Что такое findslide.org?

FindSlide.org - это сайт презентаций, докладов, шаблонов в формате PowerPoint.

Обратная связь

Презентация на тему Histologická technika 2

Содержание

3. Fyzikální metody fixaceVysoké teploty : varem, suché
4. Zmrazovací metodyV histochemii výborné pro průkaz enzymů
5. Chemické metody = Fixační tekutinyFormolBróm formolBakerova tekutinaBouinova tekutinaTekutiny se sublimátem:SusaZenkerova tekutina/ jodování /100 % ethanolAceton
6. Formol : je nejvíce používanýJe 40 %
7. Bakerova tekutinaSložení:10 % formolCaCl2VodaVýborná fixační tekutina pro průkaz lipidů
8. 3/ Kombinace Fyz. a Chemických metod.Znamená podchladit
9. Zalévání tkáníProč se tkáň musí zalít ??
10. Odvodnění a IntermediumOdvodnění se provede vzestupnou
11. Prosycení parafínem, ZalitíTeplota u
12. Zalévací komůrkaParafínovébločky
13. Další zalévací mediumCeloidin / nitrát celulózy rozpustný
14. Krájení řezůMikrotom – přístroj k krájení řezů2
15. Odvodňovací automat(autotechnikon)Rotační MikrotomPřístroje pro zpracování histologického materiálu
16. Rotační mikrotomMikrotomové nože
17. Přilepení a napnutí parafínových řezůElektricky vyhřívaná ploténka
18. Barvení řezů Barvivá : přírodní ,syntetickáBasická barviva
20. Struktury, cytoplasma v buňkách1/ basofilní / jádro/,
21. Basofilní cytoplasma , eosinofilní cytoplasma
22. Metoda Hematoxylin - EosinTato přehledná barvící metoda patří mezi nejpoužívanějšíViz – tabule v rotundě
23. Barvení hematoxylinem - eosinem
24. Přehledné barvící metody1/ Hematoxylin – eosin2/ žlutý
26. Montování řezůJe ve skutečnosti přilepení krycího sklíčka
27. Jazyk, HE (kolagenní vazivo růžové, svaly červené) B4
28. Jícen , H.E. , preparát . T 1
29. TRACHEA, zelený trichrom (světlá zeleň – kolagenní
30. Weigert van Giesonovametoda Weigertův hematoxylinpikrofuchsinJádra – hnědáKolagenní
31. Скачать презентацию
32. Похожие презентации

Fyzikální metody fixaceVysoké teploty : varem, suché teplo méně často využívané v histologiiNízké teploty : často využívané ,předevšímv histochemii./ průkaz enzymů, lipidů /Zmrazovací metody / freezing methods /Tzn. rychle zmrazit kousek odebrané tkáněza velmi nízkých teplot

Histologická technika 2Mudr.Richard Becke

Fyzikální metody fixaceVysoké teploty : varem, suché teplo méně často využívané v

Zmrazovací metodyV histochemii výborné pro průkaz enzymů a lipidů (histochemie prokazuje chemickélátky

Chemické metody = Fixační tekutinyFormolBróm formolBakerova tekutinaBouinova tekutinaTekutiny se sublimátem:SusaZenkerova tekutina/ jodování /100 % ethanolAceton

Formol : je nejvíce používanýJe 40 % roztok formaldehydu v vodě,to je

Bakerova tekutinaSložení:10 % formolCaCl2VodaVýborná fixační tekutina pro průkaz lipidů

3/ Kombinace Fyz. a Chemických metod.Znamená podchladit si fixační tekutinu.Např. Aceton :

Zalévání tkáníProč se tkáň musí zalít ?? Za účelem zkrojení tkáně na

Odvodnění a IntermediumOdvodnění se provede vzestupnou řadou alkoholů./30%,50%,70%,80%,96%/Nahradit vodu v tkáních

