Что такое findslide.org?

FindSlide.org - это сайт презентаций, докладов, шаблонов в формате PowerPoint.


Для правообладателей

Обратная связь

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Яндекс.Метрика

Презентация на тему Histologická technika 2

Содержание

Fyzikální metody fixaceVysoké teploty : varem, suché teplo méně často využívané v histologiiNízké teploty : často využívané ,předevšímv histochemii./ průkaz enzymů, lipidů /Zmrazovací metody / freezing methods /Tzn. rychle zmrazit kousek odebrané tkáněza velmi nízkých teplot
Histologická technika 2Mudr.Richard Becke Fyzikální metody fixaceVysoké teploty : varem, suché teplo méně často využívané v Zmrazovací metodyV histochemii výborné pro průkaz enzymů a lipidů (histochemie prokazuje chemickélátky Chemické metody =  Fixační tekutinyFormolBróm formolBakerova tekutinaBouinova tekutinaTekutiny se sublimátem:SusaZenkerova tekutina/ jodování /100 % ethanolAceton Formol : je nejvíce používanýJe 40 % roztok formaldehydu v vodě,to je Bakerova tekutinaSložení:10 % formolCaCl2VodaVýborná fixační tekutina pro průkaz lipidů 3/ Kombinace Fyz. a Chemických metod.Znamená podchladit si fixační tekutinu.Např. Aceton : Zalévání tkáníProč se tkáň musí zalít ?? Za účelem zkrojení tkáně na Odvodnění a  IntermediumOdvodnění se provede vzestupnou řadou alkoholů./30%,50%,70%,80%,96%/Nahradit vodu v tkáních Prosycení parafínem,    ZalitíTeplota u parafínu:56 – 58 st.Celsia.3 lázně Zalévací komůrkaParafínovébločky Další zalévací mediumCeloidin / nitrát celulózy rozpustný v alkohol éteru – princip Krájení řezůMikrotom – přístroj k krájení řezů2 základní typy: sáňkový mikrotom Odvodňovací automat(autotechnikon)Rotační MikrotomPřístroje pro zpracování histologického materiálu Rotační mikrotomMikrotomové nože Přilepení a napnutí parafínových řezůElektricky vyhřívaná ploténka Barvení řezů Barvivá : přírodní ,syntetickáBasická barviva :   HematoxylinToluidinová modřThioninMethylenová BARVENÍ BASICKÁ (kationtová) – Struktury, cytoplasma v buňkách1/ basofilní / jádro/, ribosomy, GER: podmiňují basofilii cytoplasmy2/ Basofilní cytoplasma , eosinofilní cytoplasma Metoda Hematoxylin - EosinTato přehledná barvící metoda patří mezi nejpoužívanějšíViz – tabule v rotundě Barvení hematoxylinem - eosinem Přehledné barvící metody1/ Hematoxylin – eosin2/ žlutý trichróm3/ zelený trichróm4/ modrý trichróm5/ Montování řezůJe ve skutečnosti přilepení krycího sklíčka na obarvený řez.Montovací média nerozpustná Jazyk, HE (kolagenní vazivo růžové, svaly červené) B4 Jícen , H.E. , preparát . T 1 TRACHEA, zelený trichrom (světlá zeleň – kolagenní Weigert van Giesonovametoda Weigertův hematoxylinpikrofuchsinJádra – hnědáKolagenní vlákna - červenáCytoplasma, svaly a azocarmine, anilínová modř, orange GAZANSval - červenýKolagenní vlákna - modráJádra - červenáPhotomicrographs: Collection of ÚHIEMZJ
Слайды презентации

Слайд 2


Слайд 3 Fyzikální metody fixace
Vysoké teploty : varem, suché teplo

Fyzikální metody fixaceVysoké teploty : varem, suché teplo méně často využívané

méně často využívané v histologii

Nízké teploty : často využívané

,především
v histochemii./ průkaz enzymů, lipidů /

Zmrazovací metody / freezing methods /
Tzn. rychle zmrazit kousek odebrané tkáně
za velmi nízkých teplot

Слайд 4 Zmrazovací metody
V histochemii výborné pro průkaz enzymů a

Zmrazovací metodyV histochemii výborné pro průkaz enzymů a lipidů (histochemie prokazuje

lipidů (histochemie prokazuje chemické
látky v buňkách).
Tekutý dusík,CO2,isopentan, heptan –

látky
rychle zmrazí kousek
odebrané tkáně

Cryotechnika
/ přístroj : cryocut /
Výhoda: rychlost výsledků
Možnost využít
v průběhu operace
Tzv.peroperační
biopsie


