Презентация на тему Серологические методы исследования

приобретенный
естественный

искусственный

активный

пассивный

иммунитет новорожденных

и вызывающие развитие иммунных реакций

Свойства АГ:
Иммуногенность— способность

индуцировать иммунный ответ
Антигенность — способность АГ избирательно реагировать со специфичными AT
Специфичность — структурные особенности, отличающие один АГ от другого.

Полные антигены - это вещества, вызывающие полноценный иммунный ответ и обладающие свойствами: иммуногенностью, антигенностью и специфичностью.
Гаптены - неполные антигены, относительно простые вещества, способные участвовать в иммунологических взаимодействиях, но не способные самостоятельно индуцировать иммунный ответ

особей одного вида (общие эпитопы).
2.Групповая- внутри вида (изоантигены, которые

характерны для отдельных групп). Пример- группы крови (АВО и др.).
3.Гетероспецифичность- наличие общих антигенных детерминант у организмов различных таксономических групп. Имеются перекрестно- реагирующие антигены у бактерий и тканей макроорганизма.

химических соединений, что может изменять нормальную антигенную специфичность. Появляются

“ожоговые”, “лучевые”, “раковые” антигены с измененной видовой специфичностью
5.Стадиоспецифичность. Имеются антигены, характерные для определенных стадий развития, связанные с морфогенезом

белками, полисахаридами),
соматические (О) (Расположены не только в цитоплазме,

а в основном на поверхности микробной клетки, имеют разнообразный химический состав, отличаются термостабильностю),
жгутиковые (Н) (термолабильные белковые комплексы жгутиков)
антигены экзопродуктов. В свою очередь К - антигены разделяют на (L, В) термолабильные и (А, М) термостабильные антигены.

продукт секреторной деятельности плазматических клеток (конечной стадии дифференцировки В-лимфоцитов).

образующиеся в организме в ответ на антигенную стимуляцию
и способные специфически взаимодействовать с антигеном.
по локализации:
сывороточные
секреторные
поверхностные
КЛАССЫ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ:
Ig M.
Ig G.
Ig A.
Ig E.
Ig D.

локализации на три группы:
- сывороточные (в крови);
- секреторные (

в секретах - содержимом желудочно-кишечного тракта, слезном секрете, слюне, особенно - в грудном молоке) обеспечивают местный иммунитет (иммунитет слизистых);
- поверхностные ( на поверхности иммунокомпетентных клеток, особенно В- лимфоцитов).

с определенным (своим) антигеном (соответствие эпитопа антигена и активного

центра антител).
2. Валентность- количество способных реагировать с антигеном активных центров ( это связано с молекулярной организацией- моно- или полимер). Иммуноглобулины могут быть двухвалентными ( IgG ) или поливалентными (пентамер IgM имеет 10 активных центров). Двух- и более валентные антитела навывают полными антителами.

и активным центром антител, зависит от их пространственного соответствия.
4.

Авидность - интегральная характеристика силы связи между антигеном и антителами, с учетом взаимодействия всех активных центров антител с эпитопами. Поскольку антигены часто поливалентны, связь между отдельными молекулами антигена осуществляется с помощью нескольких антител.

у них трех видов антигенных детерминант:
- изотипические - принадлежность

антител к определенному классу иммуноглобулинов;
- аллотипические- обусловлены аллельными различиями иммуноглобулинов, кодируемых соответствующими аллелями Ig гена;
- идиотипические- отражают индивидуальные особенности иммуноглобулина, определяемые характеристиками активных центров молекул антител.

70-75 % всей фракции иммуноглобулинов), наиболее активен во вторичном

иммунном ответе и антитоксическом иммунитете. Благодаря малым размерам,является единственной фракцией иммуноглобулинов, способной к транспорту через плацентарный барьер и тем самым обеспечивающей иммунитет плода и новорожденного.

две μ-цепи. . Появляются при первичном иммунном ответе B-лимфоцитами

на неизвестный антиген, составляют до 10 % фракции иммуноглобулинов. Являются наиболее крупными иммуноглобулинами.

иммуноглобулинов, при этом 80 % молекул IgA представлено в

мономерной форме у человека. Основной функцией IgA является защита слизистых оболочек дыхательных, мочеполовых путей и желудочно-кишечного тракта от инфекций.

содержится в основном на мембране некоторых В-лимфоцитов. Функции до

конца не выяснены, предположительно является антигенным рецептором с высоким содержанием связанных с белком углеводов для В-лимфоцитов, ещё не представлявшихся антигену.

Способен осуществлять защитную функцию в организме от действия паразитарных

инфекций, обуславливает многие аллергические реакции. Механизм действия IgE проявляется через связывание с высоким сродством (10−10М) с поверхностными структурами базофилов и тучных клеток, с последующим присоединением к ним антигена, вызывая дегрануляцию и выброс в кровь высоко активных аминов (гистамина и серотонина — медиаторов воспаления), на чем основано применение аллергических диагностических проб.

