Презентация на тему Открытие нейтрофильных внеклеточных ловушек - новый этап в изучении морфогенеза и функций нейтрофилов

и NET`s
Эксперименты с целью изучения NET`s
Влияние эстрогенов на образование

NET`s
Виводы

внеклеточную среду

Внемитохондриальное образование противомикробных АФК

в ходе прижизненного микроскопического изучения прозрачных форм низших беспозвоночных

, выловленных у берегов Сицилии.

МПГ и захватывают их после предварительной опсонизации своей плазмолеммой

с последующим переносом в фагосому. Далее фагосомы ,сливаясь с первичными (азурфильными) , вторичными (специфическими) и третичными гранулами, формирует фаголизосому.

на мембране фагосом и передают электроны кислороду для образования

АФК (O2 , H2O2 , HOCL)

:
СЭМ –сканирующая электронная микроскопия
ТЭМ – трансмиссионная

электронная микроскопия
КИФЦ- метод конфокальной иммунофлюоресцентной цитохимии

доменах NET`s находятся ДНК-гистоновые комплексы (Н2А-Н2В-DNA) и нейтрофильнная эластаза.

повреждения оболочки ядра и вакуолизации цитоплазммы при сохранении гранул

интактивными .

Нетоз

- Ядра теряют сегментированную форму ,их фрагменты сливаються с образованием гомогенной массы без разделения на эу- и гетерохроматин , но оболочка ядра сохраняэтся .

детородного периода обеспечивается наличием иммунологических барьеров и нормальным функционированием

иммунорегуляторных механизмов.
Иммунная система женского репродуктивного тракта специфически регулируется половыми стероидными гормонами.В этой многочисленной группе ведущая роль с точки зрения контроля репродуктивной функции принадлежит эстрогенам, прогестерону и глюкокортикостероидам.

ответ путем модуляции количества и функций нейтрофилов.

ряду уникальных свойств (высокая подвижность, наличие мощных бактерицидных и

цитотоксических продуктов) рассматриваются как высокопрофессиональные «убийцы», составляющие своеобразный «отряд быстрого реагирования» в системе врожденной противоинфекционной защиты организма. В 2004 г. немецким и американскими учеными была открыта и идентифицирована новая функция нейтрофилов – формирование нейтрофильных внеклеточных ловушек (NET`s – Neutrophil Extracellular Traps; NET`s). NET`s представляют собой сети внеклеточных волокон ДНК, которые связывают, обезвреживают и уничтожают патогенные микроорганизмы с помощью антимикробных белков. Ловушки связывают микроорганизмы, как грамположительные, так и грамотрицательные, предотвращают их распространение и обеспечивают высокую местную концентрацию антимикробных агентов.

18–35 лет в первую фазу менструального цикла. У женщин

был определен эндогенный уровень прогестерона методом иммуноферментного анализа для исключения из исследования тех, у кого показатели концентрации гормона выходили за пределы нормы.

периферической венозной крови. Для изучения образования НВЛ полученные таким

образом клетки инкубировали 30 мин при 37˚C с прогестероном в физиологических концентрациях, соответствующих их уровню в периферической крови в I (20 нг/мл), II (50 нг/мл) и III (100 нг/мл) триместры беременности. Для контроля использовали взвесь нейтрофилов, инкубируемых в тех же условиях,без гормона.

и НВЛ [5]. Данная классификация условна и характеризует разную

степень формирования НВЛ. Клетки с сегментированным ядром – это неизмененные клетки, у которых хорошо визуализируется сегментированное ядро. После активации нейтрофила происходит изменение структуры ядра и гранул (ядерная мембрана разрушается, гранулы растворяются, компоненты будущей ловушки распределяются по всему объему клетки) – клетка с недифференцированным ядром. Затем клетка сокращается и выбрасывает высокоактивную смесь наружу, формируя сеть – НВЛ.

акридиновым оранжевым; ув. 1000). 1 – моноцит; 2 – лимфоцит.

периферической крови с использованием НСТ-теста , мы обнаружили, что

прогестерон во всех трех используемых концентрациях приводит к значимому снижению активности и индекса спонтанного НСТ-теста,но не влияет на аналогичные показатели индуцированного НСТ-теста, т. е. интактные нейтрофилы отвечали на воздействие прогестерона снижением их бактерицидной функции,а при дополнительной стимуляции активированные нейтрофилы не изменяли своих свойств.При оценке регулирующего действия прогестерона на фагоцитарную функцию нейтрофилов периферической крови, а именно на активность, интенсивность и фагоцитарное число, не выявили достоверных различий в числе.

концентрации 50 нг/мл. Люминесцентная микроскопия (окрашивание акридиновым оранжевым; ув. 1000). Морфологические формы

нейтрофилов: 1 – нейтрофил с сегментированным ядром; 2 – нейтрофил с недифференци- рованным ядром; 3 – нейтрофильная внеклеточная ловуш- ка. Рис3

прогестерон в концентрациях, соответствующих I, II и III триместрам

беременности, приводит к снижению кислородзависимой бактерицидной функции неактивированных нейтрофилов и, к усилению формирования внеклеточных ловушек, максимальное значение которых регистрируется в группе, где концентрация прогестерона соответствует II триместру беременности. Скорее всего, полученные данные в эффектах действия прогестерона на нейтрофилы можно объяснить различием в рецепторном аппарате, обеспечивающем бактерицидную функцию и формирование НВЛ.

с помощью индуцированного НСТ-теста. Световая микроскопия (окрашивание 0,1% раствором сафранина; ув.

1000).

путем фагоцитоза и в результате захвата МПГ в NET`s

сделает более понятным механизмы патогенеза ряда болезней и подходы к их эффективному лечению .

судьба внеклеточных структур – фибрилл NET`s с основой из

ДНК-гистонов .