Слайд 5 Chemické metody = Fixační tekutiny
Formol

Bróm formol

Bakerova tekutina

Bouinova tekutina
Tekutiny

Chemické metody = Fixační tekutinyFormolBróm formolBakerova tekutinaBouinova tekutinaTekutiny se sublimátem:SusaZenkerova tekutina/ jodování /100 % ethanolAceton

se sublimátem:
Susa
Zenkerova tekutina
/ jodování /

100 % ethanol
Aceton


Слайд 6 Formol : je nejvíce používaný
Je 40 % roztok

Formol : je nejvíce používanýJe 40 % roztok formaldehydu v vodě,to

formaldehydu v vodě,
to je 100 % formol.
Nutno naředit na

10 % roztok / tedy 4%
roztok formaldehydu /.
Kys. mravenčí / HCOOH / vzniká na světle,proto :
Láhev z tmavého skla a neutralizovat :
CaCO3 – 10% neutrální formol

Doba fixace : 24 – 48 hodin

Слайд 7 Bakerova tekutina
Složení:
10 % formol
CaCl2
Voda

Výborná fixační tekutina pro průkaz

Bakerova tekutinaSložení:10 % formolCaCl2VodaVýborná fixační tekutina pro průkaz lipidů

lipidů


Слайд 8 3/ Kombinace Fyz. a Chemických metod.
Znamená podchladit si

3/ Kombinace Fyz. a Chemických metod.Znamená podchladit si fixační tekutinu.Např. Aceton

fixační tekutinu.

Např. Aceton : je lepší fixační tekutinou
podchlazený na

0 – 4 st.Celsia.

Další fixační tekutiny – viz tabule - rotunda

Слайд 9 Zalévání tkání
Proč se tkáň musí zalít ?? Za

Zalévání tkáníProč se tkáň musí zalít ?? Za účelem zkrojení tkáně

účelem
zkrojení tkáně na tenké řezy.
Nejpoužívanější médium je parafín

1/

Odvodnění
2/ Prosycení intermediem
3/ Prosycení parafínem
4/ Vlastní zalití


Слайд 10 Odvodnění a Intermedium
Odvodnění se provede
vzestupnou řadou

Odvodnění a IntermediumOdvodnění se provede vzestupnou řadou alkoholů./30%,50%,70%,80%,96%/Nahradit vodu v tkáních


alkoholů./30%,50%,70%,
80%,96%/
Nahradit vodu v tkáních postupně až
100 % ethanolem.

Parafín

je s vodou
nesmísitelné medium.

Intermedium je látka
smísitelná s 100% alkoholem a zároveň se v ní rozpouští parafín.

Benzen,xylene,toluen.
Metylsalicylát,metylbenzoát.

Např. 3 lázně benzenu
po 15 minutách


Слайд 11 Prosycení parafínem, Zalití
Teplota u parafínu:
56

Prosycení parafínem,  ZalitíTeplota u parafínu:56 – 58 st.Celsia.3 lázně zkvalitněnéhoparafínu./+

– 58 st.Celsia.
3 lázně zkvalitněného
parafínu./+ včelí vosk /
Postupně se

do tkáně
dostává parafín.

Zalévací komůrka
Teplota 56 – 58 st.C.
Přenést tkáň do parafínu.
Tvrzení / ochlazení /
parafínu.
Přitmelí se na dřevěný nosič
Výsledek : parafínový
bloček .


Слайд 12 Zalévací komůrka
Parafínové
bločky

Zalévací komůrkaParafínovébločky

Слайд 13 Další zalévací medium
Celoidin / nitrát celulózy rozpustný v

Další zalévací mediumCeloidin / nitrát celulózy rozpustný v alkohol éteru –

alkohol éteru – princip – odpaří se /.
Dobré zalévací

medium pro tzv . tvrdé
tkáně / chrupavka, kost, zub /.
Výhoda : zalévá se při pokojové teplotě
Nevýhoda : zalévání trvá dlouho – několik
týdnů.

Zalévací média rozpustná ve vodě : želatina, vosky rozpustné ve vodě, umělé pryskyřice / glycolmetakrylát /,celodal / derivát močoviny /

Слайд 14 Krájení řezů
Mikrotom – přístroj k krájení řezů
2 základní

Krájení řezůMikrotom – přístroj k krájení řezů2 základní typy: sáňkový mikrotom

typy: sáňkový mikrotom

rotační mikrotom

Výsledek : ukrojený tenký řez / 5 – 10 um / z parafínového bločku a přenesený a přilepený na podložní sklo
/ směsí glycerol – bílek, poly – L - lysine /

Слайд 15 Odvodňovací automat
(autotechnikon)
Rotační Mikrotom
Přístroje pro zpracování histologického materiálu

