Презентация на тему Высокоэффективная жидкостная хроматография в анализе готовых лекарственных форм и контроле технологии их производства

определения ранитидина в таблеках Ранитидин-ЛекТ и эргокальциферола (витамина Д2)

в препарате Эргокальциферол-ЛекТ методом ВЭЖХ.
Задачи:
предварительное тестирование методик количественного определения ранитидина и эргокальциферола методом ВЭЖХ;
подбор условий анализа;
проведение работ по подтверждению пригодности выбранных методик;
статистическая обработка полученных данных и занесение результатов исследования в протокол предприятия.

разделения сложных смесей веществ.
В обращенно-фазовом варианте хроматографии используют неполярные химически модифицированные сорбенты

(например, неполярный алкильный радикал C18) и полярные подвижные фазы (например, метанол, ацетонитрил).

ВЭЖХ в препарате Ранитидин-ЛекТ
4

желудка и /или двенадцатиперстной кишки, в том числе связанной

с приемом нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП).

Ранитидина гидрохлорид

гидрохлорида
Около 55 мг (точная

навеска) стандартного образца (BP CRS, USP RS) ранитидина гидрохлорида, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 40 мл метанола, доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают.
Затем 1,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора подвижной фазой до метки и перемешивают.
Испытуемый раствор
Около 100 мг (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 40 мл подвижной фазы, помещают в ультразвуковую ванну на 15 мин, доводят объем суспензии подвижной фазой до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор не более 0,45 мкм, отбрасывая первые порции фильтра.
Затем 1,0 мл фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора подвижной фазой до метки и перемешивают.

158 мг, считая на среднюю массу таблетки.
Содержание (Х)

вычисляют по формуле:



S – площадь пика ранитидина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика ранитидина на хроматограмме раствора стандартного образца ранитидина гидрохлорида;
а0 – навеска стандартного образца ранитидина гидрохлорида (мг);
а – навеска порошка растертых таблеток (мг);
G – средняя масса одной таблетки (мг);
Р – содержание ранитидина гидрохлорида в стандартном образце (%);
0,896 – коэффициент пересчета ранитидина гидрохлорида на ранитидин

растворитель, не содержащий определяемых компонентов;
С1 - раствор плацебо;
С2 -

раствор ранитидина гидрохлорида концентрацией 0,08 мг/мл

С3 - испытуемый раствор таблеток Ранитидин – ЛекТ 150 мг.

масса таблетки 316 мг
Стандартное отклонение для 6 определений (n=6)

SD =0,87
Относительное стандартное отклонение RSD = 0,55 %
Доверительный интервал ∆x = 1,0 (критерий Стьюдента t = 2,57 для f = 5 и P = 95%)
Содержание ранитидина в таблетке x = 156,9 ± 1,0 мг

критериям прецизионности (воспроизводимость)
Средняя масса таблетки 316 мг
Стандартное отклонение для

6 определений (n=6) SD =0,84
Относительное стандартное отклонение RSD = 0,53 %
Доверительный интервал ∆x = 0,96 (критерий Стьюдента t = 2,57 для f = 5 и P = 95%)
Содержание ранитидина в таблетке x = 156,64 ± 0,96 мг

превышает 2,0%; результаты, полученные в двух сериях, статистически достоверно

идентичны.

Относительное стандартное отклонение в серии не превышает 2,0%;
t-критерий не превышает критерия Стьюдента, результаты двух серий статистически достоверно идентичны; результат соответствует требованиям прецизионности

аналитический сигнал (площадь пика) линейно зависит от содержания ранитидина

в диапазоне концентраций от 80% до 120% от номинального содержания ранитидина; степень корреляции не ниже 0,99.

Уравнение площади пика как функции от содержания ранитидина в таблетке имеет вид:
S = 12,513·С – 154
Степень корреляции
R2 = 0,998

Методика количественного определения таблеток Ранитидин – ЛекТ 150 мг удовлетворяет требованиям линейности; площадь пика линейно зависит от содержания ранитидина в таблетке в заданном диапазоне с высокой степенью корреляции.

среднее значение правильности определения содержания ранитидина составляет от 98,0

до 102,0% от теоретического содержания.

По результатам 9 определений правильность составляет 100,2 ± 0,4 %

условия линейности, правильности, прецизионности.
Диапазон применения методики количественного определения таблеток

Ранитидин – ЛекТ 150 мг составляет 120 – 180 мг ранитидина в таблетке

[в масле] 0,0625 % методом ВЭЖХ

при воздействии ультрафиолета на эргостерол.
Неустойчив к влиянию света,

высоких темпаратур, кислорода воздуха. Регулирует обмен кальция и фосфора в организме.

