Слайд 2
Методы исследований показателей липидного обмена.
Целью лабораторных исследований является:
1)
Установление факта гиперлипидемии, степени её выраженности.
2) Определение типа гиперлипидемии
(фенотипирование её). Эти данные необходимы для назначения обоснованных диетических рекомендаций и адекватной гиполипидемической терапии.
Слайд 3
Ферментативный метод анализа
Высокая специфичность метода.
Ферментативные реакции обычно
протекают в водной среде, при рН, близкой к нейтральной.
Нет необходимости в применении агрессивных реагентов, что позволяет применять эти методики на современных биохимических анализаторах.
Улучшаются условия работы лаборантов из-за отсутствия вредных для здоровья реактивов.
Слайд 4
Оксидазно – пероксидазный метод.
1-й этап Специфический
Окисление
определяемого субстрата специфической оксидазой .
Субстрат окисляется с образованием Н2О2
, содержание которой эквивалентно концентрации определяемого вещества.
Так же используются дополнительные ферменты, обеспечивающие проведение основной, специфической реакции(холестерол-эстераза,ТГлипаза и др.)
Слайд 5
Определение липопротеидов.
В настоящее время используются реагенты фирм
(Рош, Хьюман), позволяющие определять Х-ЛПВП непосредственно в пробах сыворотки
без предварительного осаждения.
Так же проводится прямое определение Х-ЛПНП,а не по содержанию холесте-
рина.
Слайд 6
Показатели липидов с позиции атерогенного риска.
Слайд 7
Определение АпоЛП.
Иммунотурбидиметрический метод или метод нефелометрии.
По измерению степени
(интенсивности) помутнения образующихся иммунных комплексов при взаимодействии исследуемой сыворотки
со специфическими антителами к апо-липопротеинам.
Реакция происходит в среде фосфатного буфера при нейтральном рН, содержащим от 2 – 4% ПЭГ ,который служит для преципитации иммунных комплексов – реакция иммунопреципитации в жидкой фазе.
Помутнение измеряют на фотометре при 340 нм или на нефелометре по степени отклонения луча от иммунохимического комплекса, проходящего через коллоидную среду, что соответствует концентрации апо-ЛП.
Слайд 8
Преаналитическая подготовка.
Кровь для исследований берут утром, натощак после
12-14 ч.голодания.
Пробы крови нужно брать в одном положении пациентов
(лучше сидя).
Не допускать стаз крови (более 1 мин. пережимать сосуды)
Работать с одним типом пробы крови (капиллярная кровь, сыворотка, плазма)
Использовать, один тип антикоагулянта (лучше ЭДТА)
Хранить пробы при 0 – 4 градусах не более 5 суток,-20не>3мес.
Меняют параметры приём алкоголя(повышение), диета, фаза менструального цикла, гепарин, гемолиз.
Определение проводится в динамике в виду индивидуальных
особенностей.
Слайд 9
Где еще определяются липиды?
1). В моче – появление
ТГ в моче (липурия) при обширных размозжениях костной и
жировой ткани.Тест используется в травматологии для диагностики возможной жировой эмболии. Также при липоидном нефрозе, липиды поступают из почечной ткани.
В желчи – для диагностики холестериновой желчно-каменной болезни. Холато/холестериновый коэффициент, т.е. отношение желчных кислот к холестерину-в норме больше 10;
снижение его свидетельствует о наклонности к холелитиазу – выпадают кристаллы холестерина, являющиеся основой желчных камней.
Слайд 10
Алгоритм диагностики нарушений липидного обмена.
I этап
Скрининг диагностика
Уровень общего холестерина, триглицеридов
( определение в состоянии сытости, натощак)
Слайд 11
Алгоритм диагностики нарушений липидного обмена
II этап
При отклонении уровня ХС и ТГ от N
в ту или др. сторону.
Липидный спектр — липидограмма I уровня
ОХ, ТГ, ХС-ЛПВП,ХС-ЛПНП,ХС-ЛПОНП,
Расчет КА ( норма < 3,5)
Слайд 12
Алгоритм диагностики нарушений липидного обмена
III этап
В зависимости от типа липидограммы
Выяснение механизмов первичной или вторичной ГЛП
1 Липидограмма II уровня
или дополнительно к ЛГ I уровня определение
АроАI , АроВ, фосфолипиды, АроА/ АроВ ( норма >1,1)
ОХ/Фл ( норма <2)
2 Выявление факторов наследственного характера
3 Уровень Lp( a).