в пробирку добавляли 2 капли гепарина или использовали гепаринизированную
пробирку вакутейнер (зеленая крышка). Кровь разливали в три пробирки: 1 мл – отрицательный контроль; 1 мл крови содержит туберкулин PPD в качестве положительного контроля 1 мл крови содержит комплексный белок из двух специфических пептидов: ESAT-6 и CFP-10
Собранные образцы плазмы использовали немедленно для проведения количественного иммуноферментного анализа с помощью реагентов, предлагаемых в наборе «Тубинферон» Или сохраняли при минус 20 С до проведения анализов
Слайд 5
Используется спектрофотометр для иммуноферментных реакций
с программным обеспечением Реакция считается положительной, что
означает наличие ТБ инфицирования, при концентрации интерферона-гамма в пробирке с антигенами ESAT-6 – CFP-10 не менее или выше 70 пг в мл Индукция интерферона-гамма в ответ на туберкулин PPD при отрицательной реакции на специфические пептиды означает поствакцинальную аллергию
Слайд 6
Конверсия пробы Манту + ранее тубинфицированные пациенты -
51 Тубинфицированные пациенты после проведенного курса превентивной химиотерапии -13 Пациенты с
предполагаемой поствакцинальной аллергией -7 Локальные формы первичной ТБ инфекции: в основном, ТБ внутригрудных лимфоузлов и первичный ТБ комплекс –30 Всем пациентам с локальными формами до момента иммунологического анализа были проведены курсы химиотерапии от 3-х до 9 мес.
туберкулезным инфицированием Диаскин-тест был положительным в 69 случаях, т.е.
чувствительность этого теста составила 73,4%. Среди Диаскин-отрицательных пациентов в 4-х случаях были диагности-рованы локальные формы: ТБ внутригрудных лимфоузлов, первичный ТБ комплекс и ТБ кератоконъюнктивит
Слайд 8
В группе пациентов, инфицированных МБТ, после проведенного курса
превентивной химиотерапии, уровень антиген-индуцированного ИФН-γ ниже, чем у пациентов,
обследованных до проведения превентивного лечения, т.е. после лечения уровень ИФН-γ снижается. У всех семи пациентов с поствакцинальной аллергией Диаскин-тест и результаты определения интерферона-гамма были отрицательными В группах пациентов с положительным Диаскин-тестом установлена корреляционнная связь между размером инфильтрата пробы Манту с 2 ТЕ и Диаскин-теста.
Слайд 9
Проведенные по случайной (рандомизированной) выборке исследования
образцов крови in vitro у более чем 100 пациентов
детского возраста показали, что иммунологические тесты, в том числе с использованием отечественной тест-системы позволяют определить первичную ТБ инфекцию с более высокой достоверностью по сравнению с кожными тестами, а так же достоверно ее дифференцировать от поствакцинальной аллергии