эффективность колонки, рассчитанная по пику эргокальциферола, должна быть не

менее 1500 теоретических тарелок;

относительное стандартное отклонение площади пика не должно превышать 1,5 %;

относительное стандартное отклонение времени удерживания не должно превышать 2 %.

г (точная навеска) стандартного образца эргокальциферола (ЕР, USP, рабочий

стандарт фирмы) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, приливают примерно 10 мл спирта изопропилового, растворяют, затем доводят объем раствора спиртом изопропиловым до метки, перемешивают.

Испытуеый раствор:
2,5 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, приливают спирт изопропиловый примерно 10 мл, растворяют, затем доводят объем раствора спиртом изопропиловым до метки, перемешивают.

пика эргокальциферола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика

эргокальциферола на хроматограмме раствора стандартного образца эргокальциферола;
а - навески стандартного образца эргокальциферола, (мг);
Р - содержание эргокальциферола в стандартном образце, %.

Содержание эргокальциферола 1 мл должно составлять от 0,58 до 0,67 мг.

зернение 3 мкм)
Времена удерживания основного компонента не совпадают между

вводом проб, также по параметру эффективность колонка не удовлетворяет условиям анализа.

стандартного раствора эргокальциферола
Относительное стандартное отклонение по площади пиков RSD=0,03%

(не более 1,5%).
Относительное стандартное отклонение по времени удерживания RSD=1,08% (не более 2%)

Выбранная колонка удовлетворяет критериям пригодности хроматографической системы.

раство-ритель
С1 – стандартный раствор эргокальци-
ферола
С2 - раствор плацебо
С3

- испытуемый раствор готового лекарственного средства Эргокальциферол-ЛекТ .

отклонение для 6 определений (n=6) SD =0,01
Относительное стандартное

отклонение RSD = 0,96 %
Доверительный интервал ∆x = 0,01 (критерий Стьюдента t = 2,57 для f = 5 и P = 95%)
Содержание эргокальциферола x = 0,62 ± 0,01 мг

критериям прецизионности (воспроизводимость)
Стандартное отклонение для 6 определений (n=6) SD

=0,003
Относительное стандартное отклонение RSD = 0,51 %
Доверительный интервал ∆x = 0,003 (критерий Стьюдента t = 2,57 для f = 5 и P = 95%)
Содержание эргокальциферола x = 0,62 ± 0,003 мг

превышает 2,0%; результаты, полученные в двух сериях, статистически достоверно

идентичны.

Относительное стандартное отклонение в серии не превышает 2,0%;
t-критерий не превышает критерия Стьюдента, результаты двух серий статистически достоверно идентичны; результат соответствует требованиям прецизионности

аналитический сигнал (площадь пика) линейно зависит от содержания витамина

Д2 в диапазоне концентраций от 80% до 120% от номинального содержания; степень корреляции не ниже 0,99.

Уравнение площади пика как функции от содержания эргокальциферола в таблетке имеет вид:
S = y = 1341⋅С+ 53,866
Степень корреляции
R2 = 0,999

Методика количественного определения Эргокальциферол-ЛекТ удовлетворяет требованиям линейности; площадь пика линейно зависит от содержания эргокальциферола в препарате в заданном диапазоне с высокой степенью корреляции

среднее значение правильности определения содержания витамина Д2 составляет от

98,0 до 102,0% от теоретического содержания.

По результатам 9 определений правильность составляет 99,38 ± 1,03 %

условия линейности, правильности, прецизионности.
диапазон применения методики количественного определения Эргокальциферол-ЛекТ

составляет 0,50-0,75 мг эргокальциферола в 1 мл препарата

определения ранитидина и эргокальциферола методом ВЭЖХ;
Подобраны оптимальные условия анализа;
Выполнена

проверка аналитических методик по таким критериям как специфичность,прецизионность, правильность, линейность, определен диапазон применения данных методик;
Проведена статистическая обработка полученных данных
По итогу валидационных работ было сделано заключение о возможности применения данных аналитических методик для дальнейшего анализа препаратов Ранитидин-ЛекТ и Эргокальциферол-ЛекТ на предприятии.

с подвижной фазой (или емкости с отдельными растворителями, входящими

в состав подвижной фазы) и систему дегазации подвижной фазы;
2.  насосная система предназначена для создания постоянного потока растворителя;
3. смеситель подвижной фазы;
4. система ввода пробы (инжектор), может быть ручным или автоматическим (автосамплер) обеспечивает ввод пробы смеси разделяемых компонентов в колонку с достаточно высокой воспроизводимостью;
5. хроматографическая колонка;
6.    термостат обеспечивает постоянство выбранного температурного режима;
7.  детектор (один или несколько с разными способами детектирования);
8. система управления хроматографом, сбора и обработки данных.