Prosycení parafínem, ZalitíTeplota u parafínu:56 – 58 st.Celsia.3 lázně

Další zalévací mediumCeloidin / nitrát celulózy rozpustný v alkohol éteru – princip

Krájení řezůMikrotom – přístroj k krájení řezů2 základní typy: sáňkový mikrotom

Odvodňovací automat(autotechnikon)Rotační MikrotomPřístroje pro zpracování histologického materiálu

Přilepení a napnutí parafínových řezůElektricky vyhřívaná ploténka

Barvení řezů Barvivá : přírodní ,syntetickáBasická barviva : HematoxylinToluidinová modřThioninMethylenová

Struktury, cytoplasma v buňkách1/ basofilní / jádro/, ribosomy, GER: podmiňují basofilii cytoplasmy2/

Basofilní cytoplasma , eosinofilní cytoplasma

Metoda Hematoxylin - EosinTato přehledná barvící metoda patří mezi nejpoužívanějšíViz – tabule v rotundě

Přehledné barvící metody1/ Hematoxylin – eosin2/ žlutý trichróm3/ zelený trichróm4/ modrý trichróm5/

Montování řezůJe ve skutečnosti přilepení krycího sklíčka na obarvený řez.Montovací média nerozpustná

Jazyk, HE (kolagenní vazivo růžové, svaly červené) B4

TRACHEA, zelený trichrom (světlá zeleň – kolagenní

Weigert van Giesonovametoda Weigertův hematoxylinpikrofuchsinJádra – hnědáKolagenní vlákna - červenáCytoplasma, svaly a

azocarmine, anilínová modř, orange GAZANSval - červenýKolagenní vlákna - modráJádra - červenáPhotomicrographs: Collection of ÚHIEMZJ

Слайды презентации

Слайд 2

Слайд 3 Fyzikální metody fixace
Vysoké teploty : varem, suché teplo

Fyzikální metody fixaceVysoké teploty : varem, suché teplo méně často využívané

méně často využívané v histologii

Nízké teploty : často využívané

,především
v histochemii./ průkaz enzymů, lipidů /

Zmrazovací metody / freezing methods /
Tzn. rychle zmrazit kousek odebrané tkáně
za velmi nízkých teplot

Слайд 4 Zmrazovací metody
V histochemii výborné pro průkaz enzymů a

Zmrazovací metodyV histochemii výborné pro průkaz enzymů a lipidů (histochemie prokazuje

lipidů (histochemie prokazuje chemické
látky v buňkách).
Tekutý dusík,CO2,isopentan, heptan –

látky
rychle zmrazí kousek
odebrané tkáně

Cryotechnika
/ přístroj : cryocut /
Výhoda: rychlost výsledků
Možnost využít
v průběhu operace
Tzv.peroperační
biopsie

Слайд 5 Chemické metody = Fixační tekutiny
Formol

Bróm formol

Bakerova tekutina

Bouinova tekutina
Tekutiny

se sublimátem:
Susa
Zenkerova tekutina
/ jodování /

100 % ethanol
Aceton

Слайд 6 Formol : je nejvíce používaný
Je 40 % roztok

Formol : je nejvíce používanýJe 40 % roztok formaldehydu v vodě,to

formaldehydu v vodě,
to je 100 % formol.
Nutno naředit na

10 % roztok / tedy 4%
roztok formaldehydu /.
Kys. mravenčí / HCOOH / vzniká na světle,proto :
Láhev z tmavého skla a neutralizovat :
CaCO3 – 10% neutrální formol

Doba fixace : 24 – 48 hodin

Слайд 7 Bakerova tekutina
Složení:
10 % formol
CaCl2
Voda

Výborná fixační tekutina pro průkaz

lipidů

Слайд 8 3/ Kombinace Fyz. a Chemických metod.
Znamená podchladit si

fixační tekutinu.

Např. Aceton : je lepší fixační tekutinou
podchlazený na

0 – 4 st.Celsia.

