Что такое findslide.org?

FindSlide.org - это сайт презентаций, докладов, шаблонов в формате PowerPoint.


Для правообладателей

Обратная связь

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Яндекс.Метрика

Презентация на тему Патологии иммунитета

Содержание

Классификация реакций гиперчувствительности (P. Gell и R. Coombs, 1969)I тип - гиперчувствительность немедленного типаII- цитотоксическая гиперчувствительностьIII- иммунокомплекснаяIV- гиперчувствительность замедленного типа
Патологии иммунитетаДуданова О.П. – зав.кафедрой пропедевтики внутренних болезней и гигиены д.м.н. профессор71-46-84 Классификация реакций гиперчувствительности (P. Gell и R. Coombs, 1969)I тип - гиперчувствительность Гиперчувствительность немедленного типа (ГЧНТ)В ответ на аллерген синтезируются IgE (и IgG4)IgE фиксируются Дегрануляция тучных клеток ГЧНТ I типа Причины развития ГЧНТГенетические нарушения иммунорегуляции в сторону Th2- доминированияналичие источников IL-4 (индуктора Патофизиологические эффектысокращением гладкой мускулатуры кишечника, бронхов, мочевого пузыряактивацией секреторных, эндотелиальных и некоторых Клинические проявления ГЧНТ Клинические проявления зависят от пути проникновения алларгена:Ингаляционный –ринит, синусит, Клинические проявления ГЧНТАтопические заболевания:Бронхиальная астмаПоллинозАтопический дерматитАнафилаксияАнафилактический шокОтек Квинкекрапивница АллергеныИнгаляционные аллергены - бытовая и производственная пыль, клещи домашней пыли, пыльца растений, АллергеныПарентеральные - лекарственные средства, сыворотки, вакцины, яд и слюна насекомых - комаров, клопов, мошек и др. Патогенез астмы*Copyright Дуданова О.П., ПетрГУ *Copyright Дуданова О.П., ПетрГУПатофизиология БАРанняя астматическая реакция опосредуется гистамином, простагландинами, лейкотриенами Поздняя *Copyright Дуданова О.П., ПетрГУПатофизиология БАПод действием АГ-IgE активизируется фосфолипазаИз фосфолипидов мембран тучных *Copyright Дуданова О.П., ПетрГУПатофизиология БА Анафилактоидные реакцииНет предварительной сенсибилизации Не участвует IgEЛекарства связывают IgE- рецепторы на тучных II тип – цитотоксическая гиперчувствительность цитотоксические антитела (IgG, IgM), связываются с антигенами ГЧ II типа Клинические проявленияГемолитическая болезнь новорожденныхГемолитическая анемияПернициозная анемияТромбоцитопеническая пурпураСиндром ГудпасчераМикседемаСахарный диабет 1 типаАутоиммунный гепатит Гемолитическая болезнь новорожденныхПри первой беременности Rh (-) матери Rh (+) плодом происходит образование III тип - иммунокомплексная Взаимодействие антигенов и антител не на клеточной поверхности, Иммунокомплексная гиперчувствительностьЧаще поражаются ткани, где происходит фильтрация крови под давлением – почки, синовиальная оболочка суставов Повреждение эндотелия сосудов ЦИК Клинические проявления III типаСывороточная болезньСистемная красная волчанкаКожный васкулитПурпура Шенляйн-ГенохаГломерулонефрритЭкзогенный аллергический альвеолитФеномен АртюсаПодострый септический эндокардитРевматоидный артрит Заболевания иммунокомплексные IV тип – гиперчувствительность замедленного типаКлеточноопосредованная гиперчувствительностьАПК представляют антиген с MHC II IV тип – гиперчувствительность замедленного типа Причины развития ГЧЗТДК/КЛ секретируют IL-12, который направляет дифференцировку Th1-клетокTh1-клетки выделяют хемокины, привлекающие Клинические проявления ГЧЗТ Отторжение трансплантатаТуберкулезСаркоидозБолезнь КронаГранулематозный васкулитКонтактный дерматит, проба Манту Болезни гиперчувствительности IV типа Отторжение трансплантата Тип V гиперчувствительности Выделяют не во всех классификацияхУчаствуют антитела, не обладающие комплементсвязывающей АпоптозАпоптоз (от греч. apoptosis - листопад) - программированная (регулируемая) гибель клеток путём Апоптоз и некроз Механизмы индукции апоптозаРецепторный – воздействие внешних факторов на специализированные мембранные рецепторыМитохондриальный – активизация внутриклеточных сигналов Рецепторы и лиганды апоптозаРецепторы смерти – Death Receptor (DR) – относятся к Рецепторный путь запуска апоптоза КаспазыИнициаторные – 8, 9,10Эффекторные – 3, 7Каспаза-3 активирует CAD (Caspase Activited DNAse) Митохондриальный путь апоптозаВоздействие свободных радикалов, вирусов, гипоксии, гипотермии на мембрану митохондрийПовышение проницаемости митохондриальных мембранВыход проапоптотических факторов Митохондриальный путь запуска апоптоза Апоптоз, опосредованный Т-лимфоцитамиТ-лимфоциты выделяют перфорины, гранзимы А, ВАктивируют каспазы Регуляция апоптозаАнтиапоптотические белки:Белки семейства Bcl (Вcl-2 препятствуют освобождению цитохрома С из митохондрий)Белок Позитивная роль апоптозаЭлиминация старых клетокГормонозависимых клеток при физиологическом падении уровня гормоновАутореактивных иммунных клеток Апоптоз в иммунной системеОтрицательная селекция аутореактивных лимфоцитовУдаление аутореактивных клонов лимфоцитовРегуляция численности клетокУдаление Сниженный уровень апоптозаЗлокачественные опухоли:в опухолевых клетках снижена экспрессия Fas-рецепторов снижена функция белка Лабораторные методы в иммунологии ИммунодиффузионныеИммуноферментные РадиоиммунныеИммуноблотаГибридомная технологияМолекулярно-генетические *Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ Метод встречной иммунодиффузии по ОухтерлониВ агаровый гель помещают антигены и антитела, происходит Метод встречной иммунодиффузии по Оухтерлони*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ Радиальная иммунодиффузия по МанчиниДля определения уровня в крови Ig А, G и Иммуноферментный и радиоиммунный анализы Принцип методов - взаимодействие антигена с антителом, Метки ИФАРадионуклид – при радиоиммунном анализеФерменты, катализирующие превращение бесцветного субстрата в цветной Виды ИФАПрямой ИФА - метку присоединяют непосредственно либо к заданному антигену, либо Ферменты-меткиПероксидаза из корней хренаЩелочная фосфатаза Уреаза и др.*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ ИФА*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ Метод иммуноблотаОбнаружение в сыворотках пациентов антител, реагирующих с отдельными белками возбудителей инфекционных Гибридомная технологияЖивотных (мышей или крыс) активно иммунизируют определенным антигеномКогда продукция антител достигает Гибридомная технологияГибридома синтезирует моноклональные антитела в больших количествахЭти антитела однородны и могут Гибридомная технология*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ Гибридомная технологияГеорг Келер и Цезарь Мильштейн - лауреты Нобелевской премии 1984 г Молекулярно-генетические методыПолимеразная цепная реакция (ПЦР)МикрочипыМетод направленного мутагенеза – метод нокаут/нокин генов*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ Полимеразная цепная реакция- молекулярно-генетический метод специфической амплификации (увеличения) нуклеиновых кислот, индуцируемый синтетическими Полимеразная цепная реакцияМетод основан на многократном копировании определенного участка ДНК при помощи Полимеразная цепная реакцияПри проведении ПЦР выполняется 20-45 циклов, каждый из которых состоит Схема ПЦР *Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ Схема первого цикла полимеразной цепной реакции Денатурация ДНК-матрицы - цепи ДНК Возможности ПЦРВыявление в клинических образцах вирусов, микобактерий, простейших и бактерийОбнаружение врожденных и Микрочипы-организованное размещение молекул ДНК на специальном носителе-платформе ( пластинка из стекла или Возможности микрочиповодновременный анализ работы десятков тысяч геновбыстрое определение наличия вирусных и бактериальных Метод нокаута/нокина генов нокаут (knock-out)– удаление гена, нокин (knock-in) – добавление гена
Слайды презентации