инфекционных заболеваний у человека.
Различают реакции, в которых по

известным антителам определяют неизвестные антигены, и реакции, направленные на поиск неизвестных антител по известным антигенам.
Перспективны методы, основанные на обнаружении в ранний период болезни микробных антигенов в различных субстратах.

быстрота получения результатов.
определение классов Ig чётко характеризует этапы
инфекционного процесса

Методы выявления микробных АГ - важный инструмент экспресс- диагностики инфекционных заболеваний, а количественное их определение в динамике инфекционного процесса служит критерием эффективности проводимой антимикробной терапии.

НЕДОСТАТКИ МЕТОДА: при острых инфекционных заболеваниях обнаружение АТ часто бывает ретроспективным диагнозом, т.к. они появляются в достаточных титрах к 7-8 дню от начала болезни

выявить Аг, локализованные на поверхности сравнительно крупных частиц (микроорганизмы,

клетки различного происхождения). Механизм РА описывает «теория решётки», согласно которой двухвалентное AT взаимодействует одним активным центром с детерминантой одной молекулы Аг.

в виде частиц (микробные клетки, эритроциты и другие корпускулярные

антигены), которые склеиваются антителами и выпадают в осадок.

РАЗВЕРНУТАЯ РА

ориентировочная РА на предметном стекле, наступающая в течение нескольких

минут. Применяется только с целью идентификации вида (серотипа) выделенной из организма больного чистой культуры по его специфичности как АГ к серотипу АТ;
2) развернутая РА в пробирках, которая учитывается через 2 часа выдерживания при 37 оС и на следующий день стояния при комнатной температуре. Применяется с целью идентификации микроба и обнаружения АТ в сыворотке крови.

развёрнутую реакцию агглютинации ( РА ).
к серии разведений сыворотки

(титру) крови добавляют диагностикум
диагностикум — взвесь убитых микроорганизмов или частицы с сорбированными Аг.
Максимальное разведение, дающее агглютинацию Аг, называют титром сыворотки крови.

(РНГА, РПГА) — одна из наиболее чувствительных серологических реакций.

Основана на способности AT взаимодействовать с Аг, фиксированными на различных эритроцитах, которые при этом агглютинируют. Для большей стабильности диагностикумов эритроциты формалинизируют.
широко применяют для диагностики инфекционных болезней, установления беременности, выявления повышенной чувствительности к лекарствам

эритроциты (1), нагруженные антигеном

(3), связываются специфическими антителами (4).

три компонента; Аг, AT и Аг (AT), адсорбированные на

эритроцитах.
Первоначально Аг реагирует с AT (стандартная антисыворотка), затем в смесь вносят эритроциты, сенсибилизированные аналогичным Аг (или AT). Если при взаимодействии Аг с AT в системе не остаются свободные AT (или Аг), то агглютинации эритроцитарного диагностикума не наблюдают.

антител к тем или иным вирусам, а также для

серологической идентификации и типирования изолятов вирусов из клинического материала от больных.

их, лишая возможности агглютинировать эритроциты. Визуально этот эффект и

проявляется в «торможении» гемагглютинации.

антигенов с помощью антител, адсорбированных на белке А клеток

стафилококка

Применение реакции коагглютинации перспективно для быстрого обнаружения бактериальных антигенов в крови, спинномозговой жидкости, мокроте и другом материале.

Антительный диагностикум

Реакция коагглютинации

РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ (РП)
основана на

фенoмене образования видимого осадка (преципитата) после взаимодействия растворимых либо находящихся в коллоидном дисперсном состоянии АГ с АТ

Схемы реакций кольцепреципитации и диффузии в геле.

АГ и АТ происходит связывание
комплемента и во 2-й

фазе гемолиз сенсибилизированных АТ
эритроцитов не произойдет (реакция положительная).

если же комплекс АГ - АТ
не образуется, то комплемент
остается свободными
во 2-й фазе присоединится к
комплексу эритроцит –
антиэритроцитарное АТ,
вызывая гемолиз
(реакция отрицательная).

специфическом связывании АТ с АГ, при этом один из

компонентов конъюгирован с ферментом, в результате реакции с соответствующим хромогенным субстратом образовывается окрашенный продукт, количество которого можно определить спектрофотометрически.

является экспрессным и высокочувствительным. При прямом методе к исследуемой

взвеси микробов, фиксированной на стекле, добавляют сыворотку, меченную флуорохромом. Образующийся комплекс антиген-антитело при освещении ультрафиолетовыми (сине-фиолетовыми) лучами дает ярко-зеленое свечение. Светящийся комплекс выявляют при люминесцентной микроскопии

Основу метода составляет многократное образование копий определённого участка ДНК.

ПЦР позволяет получить большие количества изучаемого фрагмента ДНК даже в том случае, если в распоряжении исследователя имеется всего лишь одна исходная молекула ДНК. Идентификацию копий ДНК проводят различными методами, например электрофорезом или ИФА