Další fixační tekutiny – viz tabule - rotunda

Слайд 9 Zalévání tkání
Proč se tkáň musí zalít ?? Za

Zalévání tkáníProč se tkáň musí zalít ?? Za účelem zkrojení tkáně

účelem
zkrojení tkáně na tenké řezy.
Nejpoužívanější médium je parafín

1/

Odvodnění
2/ Prosycení intermediem
3/ Prosycení parafínem
4/ Vlastní zalití

Слайд 10 Odvodnění a Intermedium
Odvodnění se provede
vzestupnou řadou

alkoholů./30%,50%,70%,
80%,96%/
Nahradit vodu v tkáních postupně až
100 % ethanolem.

Parafín

je s vodou
nesmísitelné medium.

Intermedium je látka
smísitelná s 100% alkoholem a zároveň se v ní rozpouští parafín.

Benzen,xylene,toluen.
Metylsalicylát,metylbenzoát.

Např. 3 lázně benzenu
po 15 minutách

Слайд 11 Prosycení parafínem, Zalití
Teplota u parafínu:
56

Prosycení parafínem, ZalitíTeplota u parafínu:56 – 58 st.Celsia.3 lázně zkvalitněnéhoparafínu./+

– 58 st.Celsia.
3 lázně zkvalitněného
parafínu./+ včelí vosk /
Postupně se

do tkáně
dostává parafín.

Zalévací komůrka
Teplota 56 – 58 st.C.
Přenést tkáň do parafínu.
Tvrzení / ochlazení /
parafínu.
Přitmelí se na dřevěný nosič
Výsledek : parafínový
bloček .

Слайд 12 Zalévací komůrka
Parafínové
bločky

Слайд 13 Další zalévací medium
Celoidin / nitrát celulózy rozpustný v

Další zalévací mediumCeloidin / nitrát celulózy rozpustný v alkohol éteru –

alkohol éteru – princip – odpaří se /.
Dobré zalévací

medium pro tzv . tvrdé
tkáně / chrupavka, kost, zub /.
Výhoda : zalévá se při pokojové teplotě
Nevýhoda : zalévání trvá dlouho – několik
týdnů.

Zalévací média rozpustná ve vodě : želatina, vosky rozpustné ve vodě, umělé pryskyřice / glycolmetakrylát /,celodal / derivát močoviny /

Слайд 14 Krájení řezů
Mikrotom – přístroj k krájení řezů
2 základní

typy: sáňkový mikrotom

rotační mikrotom

Výsledek : ukrojený tenký řez / 5 – 10 um / z parafínového bločku a přenesený a přilepený na podložní sklo
/ směsí glycerol – bílek, poly – L - lysine /

Слайд 15 Odvodňovací automat
(autotechnikon)
Rotační Mikrotom
Přístroje pro zpracování histologického materiálu

Слайд 16 Rotační mikrotom
Mikrotomové nože

Слайд 17 Přilepení a napnutí parafínových řezů
Elektricky vyhřívaná ploténka

Слайд 18 Barvení řezů Barvivá : přírodní ,syntetická
Basická barviva :

Hematoxylin
Toluidinová modř
Thionin
Methylenová violeť
Basický fuchsin
Methylénová modř
Kyselá barviva:
Eosin
Anilínová modř
Světlá zeleň
Oranž

G
Šafrán
Pikrofuchsin

Слайд 19

BARVENÍ

BASICKÁ (kationtová) – kladný náboj na barevné části,

reagují
s aniontovými skupinami struktur buněk a tkání
metylenová modř, toluidinová modř, thionin, (hematoxylin)
BASOFILIE, BASOFILNÍ STRUKTURA

KYSELÁ, ACIDICKÁ (aniontová) - záporný náboj na
barevné části barviva, reagují s kationtovými skupinami struktur
eosin, světlá zeleň, anilinová modř, pikrofuchsin, oranž G
ACIDOFILIE, EOSINOFILIE, OXYFILIE,
EOSINOFILNÍ STRUKTURA