Слайд 2 Классификация реакций гиперчувствительности (P. Gell и R. Coombs,

Классификация реакций гиперчувствительности (P. Gell и R. Coombs, 1969)I тип -

1969)
I тип - гиперчувствительность немедленного типа
II- цитотоксическая гиперчувствительность
III- иммунокомплексная
IV-

гиперчувствительность замедленного типа

Слайд 3 Гиперчувствительность немедленного типа (ГЧНТ)
В ответ на аллерген синтезируются

Гиперчувствительность немедленного типа (ГЧНТ)В ответ на аллерген синтезируются IgE (и IgG4)IgE

IgE (и IgG4)
IgE фиксируются на FcR тучных клеток, базофилов
При

повторном поступлении аллерген связывается с IgE-антителами
Происходит дегрануляция тучных клеток и базофилов и выброс биологически активных соединений (гепарин, гистамин, лейкотриены, хемокины..)
Привлечение в очаг эозинофилов


Слайд 4 Дегрануляция тучных клеток

Дегрануляция тучных клеток

Слайд 5 ГЧНТ I типа

ГЧНТ I типа

Слайд 6 Причины развития ГЧНТ
Генетические нарушения иммунорегуляции в сторону Th2-

Причины развития ГЧНТГенетические нарушения иммунорегуляции в сторону Th2- доминированияналичие источников IL-4

доминирования
наличие источников IL-4 (индуктора Тh2-ответа)
особенности дендритных клеток
особенности переключения изотипов

Ig на IgE

Путь поступления антигена (через слизистые)


Слайд 7 Патофизиологические эффекты
сокращением гладкой мускулатуры кишечника, бронхов, мочевого пузыря
активацией

Патофизиологические эффектысокращением гладкой мускулатуры кишечника, бронхов, мочевого пузыряактивацией секреторных, эндотелиальных и

секреторных, эндотелиальных и некоторых других клеток
бронхоспазм,
вазодилатация, отек


падение давления

Слайд 8 Клинические проявления ГЧНТ
Клинические проявления зависят от пути

Клинические проявления ГЧНТ Клинические проявления зависят от пути проникновения алларгена:Ингаляционный –ринит,

проникновения алларгена:
Ингаляционный –ринит, синусит, бронхиальная астма
Парентеральный – анафилактический шок
Энтеральный

– энтеропатия (диарея)

Слайд 9 Клинические проявления ГЧНТ
Атопические заболевания:
Бронхиальная астма
Поллиноз
Атопический дерматит
Анафилаксия
Анафилактический шок
Отек Квинке
крапивница

Клинические проявления ГЧНТАтопические заболевания:Бронхиальная астмаПоллинозАтопический дерматитАнафилаксияАнафилактический шокОтек Квинкекрапивница

Слайд 10 Аллергены
Ингаляционные аллергены - бытовая и производственная пыль, клещи

АллергеныИнгаляционные аллергены - бытовая и производственная пыль, клещи домашней пыли, пыльца

домашней пыли, пыльца растений, эпидермис и шерсть животных, эпидермис

и волосы человека, продукты химического производства, частицы тел насекомых, споры непатогенных микроскопических грибов
Пищевые аллергены - белок куриного яйца и коровьего молока, пищевые злаки, рыба и морепродукты, пищевые злаки, бобовые, орехи, овощи и фрукты …, некоторые пищевые добавки - консерванты, красители, эмульгаторы


Слайд 11 Аллергены
Парентеральные - лекарственные средства, сыворотки, вакцины, яд и

АллергеныПарентеральные - лекарственные средства, сыворотки, вакцины, яд и слюна насекомых - комаров, клопов, мошек и др.

слюна насекомых - комаров, клопов, мошек и др.


