии,
артериальная гипертензия,
гипергликемия и сахарный диабет, курение, избыточный
вес, гиподинамия, нерациональное питание, хронические
стрессы, ↑ гомоцистеина, воспаление и инфекции, гипер-
инсулинемия, нарушение толерантности к глюкозе …
Слайд 34
Факторы риска развития
острого инфаркта миокарда
INTERHEART. Lancet, 2004
В.А.Метельская, 2007
Повышенное отношение AпoB / АпоA1
и курение - самые важные ФР:
их вклад в популяционный риск >2/3.
Все 9 ФР объясняют >90% популяционного риска (независимо от пола, возраста, расы, региона).
Слайд 35
Патогенез атеросклероза
Проходя через ЭНТ клетки, часть ЛПНП и
ЛПВП окисляется (МПО) и дегра-дирует (ФЛА2)
Захват макро-фагами м-ЛП, образование
пенистых клеток
↑ проницае-мости ЭНТ
Миграция гладко-мышечных клеток и макрофагов в интиму
Трансформация в фибробласты, синтез волокон и белков соед. ткани
Гибель клеток, обра-зование глыбок ХС в межклеточном пр-ве
ОБРАЗОВАНИЕ БЛЯШКИ
Выброс хемотаксинов (ИЛ-1,6, ФНО-α), С-РБ => ВОСПАЛЕНИЕ
Защитная реакция адгезивные мол-лы, "прилипание" МЦ и
Т-ЛФЦ к клеткам ЭНТ, миграция в субЭНТ пр-во -> макрофаги
ПОВРЕЖДЕНИЕ
ЭНДОТЕЛИЯ
Слайд 36
Образование АС бляшки
Повреждение ЭНТ -> Липидные пятна и
полоски -> Бляшки -> -> Атерокальциноз
Слайд 37
Атеросклеротические бляшки
МОЛОДЫЕ (желтые, нестабильные)
ЗРЕЛЫЕ (белые, стабильные)
десятилетия
Более
опасны
(возможен разрыв бляшки,
спазм сосуда и тромбоз).
Слайд 38
Прямых лабораторных методов диагностики атеросклероза нет,
но есть
корреляция между атеросклеротическими изменениями
в сосудах и сдвигами параметров
липидного обмена
Слайд 39
Липидный профиль
СТАНДАРТНАЯ ПРОГРАММА ОЦЕНКИ:
общий ХС, ТГ, ХС
ЛПВП, ХС ЛПНП ( лучше «прямые» методы)
= не выявляется
около 50% ДЛП…
Расчетные параметры:
ХС ЛПНП = общ. ХС – ХС ЛПВП – ТГ/2,2 (ф. Фридвальда)
ХС не-ЛПВП = общ. ХС – ХС ЛПВП
Индекс атерогенности = (общ. ХС – ХС ЛПВП) / ХС ЛПВП
2. РАСШИРЕННАЯ ПРОГРАММА ОЦЕНКИ:
+ Апопротеины (апо-А1, апо-В), ЛП(а), электрофорез ЛП,
генетический анализ, hsСRP, гомоцистеин, глюкоза…
Слайд 40
Гиперлипопротеидемии
(классы по Фредриксону, 1967)
атерогенные
Слайд 41
Интерпретация анализа липидов
В РФ «нормальные» значения общего ХС
= 3,2 – 6,2 ммоль/л
(по данным эпидемиологических исследований)