Odvodňovací automat(autotechnikon)Rotační MikrotomPřístroje pro zpracování histologického materiálu

Слайд 16 Rotační mikrotom
Mikrotomové nože

Rotační mikrotomMikrotomové nože

Слайд 17 Přilepení a napnutí parafínových řezů
Elektricky vyhřívaná ploténka

Přilepení a napnutí parafínových řezůElektricky vyhřívaná ploténka

Слайд 18 Barvení řezů Barvivá : přírodní ,syntetická
Basická barviva :

Barvení řezů Barvivá : přírodní ,syntetickáBasická barviva :  HematoxylinToluidinová modřThioninMethylenová

Hematoxylin
Toluidinová modř
Thionin
Methylenová violeť
Basický fuchsin
Methylénová modř
Kyselá barviva:
Eosin
Anilínová modř
Světlá zeleň
Oranž

G
Šafrán
Pikrofuchsin

Слайд 19

BARVENÍ BASICKÁ (kationtová) – kladný náboj na

BARVENÍ




BASICKÁ (kationtová) – kladný náboj na barevné části,

reagují
s aniontovými skupinami struktur buněk a tkání
metylenová modř, toluidinová modř, thionin, (hematoxylin)
BASOFILIE, BASOFILNÍ STRUKTURA

KYSELÁ, ACIDICKÁ (aniontová) - záporný náboj na
barevné části barviva, reagují s kationtovými skupinami struktur
eosin, světlá zeleň, anilinová modř, pikrofuchsin, oranž G
ACIDOFILIE, EOSINOFILIE, OXYFILIE,
EOSINOFILNÍ STRUKTURA



Слайд 20 Struktury, cytoplasma v buňkách
1/ basofilní / jádro/, ribosomy,

Struktury, cytoplasma v buňkách1/ basofilní / jádro/, ribosomy, GER: podmiňují basofilii

GER: podmiňují basofilii cytoplasmy

2/ eosinofilní / lysozomy, mitochondrie :
podmiňují

eosinofilii cytoplasmy

3/ neutrofilní / granula – leukocyty /

Слайд 21 Basofilní cytoplasma , eosinofilní cytoplasma

Basofilní cytoplasma , eosinofilní cytoplasma

Слайд 22 Metoda Hematoxylin - Eosin
Tato přehledná barvící metoda patří

Metoda Hematoxylin - EosinTato přehledná barvící metoda patří mezi nejpoužívanějšíViz – tabule v rotundě

mezi nejpoužívanější
Viz – tabule v rotundě


Слайд 23 Barvení hematoxylinem - eosinem

Barvení hematoxylinem - eosinem

Слайд 24 Přehledné barvící metody
1/ Hematoxylin – eosin
2/ žlutý trichróm
3/

Přehledné barvící metody1/ Hematoxylin – eosin2/ žlutý trichróm3/ zelený trichróm4/ modrý

zelený trichróm
4/ modrý trichróm
5/ metoda AZAN
6/ metoda van Gieson
Viz

obrazová tabule v rotundě

Слайд 26 Montování řezů
Je ve skutečnosti přilepení krycího sklíčka na

Montování řezůJe ve skutečnosti přilepení krycího sklíčka na obarvený řez.Montovací média

obarvený řez.
Montovací média nerozpustná ve vodě
/např. kanadský balsám,Entalan, Solakryl/
Montovací

média rozpustná ve vodě/např.Apáthyho sirup/
2 důležité požadavky na mont. médium:
průhlednost, a index lomu jako sklo/ 1,5 /

Слайд 27 Jazyk, HE (kolagenní vazivo růžové, svaly červené)
B4

Jazyk, HE (kolagenní vazivo růžové, svaly červené) B4

Слайд 28 Jícen , H.E. , preparát . T 1

Jícen , H.E. , preparát . T 1

Слайд 29 TRACHEA, zelený trichrom (světlá zeleň – kolagenní

TRACHEA, zelený trichrom (světlá zeleň – kolagenní

vlákna)

chrupavka

vazivo

epitel

T2


Слайд 30 Weigert van Giesonova
metoda
Weigertův hematoxylin
pikrofuchsin
Jádra – hnědá
Kolagenní vlákna

Weigert van Giesonovametoda Weigertův hematoxylinpikrofuchsinJádra – hnědáKolagenní vlákna - červenáCytoplasma, svaly

- červená
Cytoplasma, svaly a erytro-
cyty se barví žlutě
Hrot jazyka

T3



  • Имя файла: histologická-technika-2.pptx
  • Количество просмотров: 102
  • Количество скачиваний: 0