Слайд 12 Патогенез астмы
*
Copyright Дуданова О.П., ПетрГУ

Патогенез астмы*Copyright Дуданова О.П., ПетрГУ

Слайд 13 *
Copyright Дуданова О.П., ПетрГУ
Патофизиология БА
Ранняя астматическая реакция опосредуется

*Copyright Дуданова О.П., ПетрГУПатофизиология БАРанняя астматическая реакция опосредуется гистамином, простагландинами, лейкотриенами

гистамином, простагландинами, лейкотриенами
Поздняя астматическая реакция развивается у каждого

второго БА и обусловлена миграцией лимфоцитов, нейтрофилов и эозинофилов
Эозинофилы выделяют лейкотриен С4,
ф-р активации тромбоцитов
Макрофаги выделяют тромбоксан, лейкотриен В4, ф-р активации тромбоцитов
СD4 лимфоциты определяют локальную эозинофилию и избыток IgE

Слайд 14 *
Copyright Дуданова О.П., ПетрГУ
Патофизиология БА
Под действием АГ-IgE активизируется

*Copyright Дуданова О.П., ПетрГУПатофизиология БАПод действием АГ-IgE активизируется фосфолипазаИз фосфолипидов мембран

фосфолипаза
Из фосфолипидов мембран тучных клеток отщепляется арахидоновая к-та
Под влиянием

циклоксигеназы (ЦОГ) из нее образуются простагландины (ПГ), тромбоксан
Под действием липооксигеназы – лейкотриены, повышающие тонус гладких мышц

Слайд 15 *
Copyright Дуданова О.П., ПетрГУ
Патофизиология БА

*Copyright Дуданова О.П., ПетрГУПатофизиология БА

Слайд 16 Анафилактоидные реакции
Нет предварительной сенсибилизации
Не участвует IgE
Лекарства связывают

Анафилактоидные реакцииНет предварительной сенсибилизации Не участвует IgEЛекарства связывают IgE- рецепторы на

IgE- рецепторы на тучных клетках, вызывая их дегрануляцию:
Йодсодержащие контрасты
Анестетики
НПВС

- ингибируют ЦОГ и направляют метаболизм арахидоновой кислоты на лейкотриеновый путь


Слайд 17 II тип – цитотоксическая гиперчувствительность
цитотоксические антитела (IgG,

II тип – цитотоксическая гиперчувствительность цитотоксические антитела (IgG, IgM), связываются с

IgM), связываются с антигенами мембран клеток-мишеней, активируется комплемент по

классическому пути и происходит лизис клеток
Антителозависимая клеточная цитотоксичность (CD8-клетки, NK без комплемента вызывают цитолиз и апоптоз )
Фагоцитоз

Слайд 18 ГЧ II типа

ГЧ II типа

Слайд 19 Клинические проявления
Гемолитическая болезнь новорожденных
Гемолитическая анемия
Пернициозная анемия
Тромбоцитопеническая пурпура
Синдром Гудпасчера
Микседема
Сахарный

Клинические проявленияГемолитическая болезнь новорожденныхГемолитическая анемияПернициозная анемияТромбоцитопеническая пурпураСиндром ГудпасчераМикседемаСахарный диабет 1 типаАутоиммунный гепатит

диабет 1 типа
Аутоиммунный гепатит


Слайд 20 Гемолитическая болезнь новорожденных
При первой беременности Rh (-) матери Rh

Гемолитическая болезнь новорожденныхПри первой беременности Rh (-) матери Rh (+) плодом происходит

(+) плодом происходит образование IgG-антител
При второй беременности IgG-антитела проникают

в организм ребенка и вызывают лизис эритроцитов
У новорожденного развивается гемолитическая анемия с желтухой

Слайд 21 III тип - иммунокомплексная
Взаимодействие антигенов и антител

III тип - иммунокомплексная Взаимодействие антигенов и антител не на клеточной

не на клеточной поверхности, а в кровотоке
ЦИК мелкого размера

не удаляются из циркуляции макрофагами
Происходит их фиксация на эндотелии сосудов и клубочков почек, в других тканях и инициация АЗКЦТ

Слайд 22 Иммунокомплексная гиперчувствительность
Чаще поражаются ткани, где происходит фильтрация крови

Иммунокомплексная гиперчувствительностьЧаще поражаются ткани, где происходит фильтрация крови под давлением – почки, синовиальная оболочка суставов

под давлением – почки, синовиальная оболочка суставов


Слайд 23 Повреждение эндотелия сосудов ЦИК

Повреждение эндотелия сосудов ЦИК

Слайд 24 Клинические проявления III типа
Сывороточная болезнь
Системная красная волчанка
Кожный васкулит
Пурпура

Клинические проявления III типаСывороточная болезньСистемная красная волчанкаКожный васкулитПурпура Шенляйн-ГенохаГломерулонефрритЭкзогенный аллергический альвеолитФеномен АртюсаПодострый септический эндокардитРевматоидный артрит

Шенляйн-Геноха
Гломерулонефррит
Экзогенный аллергический альвеолит
Феномен Артюса
Подострый септический эндокардит
Ревматоидный артрит


Слайд 25 Заболевания иммунокомплексные

Заболевания иммунокомплексные

Слайд 26 IV тип – гиперчувствительность замедленного типа
Клеточноопосредованная гиперчувствительность
АПК представляют

IV тип – гиперчувствительность замедленного типаКлеточноопосредованная гиперчувствительностьАПК представляют антиген с MHC

антиген с MHC II класса
Активируются Th1 хелперы, продуцирующие ИФН-гамма,

стимулирующий макрофаги
Макрофаги трансформируются в гигантские многоядерные клетки
Формируется очаг воспаления в виде узелков
Развивается фиброзная ткань


Слайд 27 IV тип – гиперчувствительность замедленного типа

IV тип – гиперчувствительность замедленного типа

Слайд 28 Причины развития ГЧЗТ
ДК/КЛ секретируют IL-12, который направляет дифференцировку

Причины развития ГЧЗТДК/КЛ секретируют IL-12, который направляет дифференцировку Th1-клетокTh1-клетки выделяют хемокины,

Th1-клеток
Th1-клетки выделяют хемокины, привлекающие МФ, и IFN, активирующий их

Активированные МФ, выделяя провоспалительные цитокины, обеспечивают развитие локальной воспалительной реакции


Слайд 29 Клинические проявления ГЧЗТ
Отторжение трансплантата
Туберкулез
Саркоидоз
Болезнь Крона
Гранулематозный васкулит
Контактный дерматит, проба

Клинические проявления ГЧЗТ Отторжение трансплантатаТуберкулезСаркоидозБолезнь КронаГранулематозный васкулитКонтактный дерматит, проба Манту

Манту


Слайд 30 Болезни гиперчувствительности IV типа

Болезни гиперчувствительности IV типа

Слайд 31 Отторжение трансплантата

Отторжение трансплантата

Слайд 32 Тип V гиперчувствительности
Выделяют не во всех классификациях
Участвуют

Тип V гиперчувствительности Выделяют не во всех классификацияхУчаствуют антитела, не обладающие

антитела, не обладающие комплементсвязывающей активностью (в отличие от II

типа) и направленные против рецепторов на клеточной поверхности
Антитела к рецепторам тиреотропного гормона при болезни Грейвса
Антитела к рецепторам ацетилхолина при миастении

Слайд 33 Апоптоз
Апоптоз (от греч. apoptosis - листопад) - программированная

АпоптозАпоптоз (от греч. apoptosis - листопад) - программированная (регулируемая) гибель клеток

(регулируемая) гибель клеток путём деградации её компонентов:
Клетка округляется, уменьшается

в размерах
Сокращаются псевдоподии
Происходит конденсация хроматина
Фрагментация ДНК (кариорексис)
Распад на апоптотические тельца
Фагоцитоз макрофагами



Слайд 34 Апоптоз и некроз

Апоптоз и некроз

Слайд 35 Механизмы индукции апоптоза
Рецепторный – воздействие внешних факторов на

Механизмы индукции апоптозаРецепторный – воздействие внешних факторов на специализированные мембранные рецепторыМитохондриальный – активизация внутриклеточных сигналов

специализированные мембранные рецепторы
Митохондриальный – активизация внутриклеточных сигналов


Слайд 36 Рецепторы и лиганды апоптоза
Рецепторы смерти – Death Receptor

Рецепторы и лиганды апоптозаРецепторы смерти – Death Receptor (DR) – относятся

(DR) – относятся к семейству рецепторов фактора некроза опухоли:
Fas

(Apo-1 или CD95)
ФНО-Р1 (p55 или CD120a)
TLR (Toll-подобные рецепторы)…
Лиганды рецепторов смерти:
Fas-лиганд (Fas-L или CD95L)
ФНО-альфа


Слайд 37 Рецепторный путь запуска апоптоза

Рецепторный путь запуска апоптоза

Слайд 38 Каспазы
Инициаторные – 8, 9,10
Эффекторные – 3, 7
Каспаза-3 активирует

КаспазыИнициаторные – 8, 9,10Эффекторные – 3, 7Каспаза-3 активирует CAD (Caspase Activited

CAD (Caspase Activited DNAse) эндонуклеазу
Эндонуклеаза разрезает клеточную ДНК
Каспаза-3

разрушает цитоскелет клетки
На клеточной мембране экспрессируются маркеры для фагоцитоза (фосфатидилсерин, аннексин V, тромбоспондин-1)
Рецепторы-мусорщики макрофагов (витронектин, CD14) распознают апоптозные клетки и фагоцитируют их


Слайд 39 Митохондриальный путь апоптоза
Воздействие свободных радикалов, вирусов, гипоксии, гипотермии

Митохондриальный путь апоптозаВоздействие свободных радикалов, вирусов, гипоксии, гипотермии на мембрану митохондрийПовышение проницаемости митохондриальных мембранВыход проапоптотических факторов

на мембрану митохондрий
Повышение проницаемости митохондриальных мембран
Выход проапоптотических факторов


Слайд 40 Митохондриальный путь запуска апоптоза

Митохондриальный путь запуска апоптоза

Слайд 41 Апоптоз, опосредованный Т-лимфоцитами
Т-лимфоциты выделяют перфорины, гранзимы А, В
Активируют

Апоптоз, опосредованный Т-лимфоцитамиТ-лимфоциты выделяют перфорины, гранзимы А, ВАктивируют каспазы

каспазы


Слайд 42 Регуляция апоптоза
Антиапоптотические белки:
Белки семейства Bcl (Вcl-2 препятствуют освобождению

Регуляция апоптозаАнтиапоптотические белки:Белки семейства Bcl (Вcl-2 препятствуют освобождению цитохрома С из

цитохрома С из митохондрий)
Белок XIAP (Х-Inhibitor of Apoptosis Protein)
Проапоптотические

белки (освобождают цитохром С из митохондрий):
Р53
Bcl-10
Bak, Bax, Bim, Bik
Цитохром с и др.




Слайд 43 Позитивная роль апоптоза
Элиминация старых клеток
Гормонозависимых клеток при физиологическом

Позитивная роль апоптозаЭлиминация старых клетокГормонозависимых клеток при физиологическом падении уровня гормоновАутореактивных иммунных клеток

падении уровня гормонов
Аутореактивных иммунных клеток


Слайд 44 Апоптоз в иммунной системе
Отрицательная селекция аутореактивных лимфоцитов
Удаление аутореактивных

Апоптоз в иммунной системеОтрицательная селекция аутореактивных лимфоцитовУдаление аутореактивных клонов лимфоцитовРегуляция численности

клонов лимфоцитов
Регуляция численности клеток
Удаление клеток с поврежденным геномом
Профилактика аутоиммунных

заболеваний



Слайд 45 Сниженный уровень апоптоза
Злокачественные опухоли:
в опухолевых клетках снижена экспрессия

Сниженный уровень апоптозаЗлокачественные опухоли:в опухолевых клетках снижена экспрессия Fas-рецепторов снижена функция

Fas-рецепторов
снижена функция белка Р53, который восстанавливает ДНК, а

при невозможности восстановить ДНК запускает апоптоз
Нейродегенеративные заболевания - болезнь Паркинсона, Альцгеймера, Хантингтона
СПИД

Слайд 46 Лабораторные методы в иммунологии

Иммунодиффузионные
Иммуноферментные
Радиоиммунные
Иммуноблота
Гибридомная технология
Молекулярно-генетические
*
Copyright

Лабораторные методы в иммунологии ИммунодиффузионныеИммуноферментные РадиоиммунныеИммуноблотаГибридомная технологияМолекулярно-генетические *Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 47 Метод встречной иммунодиффузии по Оухтерлони

В агаровый гель помещают

Метод встречной иммунодиффузии по ОухтерлониВ агаровый гель помещают антигены и антитела,

антигены и антитела, происходит диффузия их навстречу друг к

другу
В результате в месте встречи антител с антигенами выпадает осадок, который в геле виден невооруженным глазом как полоса преципитации

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 48 Метод встречной иммунодиффузии по Оухтерлони
*
Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Метод встречной иммунодиффузии по Оухтерлони*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Слайд 49 Радиальная иммунодиффузия по Манчини
Для определения уровня в крови

Радиальная иммунодиффузия по МанчиниДля определения уровня в крови Ig А, G

Ig А, G и М
В агаровый гель помещают антисыворотки

против Ig
Заливают гель на пластину
После застывания пробивают луночки, куда вносят стандарты и исследуемые сыворотки
Через 16-24 ч. вокруг луночек образуются кольца преципитации
По диаметру колец определяют концентрацию Ig

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 50 Иммуноферментный и радиоиммунный анализы
Принцип методов - взаимодействие антигена

Иммуноферментный и радиоиммунный анализы Принцип методов - взаимодействие антигена с

с антителом, т.е. иммунологическое распознавание, которое визуализуется с помощью

специальной метки, заранее конъюгированной либо с антителом, либо с антигеном
Метка – вещество, которое может измерить прибором

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 51 Метки ИФА
Радионуклид – при радиоиммунном анализе
Ферменты, катализирующие превращение

Метки ИФАРадионуклид – при радиоиммунном анализеФерменты, катализирующие превращение бесцветного субстрата в

бесцветного субстрата в цветной или флюоресцирующий продукт
Флюорисцирующие, люминесцирующие вещества
Регистраторы

– радиоактивный счетчик, спектрофотометр, флюориметр соответственно

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 52 Виды ИФА
Прямой ИФА - метку присоединяют непосредственно либо

Виды ИФАПрямой ИФА - метку присоединяют непосредственно либо к заданному антигену,

к заданному антигену, либо к антителу, специфичному против искомого

антигена
Непрямой - метку присоединяют не к целевому антигену и антителу, а к так называемым вторым антителам - антивидовым антииммуноглобулиновым антителам, т.е. антителам к Ig того вида, с биологическим материалом которого работают

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 53 Ферменты-метки
Пероксидаза из корней хрена
Щелочная фосфатаза
Уреаза и др.
*
Copyright

Ферменты-меткиПероксидаза из корней хренаЩелочная фосфатаза Уреаза и др.*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 54 ИФА
*
Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

ИФА*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Слайд 55 Метод иммуноблота
Обнаружение в сыворотках пациентов антител, реагирующих с

Метод иммуноблотаОбнаружение в сыворотках пациентов антител, реагирующих с отдельными белками возбудителей

отдельными белками возбудителей инфекционных заболеваний, чаще всего вирусов
Вирусные белки,

разделенные в геле электрофорезом, помещают на лист нитроцеллюлозы и нарезают ее на стрипы (полоски)
В полоски добавляют испытуемую сыворотку, затем - раствор конъюгата антииммуно-глобулиновых антител с ферментом
При наличии в сыворотке антител к вирусным белкам появляются окрашенные полосы в зонах вирусных белков

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 56 Гибридомная технология
Животных (мышей или крыс) активно иммунизируют определенным

Гибридомная технологияЖивотных (мышей или крыс) активно иммунизируют определенным антигеномКогда продукция антител

антигеном
Когда продукция антител достигает высокого уровня, из селезенки и

лимфоузлов животных (мест скопления антителообразующих клеток - АОК) готовят суспензию клеток
Вызывают слияние АОК с клетками миеломы, обладающими безудержным ростом, образуется гибридома

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 57 Гибридомная технология
Гибридома синтезирует моноклональные антитела в больших количествах
Эти

Гибридомная технологияГибридома синтезирует моноклональные антитела в больших количествахЭти антитела однородны и

антитела однородны и могут рассматриваться как чистые химические реактивы
Используются

для выявления белков, гормонов, медиаторов воспаления, бактериальных и вирусных антигенов, ядов..

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 58 Гибридомная технология
*
Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Гибридомная технология*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Слайд 59 Гибридомная технология
Георг Келер и Цезарь Мильштейн - лауреты

Гибридомная технологияГеорг Келер и Цезарь Мильштейн - лауреты Нобелевской премии 1984

Нобелевской премии 1984 г за создание гибридомной технологии
*
Copyright Дуданова

О.П. ПетрГУ

Слайд 60 Молекулярно-генетические методы

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Микрочипы
Метод направленного мутагенеза –

Молекулярно-генетические методыПолимеразная цепная реакция (ПЦР)МикрочипыМетод направленного мутагенеза – метод нокаут/нокин генов*Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

метод нокаут/нокин генов

*
Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 61 Полимеразная цепная реакция
- молекулярно-генетический метод специфической амплификации (увеличения)

Полимеразная цепная реакция- молекулярно-генетический метод специфической амплификации (увеличения) нуклеиновых кислот, индуцируемый

нуклеиновых кислот, индуцируемый синтетическими олигонуклеотидными праймерами
Праймер - короткий фрагмент

нуклеиновой кислоты (олигонуклеотид), комплементарный ДНК- или РНК-мишени, служит затравкой для синтеза комплементарной цепи с помощью ДНК-полимеразы

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 62 Полимеразная цепная реакция
Метод основан на многократном копировании определенного

Полимеразная цепная реакцияМетод основан на многократном копировании определенного участка ДНК при

участка ДНК при помощи фермента Taq- ДНК-полимеразы.
Реакция проводится

в программируемом термостате (амплификаторе) - приборе, который может проводить достаточно быстро
охлаждение и нагревание пробирок

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 63 Полимеразная цепная реакция
При проведении ПЦР выполняется 20-45 циклов,

Полимеразная цепная реакцияПри проведении ПЦР выполняется 20-45 циклов, каждый из которых

каждый из которых состоит из трех стадий:
денатурации,
отжига

праймеров,
элонгации

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 64 Схема ПЦР
*
Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Схема ПЦР *Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ

Слайд 65 Схема первого цикла полимеразной цепной реакции
Денатурация ДНК-матрицы -

Схема первого цикла полимеразной цепной реакции Денатурация ДНК-матрицы - цепи

цепи ДНК расходятся при нагревании смеси до 94-96 °С
Стадия

отжига праймеров - праймеры комплементарно связываются с матрицей при снижении температуры
Элонгация - синтез дочерней цепи ДНК на матрице материнской
Циклы повторяются, количество продукта возрастает в геометрической прогрессии
ПЦР позволяет выявить 1 возбудителя в клиническом образце

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 66 Возможности ПЦР
Выявление в клинических образцах вирусов, микобактерий, простейших

Возможности ПЦРВыявление в клинических образцах вирусов, микобактерий, простейших и бактерийОбнаружение врожденных

и бактерий
Обнаружение врожденных и приобретенных генетических нарушений
Определение полиморфизма генов
Определение

экспрессии цитокинов, рецепторов цитокинов и других эффекторных молекул
ДНК типирование HLA аллелей и др.

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 67 Микрочипы
-организованное размещение молекул ДНК на специальном носителе-платформе (

Микрочипы-организованное размещение молекул ДНК на специальном носителе-платформе ( пластинка из стекла

пластинка из стекла или гель)
На платформу наносятся биологические макромолекулы

(ДНК, белки, ферменты), способные избирательно связывать вещества, содержащиеся в анализируемом растворе
На биочипе гибридизуют молекулы ДНК, меченные с помощью флюоресцентной или радиоактивной метки
Интенсивность флюоресценции в ячейках измеряют с помощью сканера

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


Слайд 68 Возможности микрочипов
одновременный анализ работы десятков тысяч генов
быстрое определение

Возможности микрочиповодновременный анализ работы десятков тысяч геновбыстрое определение наличия вирусных и

наличия вирусных и бактериальных возбудителей
диагностика лейкозов
диагностика различных видов раковых

опухолей
скрининг действия новых лекарств на различные и т.д.

*

Copyright Дуданова О.П. ПетрГУ


  • Имя файла: patologii-immuniteta.pptx
  • Количество просмотров: 129
  • Количество скачиваний: 0